MS培養基(Murashige和Skoog培養菸草)

MS培養基是Murashige和Skoog於1962年為菸草細胞培養設計的，其特點是無機鹽和離子濃度較高，是較穩定的離子平衡溶液，它的硝酸鹽含量高，其養分的數量和比例合適，能滿足植物細胞的營養和生理需要，因而適用範圍比較廣，多數植物組織培養快速繁殖用它作為培養基的基本培養基。 基於此，這種培養基就用他們的名字來命名了。

基本介紹

• 中文名：MS培養基
• 外文名：MS culture medium
• 功能：保證組織生長所需的礦質營養
• 顯著特點：硝酸鹽、鉀和銨的含量高
• 濃度 單位：mg/L

簡介

MS是人名Murashige and Skoog的縮寫。

MS培養基是目前使用最普遍的培養基。其具有較高的無機鹽濃度，能夠保證組織生長所需的礦質營養還能加速愈傷組織的生長。由於配方中的離子濃度高，在配製、貯存和消毒等過程中，即使有些成分略有出入，也不會影響離子間的平衡。MS固體培養基可用於誘導愈傷組織，也可用於胚、莖段、莖尖及花葯的培養，其液體培養基用於細胞懸浮培養時能獲得明顯的成功。MS培養基的無機養分的數量和比例比較合適，足以滿足植物細胞在營養上和生理上的需要。因此，一般情況下，不用再添加胺基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有機附加成分。和其它培養基的基本成分相比，MS培養基中的硝酸鹽、鉀和銨的含量高，這是它的顯著特點。

配方單

mg/L工作液濃度 單位

大量元素：

NH₄NO₃ 1650

KNO₃　1900

CaCl₂·2H₂O 440

MgSO₄·7H₂O 370

KH₂PO₄ 170

微量元素：

KI 0.83

H₃BO₃ 6.2

MnSO₄·4H₂O 22.3

ZnSO₄·7H₂O 8.6

Na₂MoO₄·2H2O 0.25

CuSO₄·5H₂O 0.025

CoCl₂·6H₂O 0.025

鐵鹽：

FeSO₄·7H₂O（27.8）

Na2-EDTA·2H2O（37.3）

有機物質：肌醇100

煙酸0.5

鹽酸吡哆醇（維生素B6） 0.5

鹽酸硫胺素（維生素B1） 0.1

甘氨酸2.0

注意：肌醇一般是要另外分開來獨自配成濃縮液，因為它比較難溶，一般配成100倍， 微量元素可以配成1000倍的。

配方表

大量元素; 成分	分子量	使用濃度 (mg/L)
硝酸鉀　KNO3	101.21	1900
硝酸銨　NH4NO3	80.04	1650
磷酸二氫鉀　KH2PO4	136.09	170
硫酸鎂　MgSO4·7H2O	246.47	370
氯化鈣　CaCl2·2H2O	147.02	440
微量元素
碘化鉀　KI	166.01	0.83
硼酸　H3BO3	61.83	6.2
硫酸錳　MnSO4·4H2O	223.01	22.3
硫酸鋅　ZnSO4·7 H2O	287.54	8.6
鉬酸鈉　Na2MoO4·2H2O	241.95	0.25
硫酸銅　CuSO4·5 H2O	249.68	0.025
氯化鈷　CoCl2·6H2O	237.93	0.025
鐵鹽
乙二胺四乙酸二鈉　Na2.EDTA	372.25	37.25
硫酸亞鐵　FeSO4·7H2O	278.03	27.85
有機成分
肌醇		100
甘氨酸		2
鹽酸硫胺素　VB1		0.1
鹽酸吡哆醇　VB6		0.5
煙酸　VB5 或 VPP		0.5
蔗糖　sucrose	342.31	30g /L
瓊脂　agar		7 g /L

注意事項

1.母液Ⅱ及母液Ⅳ的配製方法是：每種母液中的幾種成分稱量完畢後，分別用少量的蒸餾水徹底溶解，然後再將它們混溶，最後定容到1 L。

2.母液Ⅲ的配製方法是：將稱好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分別放到450 mL蒸餾水中，邊加熱邊不斷攪拌使它們溶解，然後將兩種溶液混合，並將pH調至5.5，最後定容到1 L，保存在棕色玻璃瓶中。

MS培養基中還需要加入2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)、萘乙酸(NAA)、6 苄基嘌呤(6BA)等植物生長調節物質，並且分別配成母液(0 1 mg/mL)。其配製方法是：分別稱取這3種物質各10 mg，將2，4-D和NAA用少量(1 mL)無水乙醇預溶，將6BA用少量(1 mL)的物質的量濃度為0.1 mol/L的NaOH溶液溶解，溶解過程需要水浴加熱，最後分別定容至100 mL，即得質量濃度為0 1 mg/mL的母液。

4.組織培養是否能夠獲得成功，主要取決於對培養基的選擇。不同的培養基具有不同的特點，也就適合於不同的植物種類和接種材料。在開展組織培養項目時，首先要對各種培養基進行了解和分析，以便能從中選擇合適的使用。組培用的培養基一般包括基礎培養基和激素，但是植物激素的種類和數量，隨著不同培養階段和不同材料有變化，因此各培養基配方中均不列入植物激素。常用的基礎培養基除了有MS培養基，還有B5培養基，N6培養基。