基因擴增方法

基因擴增方法是使含有特定基因的DNA片段的拷貝數大量增加的方法。可分為體內和體外兩種情況。在體內可利用質粒作載體，通過重組質粒的大量拷貝使克隆的外源基因得以擴增。添加氯黴素可使某些質粒的含量達到2毫克/升培養液。也可以利用病毒載體，通過重組病毒在細胞中大量繁殖使基因得以擴增。

在體外是用DNA體外酶學擴散法，該法要求待擴增DNA(靶DNA)區域的兩側順序已知，然後人工合成引物。在含有靶DNA的溶液中加入大量引物，經變性退火後，加入DNA聚合酶和dNTP進行合成。重複以上步驟，可使靶DNA的數量劇增。此外，還可用該法將限制性內切酶切點等序列引入。1985年以來在重組DNA技術中得到廣泛套用，但所能合成的片段較短，複製錯誤率比在體內要大。