IgG抗體

IgG抗體

哺乳類動物抗體(又稱免疫球蛋白,immunoglobulin,簡稱Ig)的種型之一。抵抗病原入侵的抗體相關免疫力,主要由該種型下的四種類型所提供,也是唯一一種可以穿過胎盤為胎兒提供被動免疫力的種型。

基本介紹

  • 中文名:IgG抗體
  • 外文名:immunoglobulin G
  • 作用:激活補體,中和多種毒素的作用
  • 唯一能:在母親妊娠期胎盤保護胎兒的抗體
基本信息,功能,抗體技術,

基本信息

IgG抗體(immunoglobulin G)在免疫應答中起著激活補體,中和多種毒素的作用。IgG抗體持續時間長,是唯一能在母親妊娠期穿過胎盤保護胎兒的抗體。它們還從乳腺分泌進入初乳,使新生兒第一時間得到抗體保護。IgG是四鏈單體,占血清Ig總量的75%,是血清和細胞外液中最主要的抗體成分,可將人IgG分為四個亞類,依其在血清中濃度高低,分別為IgG1、IgG2、IgG3、IgG4。IgG自出生後三個月開始合成,三到五歲接近成人水平。主要由脾臟和淋巴結中的漿細胞產生,血清半衰期較長,約20~23天,是再次體液免疫應答產生的主要抗體,其親和力高,在體內廣泛分布,具有重要的免疫效應,是機體抗感染的主力軍,故臨床使用丙種球蛋白進行免疫治療時,應以每2~3周注射一次為宜。
IgG1、IgG3、IgG4可穿過胎盤屏障,在新生兒抗感染免疫中起重要作用;IgG1、IgG2、IgG4可通過其Fc段與葡萄球菌蛋白A(SPA)結合,藉此可純化抗體,或用於免疫診斷;IgG1、IgG3可高效激活補體,並可與巨噬細胞、NK細胞表面Fc受體結合,發揮調理作用、ADCC作用等;某些自身抗體和引起二、三型超敏反應的抗體也屬於IgG。

功能

1.激活補體經典途徑,介導溶菌和細胞毒作用;
2.介導ADCC效應
3.調理吞噬作用;
4.結合SPA;
5.中和毒素和病毒。
抗感染免疫尤其是再次免疫應答中發揮重要作用。IgG類自身抗體參與Ⅱ、Ⅲ型超敏反應

抗體技術

粗提法提取球蛋白
大多用硫酸銨鹽析法或硫酸鈉鹽析法。硫酸銨鹽析須經過多次沉澱,第一次用40%飽和度,第二次用35%飽和度,第三次用33%飽和度,經三次提取後的γ球蛋白基本是IgG成分。硫酸鈉法更簡便,用20%即可將γ球蛋白沉澱出來。經鹽析後的γ球蛋白雖大多屬於IgG,但還有5%其他區帶蛋白,如γ區的雜蛋白。又因IgG組分中還含其他所謂正常的IgG,產生干擾。因此鹽析法粗提的γ球蛋白只能用於一般的實驗,或者是抗體效價較高的抗血清。
離子交換層析法提取IgG
常用的離子交換劑有DEAE纖維素或QAE纖維素,以QAE-Sephadex最為理想,DE22、32、52也可套用。取QAE-SephadexA25或A50經酸處理並在0.05mol/LpH7.5~8.6的磷酸鹽緩衝液中平衡,將水分抽乾,稱濕重Ig加於10ml血清中,在室溫30min後,離心或過濾除去離子交換劑。上清液再如此處理一次,即獲得較純的IgG,甚至不含其他雜蛋白。用該技術純化IgG簡便,不損壞抗體,既可小量提取,也可大量製備。
親和層析法提取特異性IgG
將純化抗原或粗製抗原(如是單價特異性則對抗原要求不高)交聯Sepharose4B製成親和層析柱,將抗血清過柱後洗去未結合的雜蛋白,再用硫氰酸鉀洗脫,流出的是純的特異性IgG抗體。因硫氰酸鉀對抗體有破壞作用,應及時透析除去。純化的IgG因含量低,失去保護作用,應及時套用或凍乾保存,亦可20℃保存,但皆不理想;加入三乙醇胺或甘油可起保護作用。
酶解法製備F2片段
胃蛋白酶對IgG的作用點是在連線兩重鏈的二硫鍵靠C端處(232胺基酸處),結果兩個Fab由二硫鍵連線,保留了抗體的結合點。與IgG相比,F(ab')2的特點是去掉了Fc段,這樣在細胞免疫實驗中免除了受體作用;同時也使IgG失去主要的抗原特性,不被抗IgG抗體結合;在反向間接血凝中,用F(ab')2致敏羊紅細胞比用IgG效果好。

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