基本介紹
- 中文名：螢光檢測
- 外文名：fluorescent detection
- 性質：自然發光反應
- 途徑：通過螢光素酶與 ATP進行反應
- 套用於 ：化妝品製造業中
主要缺點,基本特點,使用方法,流式,螢光顯微鏡,共聚焦,全內反射,雙光子,高內涵藥篩系統,
主要缺點
螢光檢測的主要缺點在於只有少數化合物產生螢光。大多數的分子不發螢光，但含有可衍生的官能團用於合成能發螢光的衍生物，例如，鄰苯二甲醛是一種常用螢光基團用於柱後衍生胺基酸。雖然螢光檢測很靈敏，但對於常見的樣品分析來說不需要如此高的靈敏度。因為ELSD的回響不依賴於螢光基團，所以不需要衍生，因此大大降低了樣品預處理和分析時間。
基本特點
螢光定量：採用國際主流的螢光定量PCR技術，迅速提升技術水平。
螢光檢測
螢光檢測封閉操作：全部檢測過程均為閉管操作，於反應管處檢測螢光，有效防止污染，解決PCR技術中最棘手之難題。
準確定量：滿足臨床對量化的需求，定量盪圍寬，可涵蓋大部分病原微生物，自動曲線擬合。
靈敏度高：利用光譜信號靈敏性的優勢，有效提高檢測靈敏度。
安全：全程無毒檢測。
操作簡便：省去後處理的煩瑣過程。
直接列印：直接列印結果，無須記錄大量數據。
升級版：FS1000有與電腦連線的數傳輸口，可以連線電腦，根據用戶需要提供先進分析軟體，全面分析實驗數據。（電腦和印表機選配件）
故障率低：維護非常簡單。
節約資源：可利用現用PCR擴增儀，最大限度節約資源。
使用方法
流式
優點是速度快，非常適合做大數量統計，且樣品只被檢測一次，完全不用擔心螢光淬滅的問題。缺點是只能檢測螢光的有無、強度大小，無法提供空間定位信息，無法做螢光定位變化的實驗；由於樣品只被檢測一次，因此無法對同一個樣品進行連續觀察。例如，做膜蛋白定位時會得到這么一個結果——用流式可以檢測出信號，但是用顯微鏡卻看不到東西，排除儀器和濾光片選擇問題，很可能是核的自發螢光或非特異標記造成流式的假陽性結果。
螢光檢測
螢光檢測螢光顯微鏡
剛好與流式互補，可很好地進行空間觀察，判斷目標蛋白的定位，但是不適合做大流量檢測，估計沒人能經得起時間的考驗。有不同倍率的物鏡選擇，可以使用高倍物鏡看精細結構，或用小倍率物鏡做少量統計。與之搭配的CCD和軟體，是系統能否發揮性能的關鍵。尤其是CCD，從那么多商品里選一款合適的不容易，需要了解很多知識否則只能聽別人忽悠。
共聚焦
螢光顯微鏡的升級產品，具有很好的光學層切效果，能得到很好三維定位信息。但是，如果使用共聚焦的目的僅僅是為你的樣品拍一張靚照，取得一張好看的圖片，就讓人覺得可惜了。共聚焦基本都是全自動系統，可隨意定義照明區域、選擇多個螢光通路和設定定時取圖，所以，做Time-laps、FRAP和FRET有其獨到的優勢。另外，4Pi和STED又是其中的極品，具有超高的空間解析度，只是使用不方便，未必適合做生物實驗。
全內反射
螢光顯微鏡的另一種升級產品，屬於近場光學範疇，只適合且最適合做膜研究，無法看到胞內信息。也是用CCD成像，但是對CCD的要求更高——個人甚至覺得對CCD的要求是沒有上限的。
