螢光檢查法

螢光檢查法

螢光檢查法是一種婦科生殖系統疾病檢查診斷方法,比傳統的肉眼觀察法更客觀,靈敏度更高,實用性更強。提高婦科檢查結果的準確性,有利於及時診斷病症,起到早治療早康復的效果,更能進行宮頸癌和一些瘤變病症的的早期篩查,保護婦女健康。

基本介紹

  • 中文名:螢光檢查法
  • 套用領域:醫藥學
適應症,方法,使用器械,注意事項,

適應症

在皮膚病中適用於細菌、真菌、病毒、衣原體、支原體等病原體感染的快速診斷,以及紅斑狼瘡、皰疹樣皮炎、類天皰瘡等病的診斷。

方法

直接免疫螢光法
用以檢查病人的皮膚組織中有無免疫球蛋白或補體沉積,用特異螢光抗體直接滴加於待檢的標本上,由螢光標記的抗體與抗原發生特異結合。使之呈現螢光,根據螢光分布和形態確定抗原部位和性質。此法用已知的抗體檢查未知的抗原,但一種標記抗體只能查一種抗原,可直接採用病人的病變組織。如:紅斑狼瘡、皰疹樣皮炎、類天皰瘡等作冰凍切片,螢光染色。此法簡單、特異。
採集標本後,直接塗於載玻片上,自然乾燥後,丙酮固定10分鐘,待丙酮完全揮發後,加30 l特異性的螢光素標記的抗體,室溫濕盒內孵育30min,使標記的抗體與抗原發生特異性結合,取出後 蒸溜水沖洗去未結合的抗體,置螢光顯微鏡下觀察。
間接免疫螢光法
用以檢測病人血清中是否存在某種特異抗體或自身抗體,反應中的兩對抗原抗體相對應的特異結合,而第二抗體(螢光抗體)則針對第一抗體的結合體,由於第一抗原分子可與若干個抗體分子結合,因而第二結合反應後,靈敏度大大提高。本法常用於各種自身抗體的檢測。如:系統性紅斑狼瘡、硬皮病等。
標本采後,保存於轉送培養基中,臨用前混勻後取懸液塗片,固定後加入50 l用PH 7.2 PBS 1:16稀釋的特異性抗體,35℃孵育30分鐘,取出後用PH 9.0的0.01 M的磷酸鹽緩衝液浸泡10分鐘,乾燥後用50 l 1:500稀釋的螢光抗體(第二抗體),35℃孵育30min,蒸溜水沖洗,乾燥後甘油封固加蓋玻片鏡下觀察。
補體結合法
本法是在間接法的基礎上發展而成的,即在抗原抗體反應時,加入補體,再用螢光標記的抗補體抗體進行示蹤。如:檢測妊娠皰疹病人的自身抗體。

使用器械

醫用螢光棒
醫用螢光棒是一種化學發光的照明光源,把醫用螢光棒貼在陰道擴張器葉片內側,作為進行陰螢光視診的照明光源,用於婦科常規檢查、宮頸癌及癌前病變的篩查,本產品為一次性使用產品,不與人體接觸,無毒、無放射性。

注意事項

1.每次試驗應該設陽性和陰性對照。
2. 應注意螢光抗體的質量。
3. 標本應及時檢測,並避光保存。

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