螢光檢測器(Fluorescence Detector,簡稱FLD)是高壓液相色譜儀常用的一種檢測器。用紫外線照射色譜餾分，當試樣組分具有螢光性能時，即可檢出。
基本介紹
- 中文名：螢光檢測器
- 外文名：Fluorescence Detector
- 簡稱：FLD
- 類型：高壓液相色譜儀常用的一種檢測器
- 拼音：yingguangjianceqi
- 特點：選擇性高、靈敏度高等
特點,檢測原理,螢光產生,定量基礎,類型,激發光譜,發射光譜,
特點
選擇性高，只對螢光物質有回響；靈敏度也高，最低檢出限可達10-12ug/ml，適合於多環芳烴及各種螢光物質的痕量分析。也可用於檢測不發螢光但經化學反應後可發螢光的物質。如在酚類分析中，多數酚類不發螢光，為此先經處理使其變為螢光物質，而後進行分析。
檢測原理
化合物受紫外光激發後，發射出比激發光波長更長的光，稱為螢光；
螢光強度 (F) 與激發光強度 (I0) 及螢光物質濃度 (C) 之間的關係為：F=2.3QKI0εCl
F=KC
Q為量子產率，K為螢光效率，ε為摩爾吸光係數，l為光徑長度。
螢光產生
從電子躍遷的角度來講，螢光是指某些物質吸收了與它本身特徵頻率相同的光線以後，原子中的某些電子從基態中的最低振動能級躍遷到較高的某些振動能級。電子在同類分子或其他分子中撞擊，消耗了相當的能量，從而下降到第一電子激發態中的最低振動能級，能量的這種轉移形式稱為無輻射躍遷。由最低振動能級下降到基態中的某些不同能級，同時發出比原來吸收的頻率低、波長長的一種光，就是螢光。被化合物吸收的光稱為激發光，產生的螢光稱為發射光。螢光的波長總要長於分子吸收的紫外光波長，通常在可見光範圍內。螢光的性質與分子結構有密切關係，不同結構的分子被激發後，並不是都能發射螢光。
定量基礎
在光致發光中，發射出的輻射總依賴於所吸收的輻射量。由於一個受激發的分子回到基態時可能以無輻射躍遷的形式產生能量損失，因而發射輻射的光子數通常都少於吸收輻射的光子數，它以量子效率Q來表示。
在固定的實驗條件下，量子效率是個常數，通常Q小於1。對可用螢光檢測的物質來說，Q值一般在0.1～0.9之間。螢光強度F與吸收光強度成正比。對於稀溶液，螢光強度與螢光物質溶液濃度、摩爾吸光係數、吸收池厚度、入射光強度、螢光的量子效率及螢光的收集效率等成正相關。在其他因素保持不變的條件下，物質的螢光強度與該物質溶液濃度成正比,這是螢光檢測器的定量基礎。螢光檢測器屬於溶質型檢測器，可直接用於定量分析。
類型
螢光涉及光的吸收和發射兩個過程，因此任何螢光化合物，都有兩種特徵的光譜：激發光譜(excitation spectrum)和發射光譜(emission spectrum)。
激發光譜
螢光屬於光致發光，需選擇合適的激發光波長(Ex)以利於檢測。激發波長可通過螢光化合物的激發光譜來確定。激發光譜的具體檢測辦法是通過掃描激發單色器，使不同波長的入射光激發螢光化合物，產生的螢光通過固定波長的發射單色器，由光檢測元件檢測。最終得到螢光強度對激發波長的關係曲線就是激發光譜。在激發光譜曲線的最大波長處，處於激發態的分子數目最多，即所吸收的光能量也最多，能產生最強的螢光。當考慮靈敏度時，測定應選擇最大激發波長。
發射光譜
一般所說的螢光光譜，實際上僅指螢光發射光譜。它是在激發單色器波長固定時，發射單色器進行波長掃描所得的螢光強度隨螢光波長(即發射波長，Em)變化的曲線。螢光光譜可供鑑別螢光物質，並作為螢光測定時選擇合適的測定波長的依據。
另外，由於螢光測量儀器的特性，使光源的能量分布、單色器的透射率和檢測器的回響等性能會隨波長而變，所以同一化合物在不同的儀器上會得到不同的光譜圖，且彼此間無類比性，這種光譜稱為表觀光譜。要使同一化合物在不同的儀器上能得到具有相同特性的螢光光譜，則需要對儀器的上述特性進行校正。經過校正的光譜稱為真正的螢光光譜。
激發波長和發射波長是螢光檢測的必要參數。選擇合適的激發波長和發射波長，對檢測的靈敏度和選擇性都很重要，尤其是可以較大程度地提高檢測靈敏度。
