基本介紹
- 中文名：牛血清蛋白
- 外文名：Bovine albumin
- 中文同義詞：血清蛋白；血清白蛋白
- 詞條分類性質：名詞詞組，偏正詞組
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基本信息
【詞條中文名稱】牛血清白蛋白
【中文同義詞】蛋白粉；牛白蛋白；卵蛋白粉；血清蛋白；血清白蛋白；牛血蛋白質；複合胺基酸；牛血清蛋白；牛血清白蛋白；血清白蛋白（牛）
【詞條拼音名稱】Níuxuèqīng báidànbái
【詞條英文名稱】Bovine albumin
牛血清白蛋白
牛血清白蛋白【詞條英文別名】Bovine serum albumin
【詞條英文同義詞】nhsa;BSA-C;AC-BSA;ALBUMIN, PIG;albumenpowder;SERUM ALBUMIN;ACETYLATED BSA;BSA ACETYLATED;Bovine albumin;BSA, METHYLATED
【詞條分類性質】名詞詞組，偏正詞組
【詞條適用範圍】醫學領域，藥學領域
【CAS數字登錄號】9048-46-8
BSA結構
CBNumber: | CB5107573 |
分子式： | N/A |
英文別名： | Bovine serum albumin |
化學性質
溶解度 : PBS: >40 mg/mL
牛血清白蛋白
牛血清白蛋白form : lyophilized powder
Merck : 13,8542
穩定性： 穩定 ，不兼容氧化劑：強酸 儲存條件 : 2-8°C
用途介紹
1、生化研究、遺傳工程和醫藥研究
2、醫藥保健食品、調味品
3、維持滲透壓、pH緩衝、載體作用
生產方法
以牛血為原料分離出血清，用硫酸銨分級沉澱後，經辛酸處理精製而得。
貯存方法
每10g加100ml水進行溶解，或用 PBS溶解也可，視用途而決定。然後分裝成小支。若不使用防腐劑可貯存在零下20或30攝氏度的恆溫櫃中，若使用防腐劑（如0.1%疊氮化鈉）則可貯存在零上4攝氏度的環境下。一般可存放數月不變質。防腐劑可能對牛血清白蛋白的效果造成影響，應慎用。
BSA結構
成分結構
牛血清中的簡單蛋白，是血液的主要成分（38g/100ml），分子量68kD。等電點4.8。含氮量16%，含糖量0.08%。僅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581個胺基酸殘基組成，其中35個半胱氨酸組成17個二硫鍵，在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽離子、陰離子和其他小分子物質結合。血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩衝作用、載體作用和營養作用。在動物細胞無血清培養中，添加白蛋白可起到生理和機械保護作用和載體作用。牛血清白蛋白（BSA），又稱第五組分，是牛血清中的一種球蛋白，包含583個胺基酸殘基，分子量為66.430 kDa，等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的套用，例如在western blot中作為Blocking agent。
BSA作用
BSA一般做為穩定劑被用於限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應液中，因為有些酶在低濃度下不穩定或活性低。加入BSA後，它可能起到“保護”或“載體”作用，不少酶類添加 BSA後能使其活性大幅度提高。不需要加BSA的酶加入BSA一般不會受到什麼影響。對多數底物DNA而言，BSA可以使酶切更完全，並可實現重複切割。在37℃，酶切反應超過1h時，BSA可以使酶更加穩定，因為在不含BSA的反應緩衝液中，許多限制性內切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的時間。而BSA可以結合緩衝液或底物DNA中抑制限制性內切酶活性的金屬離子和其它化學物質。
1.BSA是酶的穩定劑，防止酶的分解和非特異性吸附；
2.BSA能減輕有些酶的變性，能減輕有些不利環境因素如加熱，表面張力及化學因素引起的變性，至於作用機理還不明確，可能是因為它結構中有17個二硫鍵和一個巰基，巰基的化學反應很活潑，二硫鍵有抗氧化還原的作用，因此可與多種陽離子、陰離子和小分子結合；
3.BSA能防止酶吸附到管壁而損失。
牛血清蛋白介紹
牛血清白蛋白的相對分子質量為10的4次方這個級別，它不是一定的，而是多聚物的，有的地方測試數據為70 000，這一數據是在做PCR的時候使用的數據。
牛血清白蛋白分子式
牛血清白蛋白分子式牛血清白蛋白是血液中的主要成分（38g/100ml），分子量68kD，等電點4.8，含氮量16%，含糖量0.08%，僅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581個胺基酸殘基組成，其中35個半胱氨酸組成17個二硫鍵，在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽離子、陰離子和其他小分子物質結合。
牛血清蛋白溶液可以作為測量蛋白質含量的標準曲線用。
一般買回來的牛血清蛋白是細小片狀的乳白色粉末。牛的血清蛋白也以鐵為基本原料。
用途
1、特純級牛血清蛋白
用途：用作酶標、金標等診斷試劑的封閉劑，生化試驗等。
電場対超感牛血清白蛋白截留率的影響
電場対超感牛血清白蛋白截留率的影響性狀：淡黃色乾燥粉末
2、無脂肪酸牛血清蛋白
用途：用作酶標、金標等診斷試劑的封閉劑、保護劑，尤其適用於容易受脂肪酸影響的產品和試驗。
性狀：淡黃色乾燥粉末
3、無蛋白酶牛血清蛋白
用途：用於酶標、金標等診斷試劑的封閉劑、保護劑，尤其適合血液脂類的診斷試驗、脂類診斷試劑及對純度要求高的產品。
性狀：淡黃色乾燥粉末
4、細胞培養級牛血清蛋白
用途：無血清培養基的蛋白添加劑，供細胞培養使用。
性狀：淡黃色乾燥粉末白蛋白
測定
標準曲線
一般用分光光度法測物質的含量，先要製作標準曲線，然後根據標準曲線查出所測物質的含量。因此，製作標準曲線是生物檢測分析的一項基本技術。
測定方法
1. 凱氏定氮法
2. 雙縮脲法
3. Folin-酚試劑法
4. 紫外吸收法
5. 考馬斯亮藍法
標準曲線製作
試劑
1. 考馬斯亮藍試劑：
考馬斯亮藍G—250 100mg溶於50ml 95%乙醇，加入100ml 85% H3PO4，用蒸餾水稀釋至1000ml,濾紙過濾。最終試劑中含0.01%（W/V）考馬斯亮藍G—250,4.7%（W/V）乙醇，8.5%（W/V）H3PO4。
2. 標準蛋白質溶液：
器材
1. 722S型分光光度計使用及原理。
2. 移液管使用。
製作步驟
試管編號 0 1 2 3 4 5 6
100ug/ml標準蛋白（ml） 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6
0.15mol/L NaCl （ml） 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4
考馬斯亮藍試劑 （ml） 5 5 5 5 5 5 5
搖勻，1h內以1號管為空白對照,在595nm處比色
3、以A595nm為縱坐標，標準蛋白含量為橫坐標（六個點為10ug、20 ug、30 ug、40 ug、50 ug、60 ug），在坐標軸上繪製標準曲線。
（1）、利用標準曲線查出回歸方程。
（2）、用公式計算回歸方程。
（3）、或用origin作圖 ，測出回歸線性方程。即A595nm=a×X( )+6
一般相關係數應過0.999以上，至少2個9以上。
(4）、繪圖時近兩使點在一條直線上，在直線上的點應該在直線兩側。
含量的測定
一般被測樣品的A595nm值在0.1—0.05之間，所以上述樣品如果A595nm值太大，可以稀釋後再測A595nm值，然後再計算。
注意事項
1. 玻璃儀器要洗滌乾淨。
2. 取量要準確。
3. 玻璃儀器要乾燥，避免溫度變化。
4. 對照：用被測物質以外的物質作空白對照。
