實時性聚合酶鏈反應

實時性聚合酶鏈反應是一種定量測定樣品中特定DNA序列的聚合酶鏈反應。即使用標記(最常用是螢光標記)的PCR引物，因而能夠通過螢光監測到每一次PCR循環後擴增所得DNA產物的量，從連續監控下獲得的反應動力學曲線，可推導得樣品中被擴增模板DNA的原初含量。

PCR 產物的特異性取決於寡核苷酸引物與模板DNA互補的程度。引物設計的基本原則是最大限度地提高擴增效率和特異性，同時儘可能抑制非特異性擴增。反應中的引物至少應含有18個與模板序列完全互補的核苷酸（常用軟體通常默認為20個），最大不能多於38個，否則最適延伸溫度會超過TaqDNA聚合酶的最適溫度（74℃），不能保證PCR擴增產物的特異性這樣才能保證擴增反應的特異性。