凝集效價

凝集效價

凝集素是一種糖蛋白能夠與紅細胞上的糖蛋白結合,使紅細胞凝集,經過倍比稀釋法,在血凝板觀察記錄得到凝集效價。

基本介紹

  • 中文名:凝集效價
  • 外文名:Agglutination titer
檢測,可能影響因素,

檢測

凝集素效價的檢測步驟:
(1)倍比稀釋:向“V”型血凝板個孔中加入20μLPBS 緩衝液,然後分別吸取樣品純化試液20μL 加入到“V”型血凝板的第一孔,混合後取出20μL 加入到第二孔,混合後亦取出20μL加入到第三孔,以此類推作倍比稀釋。微微搖動血凝板使其混勻。每孔加入20μL2%血球懸液,血球懸液加畢後繼續搖動1min ,血凝板在室溫置放2h。用肉眼觀察凝集反應情況,記錄凝集程度。(n=5)
(2)將凝集程度分為5個等級,從低到高分別以0、1、2、3、4 表示。
4:紅細胞完全凝集,呈一層薄膜片狀,均勻地分布在整個孔中,且邊緣不整齊。
3:紅細胞大部分凝集,但不成膜狀,周邊有較窄的透明帶,且有未凝集的紅細胞沉澱於孔底成紅色小圓點狀。
2:紅細胞部分凝集,周邊有較寬的透明帶,且有未凝集的紅細胞沉澱於孔底成紅色圓點狀,且相當於空白對照組的50%。
1:紅細胞大部分不凝集,有可見凝集顆粒,未凝集的紅細胞沉澱於孔底成紅色圓形狀。
0:紅細胞完全不凝集,全部沉澱於孔底成大的圓形狀,與空白對照組完全相同。
(3)血凝效價判斷:以能使50%紅細胞凝集的血凝素的最高稀釋倍數作為血凝效價,即上述表示為“2”的凝集程度所對應的稀釋倍數。
(4)樣品凝集素含量計算公式:
C=S0 *f*V/(f0 *W)*100%
式中S0 為標準樣品的濃度,f為待測樣品的凝集效價(如2的多少次方),V為待測樣品溶液的體積(ml),f0 為標準樣品的凝集效價,W為待測樣品質量。
凝集效價

可能影響因素

植物凝集素(簡稱PHA)不僅對動物血中的紅血球有一定的凝集作用,而且對血液中的淋巴細胞分裂有一定的刺激作用。而PHA對各種動物血的凝集效價,則是淋巴細胞體外培養中決定PHA適宜加人量的一個重要依據。在培養鹿茸血及靜脈血之前,做了PHA對這些物種的血液的凝集效價測定。採用了從菜豆、雪山豆和商喻中提取的三種PHA。結果發現,不同來源的PHA對同一種鹿血產生凝集作用所需的濃度略有不同;同一種PHA對鹿科不同物種的血的凝集效價也有不同,對起源越晚的物種,效價越低,這一趨勢十分明顯;在用三種不同來源的PHA試驗時,這一趨勢非常一致。並且在其他動物中,也反映出PHA對進化程度較高的動物,凝集效價較低的趨勢。
PHA是一類蛋白質,它們能夠使紅血球發生凝集,是因為它們能與細胞表面的某一些含酪的受體相結合。不同的PHA對於不同動物的紅血球凝集效價有不同,過去已有人發現,但是,我們的試驗卻表明,PHA對不同動物血的凝集效價,和動物起源早晚與進化程度有關。可以推測,各種動物紅血球細胞膜化學結構分子水平的差異,很可能是影響PHA凝集效價的決定性因素。因此,今後如能對這一現象的生物化學實質進行深人的研究,可對動物的分子進化學提供一些新的事實。

相關詞條

熱門詞條

聯絡我們