依賴核酸序列的擴增技術（nucleic acid sequence-based amplification, NASBA），是一種擴增RNA的新技術，是由一對引物介導的、連續均一的、體外特異核苷酸序列等溫擴增的酶促反應過程。最早在1991年，被 J Compton 定義為：a primer-dependent technology that can be used for the continuous amplification of nucleic acids in a single mixture at one temperature
基本介紹
- 中文名：依賴核酸序列的擴增技術
- 外文名：nucleic acid sequence-based amplification, NASBA
反應在42℃進行，可以在2h左右將模板RNA擴增約10～12倍，不需特殊的儀器。該技術一出現就被用於疾病的快速診斷和病人血清中HIV-1的定量檢測。
儘管RNA的擴增也可以使用反轉錄PCR技術（通過反轉錄形成單鏈DNA模板),NASBA相比則有自己的優勢：可以在相對恆溫的條件下進行（一般恆溫為41攝氏度）。
該技術用於醫學診斷，相對傳統的PCR技術更為穩定，準確。NASBA已經廣泛套用於細菌、病毒等多種病原微生物的檢測。
NASBA的簡要過程
1.RNA模板鏈進入反應混合物後，第一個引物首先與模板鏈的3'端結束
2. 反轉錄酶，合成反義，補償的DNA鏈
3. RNA 酶H，分解破壞RNA模板鏈（僅分解與DNA雜交結合的RNA鏈，不分解單鏈RNA）
4.第二個引物與DNA的5’端結合
5.T7 RNA polymerase 合成RNA補償鏈，並加入到步驟1中，使反應可以循環進行。
NASBA技術已經被用於多個單鏈RNA基因組的病原性病毒的快速檢測試驗中
