DNA遷移率變化實驗

DNA 遷移率變化試驗(DNA mobility shift assay,EMSA ),又稱凝膠阻滯試驗(Gel retardation assay ),在電場中裸露的DNA 朝正電極移動的距離是同其分子質量的對數成反比的,如果DNA 分子結合上一種蛋白質,那么由於分子質量加大,在凝膠中的遷移作用便會受到阻滯,朝正電極移動的距離也就相應縮短。所以當特定的DNA 片段同細胞提取物混合之後,若其在凝膠電泳中的移動距離變小了,這就說明它已同提取物中的某種特殊蛋白質分子發生了結合作用。

在此基礎上人們發展了用競爭凝膠阻滯試驗、雙色EMSA(Electrophoretic MobilityShiftAssays)法來檢測有無特異蛋白結合的DNA片段。雙色EMSA利用DNA-蛋白複合物和未結合蛋白的DNA電泳時在凝膠上具有不同的遷移速率,通過將DNA末端標記,可檢測到這種遷移速率的變化。目前常用核素、:地高辛或者生物素對DNA進行標記。

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