體外細胞轉化試驗是檢測受試物對體外培養的哺乳動物細胞轉化的遺傳毒理試驗。是將動物細胞在體外培養的環境下，將細胞暴露於致癌物，高度模擬致癌物在體內致癌的作用進行致癌物檢測的一種技術，可以有效的體外篩查致癌物質的致癌活性。不僅可以檢測具有遺傳毒性的潛在致癌物，還可以檢測非遺傳毒性致癌物的致癌活性。體外細胞轉化試驗是以所培養的細胞發生惡性轉化從而產生的形態改變為試驗終點，可直接在體外觀察並記錄細胞由正常轉化為具有腫瘤細胞性質的過程。
基本介紹
- 中文名：體外細胞轉化試驗
- 外文名：Cell transformation assay in vitro
- 領域：生物學 環境毒理學
- 常用的細胞系：C3H/10T1/2、BALB/C-3T3
- 目的：篩選出具有致癌活性的物質
介紹,常用的細胞系,篩查,結果判定方法,
介紹
體外細胞轉化是多階段的過程，具有致癌過程的某些特徵，最終產生具有成瘤性和形態學異常的轉化克隆。成纖維細胞體外轉化克隆的表型改變主要有：在氣管宿主的成瘤性、在半固體培養基中形成集落、細胞重疊成雜亂性生長等。
常用的細胞系
常用的細胞系有：
1）細胞株，敘利亞倉鼠胚胎細胞，最早套用的原代細胞系；
2）細胞系，C3H/10T1/2、BALB/C-3T3；
3）Bhas 42細胞系，將v-Ha-ras癌基因轉染的BALB/c 3T3細胞，被認為是已經啟動的了的細胞，可以直接檢測促癌劑。
篩查
細胞轉化試驗方法最初建立的目的是從人類接觸的日益繁多的化學品中篩選出具胡致癌活性的物質。早期方法僅能用於啟動劑的檢測，主要是基因毒性致癌物，後來發展起來的兩階段轉化試驗方法使其還可以套用於促癌劑的篩選，並得到廣泛的套用。最典型的啟動劑有3-甲基膽蒽（3-MCA）、N-甲基-N'-硝基-N-亞硝基胍（MNNG）等，促癌劑有佛波酯（TPA）、岡田酸（OA）等。
結果判定方法
體外細胞轉化試驗是以細胞形態惡性轉化為檢測終點。對轉化細胞的判定通常採用細胞灶法，計數克隆數，觀察鑑定轉化灶，單盲法觀察，由2人共同認定。轉化灶的判定標準採用“第二屆全國細胞和組織培養專題研討會”通過的鑑定指標：凡有50個以上聚集的細胞可認為是一個細胞灶。正常細胞灶,灶內細胞排列規則,束狀,細胞灶外圍區的細胞單層生長,規則。轉化細胞灶,灶內細胞由正常的長梭形變為短梭狀,失去接觸抑制,呈復層生長,排列紊亂,形成交叉和旋渦。
