相分辨螢光免疫分析法

相分辨螢光免疫分析法,利用正弦調製的激發光激發樣品,根據混合物中各螢光體的螢光壽命不同而進行螢光光譜分辨。

相分辨螢光免疫分析(PrFIA)是利用正弦調製的激發光激發樣品,根據混合物中各螢光體的螢光壽命不同而進行螢光光譜分辨。該法也可有效地降低背景螢光的干擾,且採用均相螢光免疫分析技術,但缺點是所用儀器複雜、實用性較差,其套用遠不如時間分辨螢光免疫分析廣泛。Kricka曾總結過這方面的研究工作。所涉及的檢測對象主要有苯巴比妥、人血清白蛋白、乳鐵傳遞蛋白、2,4-滴丙酸、甲狀腺素、苯並芘代謝物以及2,2-二氯苯氧乙酸等。Qzinskas等用藻紅蛋白和羧甲基靛青組成能量轉移對,並用它們分別標記甲狀腺素T3和T4抗體,建立了能量轉移相分辨均相螢光免疫分析法。由藻紅蛋白到受體的能量轉移導致了藻紅蛋白的螢光壽命和相角的改變,且這種變化的大小可以反映出能量轉移的程度,也就是說反映被標記抗體與抗原的結合程度。這種方法的優點是可以實現大分子量抗原的均相螢光免疫分析。

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