基本介紹
- 中文名:洗脫測定法
- 定義:將展開後的組分斑點處的吸附劑刮下,用適宜溶劑將組分洗脫溶出,然後用適當方法進行定量測定

洗脫測定法是將展開後的組分斑點處的吸附劑刮下,用適宜溶劑將組分洗脫溶出,然後用適當方法進行定量測定。常用方法為比色法、紫外-可見分光光度法,也可用電化學分析法等。電化學分析是根據溶液中物質的電化學性質及其變化規律,建立在...
圖1的“洗脫法”方案是由Tokyo Electron公司和IMEC合作開發,在2012年的SPIE 會議上發布,該方案分主要工藝步驟如下:先採用正性浸沒式光刻膠在 BARC 層上製作出大尺寸條狀結構;經過 UV 曝光和烘烤將光刻膠極性反轉,使其在後續洗脫中能夠溶於TMAH 顯影液;在光刻膠條狀結構上製作一層中性層;使用TMAH 將光刻...
峰洗脫體積(Ve)是被分離物質通過凝膠柱所需洗脫液的體積,其數值由物質分子量與凝膠孔隙的相互作用決定。在實驗中,Ve的測定方法根據樣品體積差異分為三種情況:樣品體積可忽略時取加樣至峰頂的體積,樣品體積較大時從樣品中點計算至峰頂,極大體積樣品則從載入起點至洗脫峰半高處。該參數與色譜柱的外水體積(V0...
在凝膠滲透色譜(GPC)分析中,洗脫體積直接關聯聚合物分子量分布,高分子量組分因洗脫速度快而對應較小數值。實驗操作中需考慮流動相流速、色譜柱參數及儀器譜帶展寬效應等因素對洗脫體積測定精度的影響。定義與計算方法 洗脫體積在高效液相色譜體系中稱為保留體積(VR),其計算公式為流動相流速(F)與保留時間(t_R...
梯度洗脫(gradient elution)又稱為梯度淋洗或程式洗脫。在同一個分析周期中,按一定程度不斷改變流動相的濃度配比,稱為梯度洗脫。在氣相色譜中,為了改善對寬沸程樣品的分離和縮短分析周期,廣泛採用程式升溫的方法。而在液相色譜中對組分複雜的樣品則採用梯度洗脫的方法。在同一個分析周期中,按一定程式不斷改變...
洗脫曲線是離子交換分離法中用於表征洗脫過程的核心分析工具,其以洗脫液體積為橫坐標、流出液中目標組分濃度為縱坐標繪製而成。曲線的形態直接反映洗脫效率,受流動相流速、樹脂粒度等因素調控,而唐南理論為解析其形成機理提供了基礎理論支撐。通過分析曲線峰形特徵,可最佳化分離條件並評估色譜柱性能。定義與原理 洗脫...
洗脫色譜法 洗脫色譜法(elution chromatography)是2016年公布的化學名詞。定義 樣品載入到色譜介質(柱或薄層板或紙)後,流動相連續通過色譜介質將樣品組分洗脫的色譜分析方法。出處 《化學名詞》第二版。
方法原理與技術要點 色譜分析條件採用C18反相色譜柱(250mm×4.6mm,5μm),流動相為甲醇與0.02mol/L乙酸銨水溶液,梯度洗脫程式根據樣品基質調整。紫外檢測器波長設定存在兩種模式:文獻[1]採用230nm,而麵包樣品檢測時調整為293nm以提升靈敏度。樣品前處理 液體樣品直接經0.45μm濾膜過濾 乳粉類樣品採用亞鐵氰化鉀-乙酸鋅
該方案通過石油醚除脂、梯度洗脫等技術改進,有效降低基質干擾,成為行業監管的核心技術手段。方法提要 樣品經過提取後,用液相色譜-串聯質譜法測定,以多反應離子監測模式進行監測,採用特徵離子豐度比進行定性,丙烯醯胺與內標峰面積比定量。本方法對丙烯醯胺的檢出限為0.00005µg,定量下限為0.0002µg;若...
該方法通過樣品預處理、酶水解、色譜柱吸附淨化及硫色素氧化萃取等步驟完成分析。樣品經高溫消化和酶解後,利用樹脂色譜柱分離雜質並經酸性氯化鉀洗脫,再以鐵氰化鉀與氫氧化鈉氧化生成硫色素,異丁醇萃取後測定螢光值。實驗需避光操作,平行樣品測定誤差需控制在±2.5%內,並以硫酸奎寧標準液校準儀器。硫色素萃取液應在...
分階段改變流動相的組成,流動相的組成呈階梯狀變化,稱為階段洗脫。逐漸改變流動相的組成,流動相的組成呈曲線或直線狀變化,稱為梯度洗脫。流動相形成梯度可用梯度洗脫儀。高效液相層析儀中常用幾個泵分別輸送不同的溶劑,控制各個泵的流量,就能控制洗脫劑的組成。改善層析分離效果的方法有:改變流動相的組成或pH,...
控溫程式使得較早被洗脫的被分析物能夠得到充分的分離,同時又縮短了較晚被洗脫的被分析物通過色譜柱的時間。氣相色譜的套用 套用 只要在氣相色譜儀允許的條件下可以氣化而不分解的物質,都可以用氣相色譜法測定。對部分熱不穩定物質,或難以氣化的物質,通過化學衍生化的方法,仍可用氣相色譜法分析。在石油化工、醫藥...
洗脫測定法 ①洗脫測定法,將展開後的組分斑點處的吸附劑刮下,用適宜溶劑將組分洗脫溶出,然後用適當方法進行定量測定。常用方法為比色法、紫外-可見分光光度法,也可用電化學分析法等。原位掃描法 ②原位掃描法,將展開後的薄層板放在光密度計內,以一定波長的光照射,同時使斑點移過光路,由於斑點對光的吸收,...
取出,放冷,用5%醋酸溶液稀釋至刻度,搖勻,濾過,精密量取續濾液0.5mL,置處理後的固相萃取柱上,滴加氨試液適量使柱內溶液的pH值約為9(上樣前,另取同體積的續濾液預先調試,以確定滴加氨試液的量),搖勻,待溶劑滴盡後,用水20mL沖洗,以含20%甲醇的5%醋酸溶液洗脫,用5mL量瓶收集洗脫液至刻度,...
洗脫餾份的分析按一定體積(5-10ml/管)收集的洗脫液可逐管進行測定,得到層析圖譜。依實驗目的的不同,可採用適宜的檢測方法(生物活性測定、免疫學測定等)確定圖譜中目的物的位置,並回收目的物。離子交換劑的再生與保存離子交換劑可在柱上再生。如離子交換纖維素可用2mol/:NaCl淋洗柱,若有強吸附物則可用0....
洗脫液測定總糖含量。收集洗脫液經蒸發濃縮,透析脫鹽,減壓乾燥,得到純的多糖晶體。總糖測定方法 苯酚試劑配製80%苯酚:80g苯酚(分析純重蒸餾試劑)加20g水使之溶解,可在冰櫃中避光長期貯存。6%苯酚:使用前用80%苯酚配製。標準曲線的製作:準確稱取葡萄糖20mg於500ml容量瓶中,加水至刻度,分別吸取0.4、0.6、...
流動相通常採用pH梯度緩衝溶液,通過調節鹽離子濃度實現洗脫控制。氯化鈉、磷酸鹽緩衝體系是常用洗脫液。發展歷程 1975年離子色譜技術的突破性發展為現代陰離子交換色譜奠定了方法學基礎。該技術作為離子色譜的核心分離機理之一,在1980年代後隨著高分子材料科學的進步,逐步實現了更高解析度和更快的分析速度。套用領域 主要...
⒌凝膠柱的重複使用、凝膠回收與保存一次裝柱後可以反覆使用,不必特殊處理,並不影響分離效果。為了防止凝膠染菌,可在一次層析後加入0.02%的疊氮鈉,在下次層析前應將抑菌劑除去,以免干擾洗脫液的測定。回收方法 如果不再使用可將其回收,一般方法是將凝膠用水沖洗乾淨濾乾,依次用70%、90%、95%乙醇脫水平衡至...
凝膠的代表是葡萄糖系列,洗脫溶劑主要是水。凝膠滲透色譜法主要用於有 機溶劑中可溶的高聚物(聚苯乙烯、聚氯已烯、聚乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯等)相對分子質量分布分析及分離,常用的凝膠為交聯聚苯乙烯凝膠,洗脫溶劑為四氫呋喃等有機溶劑。凝膠色譜不但可以用於分離測定高聚物的相對分子質量和相對分子質量分布,同時根據所...
對照品溶液 按各品種項下規定的方法製備。供試品溶液 按各品種項下規定的方法製備。色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑(4.6×250mm, 5μm);流速為每分鐘1.0ml;柱溫為40℃;檢測波長為254nm。各胺基酸峰間的分離度均應大於1.0。洗脫梯度如下:測定法 精密量取胺基酸對照品溶液200...
凝膠滲透色譜法為測定高聚物分子量和分子量分布提供了一個有效的方法,此外還可用來分離齊聚物、單體和聚合物添加劑等。離子色譜法 採用柱色譜技術的一種高效液相色譜法,樣品展開方式採用洗脫法。根據不同的分離方式,離子色譜可以分為高效離子色譜 、離子排斥色譜和流動相離子色譜3類。高效離子色譜法使用低容量的離子...
(4) 透明 將洗淨並完全乾後的膜條浸於透明液中10~15分鐘,取出平鋪於潔淨的玻板上,乾後即成透明薄膜,可於分光光度計上測定和作標本長期保存。(5) 含量測定 未經透明處理的醋酸纖維素薄膜電泳圖可按各藥品項下規定的方法測定,一般採用洗脫法或掃描法,測定各蛋白質組分的相對含量(1%)。瓊脂糖凝膠電泳法 操...
c-測得洗脫液中鋇的濃度,μg/ml;25-樣品溶液體積,ml;Vo- 標準採樣體積,L。8.3 時間加權平均濃度按GBZ 159 規定計算。9 說明 9.1 本法的檢出限為0.006μg/ml;最低檢出濃度為0.002mg/m(以採集75L空氣樣品計)。測定範圍為0.006~10μg/ml。相對標準偏差為0.4%~1.0%。9.2
然後選擇不同的洗脫劑(極性由強烈到弱或由弱到強)分步洗脫,可順利獲得色素含量高且易於乾燥的薑黃色素產品以及薑黃揮髮油產品。這種方法的主要特點是可一次性地將提取液中的色素和揮髮油完全分離開來,色素純度高,工藝簡單。含量測定 對薑黃色素的定量測定主要有以下方法:(1)分光光度法:此種方法主要是利用薑黃...
色譜條件:用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑,以0.05 mol/L磷酸鹽緩衝液(取0.05 mol/L磷酸二氫鉀溶液,用2 mol/L氫氧化鉀溶液調節pH值至5.0)-乙腈(99:1)為流動相A,以0.05 mol/L磷酸鹽緩衝液(pH 5.0)-乙腈(80:20)為流動相B,先以流動相A-流動相B(92:8)等度洗脫,待阿莫西林峰洗脫完畢...
凝膠滲透色譜(Gel Permeation Chromatography),簡稱GPC。此一類的色譜,使用於有機性溶媒的樣品中,如PVC,PS,ABS等等,而所用的洗脫液有THF,Chloroform等等。2.凝膠過濾色譜 凝膠過濾色譜(Gel Filtrarion Chromatography),簡稱GFC。此一種類的層析法,使用於水溶媒的試劑中,如蛋白質、澱粉及水性合成高分子...
色譜條件:用辛基矽烷鍵合矽膠為填充劑,以三氟乙酸-四氫呋喃-水(5:100:900)為流動相A,三氟乙酸-四氫呋喃-乙腈(5:100:900)為流動相B,按下表進行梯度洗脫,檢測波長為295nm,進樣體積20µL。系統適用性要求:系統適用性溶液色譜圖中,出峰順序依次為雜質Ⅰ、雜質Ⅱ與帕羅西汀,帕羅西汀峰、雜質Ⅰ峰與...
2021年對《中國藥典》原有檢測方法進行了三項重要最佳化:將雙相水解提取工藝簡化為單相水解,減少操作步驟 採用梯度洗脫色譜法提升分離效果 建立蘆薈大黃素等五種成分的標準曲線,線性範圍達0.005~0.5mg/mL 經方法學驗證,改進後的檢測體系具備以下特性:日內精密度RSD%,日間精密度RSD% 供試品溶液在24小時內穩定性...
可見,通過抑制柱將洗脫液轉變成了電導值很小的水,消除了本底電導的影響;試樣陰離子Br-則被轉化成了相應的酸H Br-,可用電導法靈敏的檢測。離子色譜法是溶液中陰離子分析的最佳方法。也可用於陽離子分析。空間排阻 (Steric Exclusion Chromatography)空間排阻色譜法以凝膠(gel) 為固定相。它類似於分子篩的作用,...
