基本介紹
- 中文名：理論塔板數
- 外文名：theoretical plate number）
- 用於：定量表示色譜柱的分離效率
- 板數：=5.54
- 拼音：liluntabanshu
- 又稱：柱效
定義,處理方法,反相柱,正相柱,離子交換柱,
定義
如果峰形對稱並符合常態分配，N可近似表示為：
理論塔板數=5.54(保留時間/半高峰寬)2 (2是平方)
柱效率用理論塔板數定量地表示：N=16*（t/w ）2。其中，t是溶質從進樣到最大洗脫峰出現的時間，w為該溶質的洗脫峰在基線處的寬度。在一色譜柱中用相同的洗脫條件時候，不同化合物的滯留時間與其洗脫峰寬度之比接近常數。因此理論塔板數大的色譜柱效率高。當然，N的大小和柱子長度有密切關係：理論塔板高度H=柱長/N，用H可以衡量單位長度的色譜柱的效率，H越小，則色譜柱效率越高。。。
N為常量時，W隨tR成正比例變化。在一張多組分色譜圖上，如果各組份含量相當，則後洗脫的峰比前面的峰要逐漸加寬，峰高則逐漸降低。
用半峰寬計算理論塔板數比用峰寬計算更為方便和常用，因為半峰寬更容易準確測定，尤其是對稍有拖尾的峰。
N與柱長成正比，柱越長，N越大。用N表示柱效時應註明柱長，，如果未註明，則表示柱長為1米時的理論塔板數。（一般HPLC柱的N在1000以上。）
若用調整保留時間（tR’）計算理論塔板數，所得值稱為有效理論塔板數（N有效或Neff）=16(tR’/W)2
處理方法
理論塔板數下降後可以考慮色譜柱再生
反相柱
分別用甲醇:水=90:10,純甲醇（HPLC級）,異丙醇（HPLC級）,二氯甲烷（HPLC級）等溶劑作為流動相,依次沖洗,每種流動相流經色譜柱不少於20倍的色譜柱體積.然後再以相反的次序沖洗.
正相柱
分別用正己烷（HPLC級）,異丙醇（HPLC級）,二氯甲烷（HPLC級）,甲醇（HPLC級）等溶劑做流動相,順次沖洗,每種流動相流經色譜柱不少於20倍的柱體積(異丙醇粘度大,可降低流速,避免壓力過高).注意使用溶劑的次序不要顛倒,用甲醇沖洗完後,再以相反的次序沖洗至正己烷.所有的流動相必須嚴格脫水.
離子交換柱
長時間在緩衝溶液中使用和進樣,將導致色譜柱離子交換能力下降,.用稀酸緩衝溶液沖洗可以使陽離子柱再生,反之,用稀鹼緩衝溶液沖洗可以使陰離子柱再生.
另外,還可以選擇能溶解柱內污染物的溶劑為流動相做正方向和反方向沖洗.但再生後的色譜柱柱效是不可能恢復到新柱的水平的.
如果柱子裝反了,可以調回來,但可能會造成柱內擔體塌陷.在不得已的情況下儘量不要反裝色譜柱.
