分子生物學與基因組學

分子生物學與基因組學

《分子生物學與基因組學》是2007年7月1日由科學出版社出版的一本圖書,作者是(德)穆哈德。本書主要講述了分子生物學與基因組學中的研究方法與方法的優缺點。

基本介紹

內容簡介,目錄,

內容簡介

目前,實驗室人員面臨的一大困惑是如何運用正確的工具和方法來闡釋。德國馬爾堡大學的 Muelhardt所著的《分子生物學與基因組學》為大家提供了很多有基因組所編碼的相關蛋白質的結構,功能和表達解釋益的實驗室小竅門和技巧,能夠大大提高實驗的成功率和準確性。這本實驗室指南簡單明快地介紹了分子生物學和基因組學中所涉及的各種現代方法和各種常規方法,並討論了每種方法的優點和不足。
作為“實驗者”系列中的一本,本書秉承了叢書一貫的風格,依然是一本非常實用的實驗室手冊,以簡捷明快的風格,用100多個圖表,為廣大的分子生物學和基因組學實驗室工作人員提供了大量的實用小貼士來補充和完善基礎知識,從而大大提高實驗的準確性和成功率。
本書適合分子生物學和基因組學領域的實驗室工作人員、科研工作者、教師和高年級本科生、研究生使用。

目錄

引言
第一版前言
致謝
1 什麼是分子生物學?
1.1 分子生物學基礎知識:讓初學者認識分子世界
1.2 分子生物學基本要求
1.3 實驗室安全
2 基本方法介紹
2.1 核酸的差異
2.2 核酸沉澱濃縮
2.2.1 乙醇沉澱法
2.2.2 濃縮裝置
2.2.3 冷凍乾燥
2.2.4 鹽析
2.3 核酸純化
2.3.1 酚氯仿抽提純化法
2.3.2 聚乙二醇沉澱法
2.3.3 蛋白結合濾膜純化法
2.3.4 陰離子交換柱純化法
2.3.5 玻璃乳純化法
2.3.6 氯化銫密度梯度離心法
2.3.7 透析法
2.4 核酸濃度測定
2.4.1 分光光度計法
2.4.2 瓊脂糖凝膠電泳法
2.4.3 點量化法
2.4.4 螢光定量法
2.4.5 核酸檢測計法
2.4.6 酶標誌法
2.5 DNA製備方法
2.5.1 質粒DNA的小量製備
2.5.2 質粒DNA的大量製備
2.5.3 細菌培養基
2.5.4 噬菌體DNA的製備
2.5.5 利用輔助噬茵體製備單鏈DNA
2.5.6 基因組DNA製備
3 分子生物學工具
3.1 限制性酶
3.1.1 命名法
3.1.2 活性測定
3.1.3 限制性酶切反應
3.1.4 限制性酶切難點
3.1.5 限制性酶切指南
3.2 凝膠
3.2.1 瓊脂糖凝膠
3.2.2 瓊脂糖凝膠中的DNA片段回收
3.2.3 聚丙烯醯胺凝膠
3.2.4 聚丙烯醯胺凝膠中的DNA片段回收
3.2.5 脈衝場凝膠電泳
3.2.6 毛細管電泳
3.3 印跡法
3.3.1 Sotlthern印跡法
3.3.2 Northern印跡法
3.3.3 點印跡法和縫印跡法
4 聚合酶鏈式反應
4.1 標準聚合酶鏈式反應
4.2 改進的聚合酶鏈式反應
4.2.1 巢式聚合酶鏈式反應
4.2.2 多重聚合酶鏈反應
4.2.3 長片段聚合酶鏈反應
4.3 聚合酶鏈式反應的套用
4.3.1 反轉錄聚合酶鏈式反應
4.3.2 cDNA末端的快速擴增
4.3.3 相同產物擴增
4.3.4 經典定量聚合酶鏈式反應
4.3.5 實時定量聚合酶鏈式反應
4.3.6 反向聚合酶鏈式反應
4.3.7 Biotin—RAGE聚合酶鏈式反應
4.3.8 改良引物誘變
4.3.9 擴增阻滯突變系統
4.3.10 原位聚合酶鏈式反應
4.3.11 循環測序
4.3.12 cDNA合成
4.3.13 單細胞聚合酶鏈式反應
5 RNA
5.1 RNA酶滅活
5.2 RNA提取方法
5.2.1 一步法
5.2.2 乙基苯基聚乙二醇裂解法
5.2.3 基本信息
5.2.4 RNA濃度測定
5.3 mRNA分離方法
5.3.1 購買RNA
5.4 逆轉錄:cDNA合成
5.5 體外轉錄:RNA合成
5.6 RNA干擾
6 克隆DNA片段
6.1 克隆的基本要素
6.1.1 載體
6.1.2 DNA片段
6.1.3 補平反應
6.1.4 DNA定量
6.1.5 連線
6.1.6 克隆PCR產物
6.1.7 用重組酶體系克隆
6.2 選擇克隆載體
6.2.1 質粒
6.2.2 噬菌體
6.2.3 柯斯質粒
6.2.4 P1人工染色體及細菌人工染色體
6.2.5 酵母人工染色體
6.3 選擇細菌
6.4 製備感受態細胞與轉化
6.4.1 氯化鈣法
6.4.2 氯化銣法
6.4.3 TSS法
6.4.4 電轉
6.4.5 效價檢測
6.5 克隆的相關問題
6.6 克隆的保存
7 雜交:如何檢測到DNA
7.1 製備探針
7.1.1 製備標記探針的方法
7.2 雜交
7.2.1 雜交緩衝液
7.2.2 雜交反應體系
7.2.3 雜交溫度
7.2.4 洗滌
7.3 標記DNA的驗證
7.3.1 放射自顯影技術
7.3.2 非放射性檢測方法
7.4 重組DNA庫的篩選
7.4.1 DNA庫板的製備
7.4.2 膜的轉移
7.4.3 膜的雜交
7.4.4 膜的曝光
7.4.5 克隆探測
7.4.6 今後對庫的篩選
7.5 雙雜交系統
8 DNA分析
8.1 測序
8.1.1 放射性測序
8.1.2 非放射性測序與自動測序單位
8.1.3 袖珍型測序
8.1.4 焦磷酸測序法
8.1.5 測序特性:八聚體
8.2 分析DNA突變的方法
8.2.1 限制性片段長度多態性
8.2.2 單鏈構象多態性
8.2.3 變性梯度凝膠電泳
8.2.4 時相溫度梯度電泳
8.2.5 異源雙鏈核酸分析
8.2.6 擴增阻滯突變系統
8.2.7 錯配酶切
8.2.8 截斷蛋白檢測
9 DNA序列功能的研究
9.1 組織內轉錄研究
9.1.1 核糖核酸酶保護實驗
9.1.2 實時定量PCR實驗
9.1.3 原位雜交
9.1.4 染色體螢光原位雜交
9.1.5 原位聚合酶鏈式反應
9.1.6 微陣列
9.2 突變
9.3 體外翻譯
9.4 表達系統
9.4.1 細菌表達系統
9.4.2 桿狀病毒表達系統
9.4.3 其他表達系統
9.4.4 哺乳動物細胞中的異源表達系統
9.4.5 轉染方法
9.4.6 多基因共轉染
9.4.7 瞬時和穩定轉染
9.4.8 報告基因
9.5 轉基因小鼠
9.5.1 轉基因方法
9.6 轉基因表達調控
9.6.1 四環素基因表達調控系統
9.6.2 蛻皮素基因表達調控系統
9.7 基因治療
9.8 基因組學
10 計算機套用
10.1 重要事項
10.2 實踐中存在的問題
11 職業生涯規劃建議:針對青年研究者的馬基雅維利短期課程
12 結束語
附錄1
圖示
標準溶液和細菌培養基
溶液
細菌培養基
術語表
附錄2
供應商
推薦文獻
休閒讀物
索引

相關詞條

熱門詞條

聯絡我們