X-α-Gal

X-α-Gal

X-α-Gal是一種酵母半乳糖苷酶(MEL1) 的顯色底物,用於在培養基直接檢測GAL4系統的酵母雙雜交作用。通過藍白顏色篩選,快速和簡便地識別陽性的藍色克隆,無需費時的α-半乳糖苷酶報告基因檢測。

基本介紹

  • 藥品名稱:X-α-Gal
  • 別名:5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-半乳糖苷
  • 外文名稱:5-Bromo-4-chloro-3-indoxyl-α-D-galactopyranoside;X-α-D-Galactoside
  • 主要適用症:請看正文
  • 用法用量:請看正文
  • 不良反應:請看正文
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量容

分子式

C14H15BrCNO6

分子量

408.64 g/mol
報告基因Mel表達後,在含X-α-Gal的平板上顯藍色

溶解性

清澈溶液(2%in DMF)

儲存

4℃ 避光避潮;長期存放-20℃

用途

X-α-半乳糖苷酶的作用底物,用於篩選含X-α-半乳糖苷酶基因的陽性酵母或細菌菌株。在組織化學中用於酶活性的檢測。

貯液

A)塗布於預製平板: 溶解24mg X-α-gal 於6 mL DMF中得到終濃度為4 mg/mL的溶液。
B)直接加入瓊脂中: 溶解60mg X-α-gal 於3 mL DMF中得到終濃度為20 mg/mL的溶液。

參考用法

塗布於預製平板
1.塗布200ul(15cm) 或者100ul(10cm) X-α-gal 貯液於預製平板上。
2. 放於37 oC培養箱至液體被吸收(約4小時)。
3. 將轉化細菌或酵母塗於平板上並於合適溫度培養至藍色菌落出現。
直接加入瓊脂中
1. 將已滅菌瓊脂培養基冷卻至55-50 oC。
2. 在已冷卻的培養基中加入20 mg/ ml X-α-Gal貯液,混勻,快速倒平板。
References
1. Aho S., Arffman A., Pummi T., Uitto J., A novel reporter gene MEL1 for the yeast two-hybrid system. Anal Biochem. 1997. 253, 270-2.
2. Chevalier P., et al., X-α-Gal-base medium for simultaneous enumeration of bifidobacteria and lactic acid bacteria in milk. J. Microbiol. Methods. 1991. 13, 75.
3. Gossrau R., Lojda Z., Histochemical detection of α-D-galactosidase with 5-Br-4-Cl-3-indoxyl α-D-galactoside. Acta Histochem. 1989. 85, 213-22.
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