T細胞增殖試驗

T細胞增殖試驗,又稱T細胞轉化試驗,增殖變化方式有細胞變化、細胞漿擴大等,類型是形態法,核素法。

基本介紹

  • 中文名:T細胞增殖試驗
  • 又稱:T細胞轉化試驗
  • 增殖變化:如細胞變化、細胞漿擴大等
  • 類型:形態法,核素法
原理,試驗類型,

原理

又稱T細胞轉化試驗。T細胞在體外經某種物質刺激,細胞代謝和形態相繼變化,在24~48h細胞內蛋白質和核酸的合成增加,產生一系列增殖的變化,如細胞變化、細胞漿擴大、出現空泡、核仁明顯、核染色質疏鬆等,由淋巴細胞轉變為淋巴母細胞。因此,這種淋巴細胞增殖又叫淋巴細胞轉化。據此可判斷出淋巴細胞對有關刺激的反應性與功能狀態。
(1) 非抗原性刺激物:如植物血凝素(PHA)、刀豆素A(ConA)、美洲商陸(PWM)、脂多糖(LPS),通稱促有絲分裂原。其中LPS刺激B細胞,PWM可刺激T和B細胞,PHA和ConA刺激T細胞增殖。
(2) 抗原性刺激物:如結核菌素、葡萄球菌毒素、破傷風類毒素、鏈球菌激酶、腫瘤抗原、同種異型組織抗原等。

試驗類型

(1) 形態法:其原則是將外周血液或分離的單個細胞與適量的植物血凝素(PHA)混合,置37℃培養72h,取培養細胞作塗片染色鏡檢。據細胞的大小、核與胞漿的比例、胞漿的染色性和核結構以及有無核仁等特徵,分別計數淋巴母細胞、過渡性母細胞和核有絲分裂相以及成熟的小淋巴細胞,以前三者為轉化細胞,每份標本計數200個細胞,計算轉化率。
(2) 核素法:絕大多數外周血T細胞通產處於細胞周期的G0期,受特異性抗原或促有絲分裂原激活後,從G0期進入G1期,開始合成蛋白質、RNA和DNA前體物質等,為DNA複製準備物質基礎,然後進入S期,細胞合成DNA量倍增,此時若在培養液中加入3H標記的TdR,後者摻入新合成的DNA中,據摻入的多少推測細胞增殖程度。

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