Rh血型鑑定

Rh血型鑑定一般指Rh系統中D抗原的檢測，根據病人紅細胞是否帶有D抗原，分為Rh陽性和Rh陰性。

簡介

中國漢族人的Rh陰性率為0.34%，絕大多數人為Rh陽性，故由Rh血型不合引起的輸血反應相對較ABO血型少。

Rh血型系統一般不存在天然抗體，故第一次輸血時，不會發現Rh血型不合。但Rh陰性的受血者接受了Rh陽性血液後，可產生免疫性抗Rh抗體，如再次輸受Rh陽性血液時，即可發生溶血性輸血反應。

Rh陰性母親孕育胎兒為Rh陽性，胎兒的紅細胞經胎盤進入母體，刺激母體產生抗Rh抗體，再經胎盤進入胎兒體內，由於第一胎產生的抗Rh抗體很少，極少發生新生兒溶血病。第二次懷孕Rh陽性胎兒，所產生抗Rh抗體增多，可致新生兒溶血病。若Rh陰性孕婦曾輸過Rh陽性血液史，或第一胎因Rh血型不合流產史，即令第一胎也可發生胎兒溶血病。

用品準備

Rh試劑血清：抗C、抗E、抗D、抗c、抗e；pH5.5磷酸鹽緩衝液；蛋白水解酶（如波蘿酶）；37℃水浴箱；待檢者紅細胞，各型陰、陽性對照紅細胞。其他材料同ABO血型鑑定。

方法操作

蛋白水解酶法

（包括鳳梨酶、木瓜酶、無花果酶、胰蛋白酶等） 以鳳梨酶介質法為例：

⑴取鳳梨酶1g，加pH5.5磷酸鹽緩衝液100ml，充分振搖混勻，置37℃水浴箱30min，離心沉澱後取上清液即1%鳳梨酶液。放置4℃冰櫃貯存。

血型的遺傳規律

⑵待檢者紅細胞及對照紅細胞用生理鹽水洗滌1次（有溶血的紅細胞除外），配成5%紅細胞懸液。

⑶取小試管15支，分3排，每排試管按C、c、D、E、e順序標記。

⑷每排第1管加抗C血清，第2管加抗c血清，第3管加抗D血清，第4管加抗E血清，第5管加抗e血清各1滴。

⑸第1排各管加待檢者紅細胞懸液各1滴，第2排加陽性對照紅細胞，第3排加陰性對照紅細胞。

⑹每排各管加1%鳳梨酶液1滴。

⑺混勻，置入37℃水浴箱中1h觀察結果，若無凝集，應查找原因。

結果判讀：?

⑴傾斜試管肉眼觀察，先看陽性對照管應凝集，陰性對照管不凝集，再看待檢者的試管有凝集者為陽性，無凝集者為陰性。如肉眼觀察有疑問者再做鏡檢。

⑵分別記錄，陽性或陰性。

⑶抗RhD陰性者，應作間接抗人球蛋白試驗，以免遺漏Du型。附註：凡檢查出體內有Rh抗體者，應發給Rh血型卡。需要時，一方面動員捐出血液，另—方面須提高警惕，以免接受不相合的血液而發生意外。

鹽水介質法

⑴試管法①取小試管3支，1支註明抗D，另1支註明陽性對照，最後1支註明陰性對照；②將室溫鹽水反應活性的抗D血清各1滴加入上述試管內；③抗D試管中加入1滴5%待檢者紅細胞（鹽水、血清）懸液，陽性對照及陰性對照試管中分別加入相應的陽性紅細胞及陰性紅細胞懸液1滴；④輕輕混勻，於3000r/min離心15s；⑤取出輕輕擺動觀察有無凝集。

血型匹配

結果判讀：抗D試管中出現凝集，而陰性對照試管不凝集，陽性對照試管凝集，待檢者為陽性；抗D管和陰性對照管均不凝集，陽性對照試管凝集，待檢者為陰性。

⑵平板法①取潔淨平板1塊，用記號筆劃出反應小格，在左側註明抗D，中間段註明陰性對照，右側註明陽性對照；②將室溫鹽水反應的抗D血清各1滴加入上述小格內；③抗D小格內加入待檢者5%紅細胞懸液1滴，陽性對照小格內加入陽性對照紅細胞懸液1滴，陰性對照小格加入陰性對照紅細胞懸液1滴；④用乾淨玻棒攪拌紅細胞懸液和試劑血清充分混合；⑤連續輕輕傾斜轉動平板，一般在2min內觀察結果，或按試劑說明書規定的時間觀察結果。

結果判讀：同試管法。