ABO血型鑑定

ABO血型鑑定

ABO血型鑑定是即指ABH血型抗原的檢測。紅細胞含A抗原的叫A型,含B抗原的叫B型,含A和B抗原的叫AB型;不含A、B抗原,而含H抗原的稱O型。

基本介紹

  • 中文名:ABO血型鑑定
  • 外文名:ABO blood group
  • 定義:指ABH血型抗原的檢測
  • 分類:分為A型、B型、O型、AB型
  • 用於:臨床輸血等
  • 鑑定方法:玻片法等
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正常範圍

ABO血型分為A型、B型、O型、AB型。

檢查介紹

ABO血型鑑定即指ABO血型抗原的檢測。

臨床意義

ABO血型鑑定主要用於:
1、臨床輸血:當循環血量不足或大失血或貧血需進行輸血治療,在輸血前必須先選擇血型相同的供血者,再進行交叉配血,完全相同後才能輸血。
2、在皮膚、腎移植等器官移植的時候選擇ABO血型相符的供體。
3、不孕症和新生兒溶血症病因的分析。
4、親子鑑定等。

鑑定方法

生理鹽水凝集法
①玻片法:操作簡單,適於大量標本檢查,但反應時間長;被檢查者如血清抗體效價低,則不易引起紅細胞凝集,因此,不適於反向定型。
ABO血型定型ABO血型定型
②試管法:由於離心作用可加速凝集反應,故反應時間短,而且,藉助於離心力可以使紅細胞接觸緊密,促進凝集作用,適於急診檢查。
紅細胞亞型抗原性弱,如抗A抗B標準血清效價低時,易造成漏檢或誤定。如加用O型(抗A、B)血清和反向定型,可避免此類錯誤。
玻片法凝集結果判斷:紅細胞呈均勻分布,無凝集顆粒,鏡下紅細胞分散。
在低倍鏡下凝集程度強弱判斷標準:
①呈一片或幾片凝塊,僅有少數單個游離紅細胞為(++++)。
②呈數個大顆粒狀凝塊,有少數單個游離紅細胞為(+++)。
③數個小凝集顆粒和一部分微細凝集顆粒,游離紅細胞約占1/2為(++)。
④肉眼可見無數細沙狀小凝集顆粒。於鏡下觀察,每凝集團中有5~8個以上紅細胞凝集為(+)。
⑤可見數個紅細胞凝集在一起,周圍有很多的游離紅細胞(±)。
⑥可見極少數紅細胞凝集,而大多數紅細胞仍呈分散分布為混合凝集外觀。
⑦鏡下未見細胞凝集,紅細胞均勻分布為(-)。
凝膠微柱法
是紅細胞抗原與相應抗體在凝膠微柱介質中發生凝集反應的免疫學方法。血型抗體為單克隆抗體,加入試劑、標本,用專用離心機離心後可直接用肉眼觀察結果或用血型儀分析。此法操作標準化,定量加樣,確保結果準確性。
抗A、抗B和抗AB標準血清標準
準血清均采自健康人,並應符合下述條件:①特異性:只能與相應的紅細胞抗原發生凝集,無非特異性凝集。②效價:我國標準抗A和抗B血清效價均在1:128以上。③親和力:我國標準要求抗A對A1、A2及A2B發生反應開始出現凝集的時間分別是15s、30s和45s;抗B對B型紅細胞開始出現凝集的時間為15s。凝集強度為3min時,凝塊不小於1mm2。④冷凝集素效價:在1:4以下。⑤無菌。⑥滅活補體。

注意事項

1、所用器材必須乾燥清潔、防止溶血,凝集和溶血的意義一樣。為避免交叉污染,建議使用一次性器材。標準血清從冰櫃取出後,應待其平衡至室溫後再用,用畢後應儘快放回冰櫃保存。
2、加試劑順序:一般先加血清,然後再加紅細胞懸液,以便核實是否漏加血清。
3、雖然IgM抗A和抗B與相應紅細胞的反應溫度以4℃最強,但為了防止冷凝集現象干擾,一般在室溫20℃~24℃內進行試驗,而37℃條件,可使反應減弱。
4、幼兒紅細胞抗原未發育完全、老年體弱者抗原性較弱,最好採用試管法鑑定血型。
5、玻片法反應時間不能少於10min,否則較弱凝集不能出現,造成假陰性。
6、正、反定型結果一致才可發報告。
7、反定型法:先天性免疫球蛋白缺陷,長期大量套用免疫抑制,血型抗體可減弱或消失;血清中存在自身免疫性抗體、冷凝集素效價增高、多發性骨髓瘤、免疫球蛋白異常均可造成反定型困難;新生兒體內可存在母親輸送的血型抗體,且自身血型抗體效價又低,因而出生6個月以內的嬰兒不宜做反定型。老年人血清中抗體水平大幅度下降或被檢者血清中缺乏抗A及(或)抗B抗體,可引起假陰性或血型鑑定錯誤。

ABO血型系統

英文:ABO blood group system 根據紅細胞表面有無特異性抗原(凝集原)A和B來劃分的血液類型系統。ABO血型系統是1900年奧地利蘭茨泰納發現和確定的人類第一個血型系統。根據凝集原A、B的分布把血液分為A、B、AB、0四型。紅細胞上只有凝集原A的為A型血,其血清中有抗B凝集素;紅細胞上只有凝集原B的為B型血,其血清中有抗A的凝集素;紅細胞上A、B兩種凝集原都有的為AB型血,其血清中無抗A、抗B凝集素;紅細胞上A、B兩種凝集原皆無者為O型,其血清中抗A、抗B凝集素皆有。具有凝集原A的紅細胞可被抗A凝集素凝集;抗B凝集素可使含凝集原B的紅細胞發生凝集。輸血時若血型不合會使輸入的紅細胞發生凝集,引起血管阻塞和血管內大量溶血,造成嚴重後果。所以在輸血前必須作血型鑑定。正常情況下只有ABO血型相同者可以相互輸血。在缺乏同型血源的緊急情況下,因O型紅細胞無凝集原,不會被凝集,可輸給任何其他血型的人。AB型的人,血清中無凝集素,可接受任何型的紅細胞。但是異型輸血輸入量大時,輸入血中的凝集素未能被高度稀釋,有可能使受血者的紅細胞凝集。所以大量輸血時仍應採用同型血。臨床上在輸血前除鑑定ABO血型外,還根據凝集反應原理,將供血者和受血者的血液作交叉配血實驗,在體外確證兩者血液相混不發生凝集,方可進行輸血以確保全全。近年來發現存在於紅細胞上的凝集原(即血型抗原)也存在於其他血細胞和一般組織細胞。所有細胞表面血型抗原的特異性可作為機體免疫系統鑑別自身和異物的標誌。因此,在臨床實踐中血型鑑定也是組織器官移植成敗的關鍵。人類血型有遺傳特性,決定血型的血型抗原即凝集原ABOA和B及其前身物H,分別受ABO三個等位基因控制。A、B基因為顯性基因,O(H)基因為隱性基因。它們的遺傳規律所顯示的父、母血型與子代血型間的關係,在法醫學上可作為否定親子關係的依據,若再配合其他血型系統的測定,則可判斷親子關係。
血型不僅在輸血上有重要意義,而且在人種學、遺傳學、法醫學、移植免疫、疾病抵抗力(或易感性)等方面都有套用價值,在輸血前,一定要檢查病人(受血者)和輸血人(供血者)的血型,並且要進行交叉配血試驗。在臨床醫學中,除輸血、移植免疫外,對新生兒溶血病、自身免疫性溶血性貧血特異性抗體的檢查,也都需要血型知識和有關技術。ABO血型抗原具有種族差異。例如,中歐地區的人群中,約40%以上的人為A型,近40%的人為O型,10%的人為B型,6%的人為AB型;而90%的美洲土著人為O型。

舉例分析

通常只用兩種抗血清即抗A及抗B血清,就可將群體分為四種血型。
根據血型的遺傳規律,和臨床工作方例起見,配偶間所生子女的血型如下:
各種ABO配偶所生子女的血型:
父母血型
子女可能有血型及比例
子女不可能有血型
O、O
O
A、B、AB
O、A
O、A (1:3)
B、AB
O、B
O、B (1:3)
A、AB
O、AB
A、B (1:1)
O、AB
A、A
O、A (1:15)
B、AB
A、B
A、B、AB、O (3:3:9:1)
A、AB
A、B、AB (4:1:3)
O
B、B
O、B(1:15)
A、AB
B、AB
A、B、AB(1:4:3)
O
AB、AB
A、B、AB(1:1:2)
O

鑑定原理

常用鹽水凝集法檢測紅細胞上存在的血型抗原,以及血清中存在的血型抗體,依據抗原抗體存在的情況判定血型。常規的方法有:①正向定型:用已知抗體的標準血清檢查紅細胞上未知的抗原。②反向定型:用已知血型的標準紅細胞檢查血清中未知的抗體。結果判定:凡紅細胞出現凝集者為陽性,呈散在游離狀態為陰性。ABO血型定型原則見表1-5-2。

鑑定方法

(1)生理鹽水凝集法:①玻片法:操作簡單,適於大量標本檢查,但反應時間長;被檢查者如血清抗體效價低,則不易引起紅細胞凝集,因此,不適於反向定型。②試管法:由於離心作用可加速凝集反應,故反應時間短,而且,藉助於離心力可以使紅細胞接觸緊密,促進凝集作用,適於急診檢查。
紅細胞亞型抗原性弱,如抗A抗B標準血清效價低時,易造成漏檢或誤定。如加用O型(抗A、B)血清和反向定型,可避免此類錯誤。
玻片法凝集結果判斷:紅細胞呈均勻分布,無凝集顆粒,鏡下紅細胞分散。在低倍鏡下凝集程度強弱判斷標準:①呈一片或幾片凝塊,僅有少數單個游離紅細胞為(++++)。②呈數個大顆粒狀凝塊,有少數單個游離紅細胞為(+++)。③數個小凝集顆粒和一部分微細凝集顆粒,游離紅細胞約占1/2為(++)。④肉眼可見無數細沙狀小凝集顆粒。於鏡下觀察,每凝集團中有5~8個以上紅細胞凝集為(+)。⑤可見數個紅細胞凝集在一起,周圍有很多的游離紅細胞(±)。⑥可見極少數紅細胞凝集,而大多數紅細胞仍呈分散分布為混合凝集外觀。⑦鏡下未見細胞凝集,紅細胞均勻分布為(-)。
(2)凝膠微柱法:是紅細胞抗原與相應抗體在凝膠微柱介質中發生凝集反應的免疫學方法。血型抗體為單克隆抗體,加入試劑、標本,用專用離心機離心後可直接用肉眼觀察結果或用血型儀分析。此法操作標準化,定量加樣,確保結果準確性。
抗A、抗B和抗AB標準血清標準
準血清均采自健康人,並應符合下述條件:①特異性:只能與相應的紅細胞抗原發生凝集,無非特異性凝集。②效價:我國標準抗A和抗B血清效價均在1:128以上。③親和力:我國標準要求抗A對A1、A2及A2B發生反應開始出現凝集的時間分別是15s、30s和45s;抗B對B型紅細胞開始出現凝集的時間為15s。凝集強度為3min時,凝塊不小於1mm2。④冷凝集素效價:在1:4以下。⑤無菌。⑥滅活補體。

注意事項

一般注意事項:①所用器材必須乾燥清潔、防止溶血,凝集和溶血的意義一樣。為避免交叉污染,建議使用一次性器材。標準血清從冰櫃取出後,應待其平衡至室溫後再用,用畢後應儘快放回冰櫃保存。②加試劑順序:一般先加血清,然後再加紅細胞懸液,以便核實是否漏加血清。③雖然IgM抗A和抗B與相應紅細胞的反應溫度以4℃最強,但為了防止冷凝集現象干擾,一般在室溫20℃~24℃內進行試驗,而37℃條件,可使反應減弱。④幼兒紅細胞抗原未發育完全、老年體弱者抗原性較弱,最好採用試管法鑑定血型。⑤玻片法反應時間不能少於10min,否則凝集不能出現,造成假陰性。⑥正、反定型結果一致才可發報告。⑦反定型法:先天性免疫球蛋白缺陷,長期大量套用免疫抑制,血型抗體可減弱或消失;血清中存在自身免疫性抗體、冷凝集素效價增高、多發性骨髓瘤、免疫球蛋白異常均可造成反定型困難;新生兒體內可存在母親輸送的血型抗體,且自身血型抗體效價又低,因而出生6個月以內的嬰兒不宜做反定型。老年人血清中抗體水平大幅度下降或被檢者血清中缺乏抗A及(或)抗B抗體,可引起假陰性或血型鑑定錯誤。

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