NN69培養基（Nitsch & Nitsch Medium）是由Nitsch和Nitsch於1969年研發的植物組織培養基，專用於梨樹等植物的離體培養。其基礎配方包含無機鹽、維生素、肌醇及蔗糖等成分，配製時需調節pH至5.75±0.5，滅菌後添加熱敏型添加劑，並採用22°C±2°C的溫度與16小時光照周期進行培養。
該培養基以乾粉形式實現商業化套用，如山東拓普生物工程有限公司生產的500g/瓶規格產品，需額外添加碳源、凝膠及植物激素後使用。後續衍生出含維生素和不含維生素的基鹽版本，工作濃度分別為2178.735mg/L與2070.185mg/L，存儲條件為2-8℃，且不宜製備高濃度母液以避免沉澱。除梨樹培養外，其還被用於菸草花粉粒離體培養，通過誘導單核花粉形成胚狀體以培育單倍體植株。
基本介紹
- 中文名：NN69培養基
- 外文名：Nitsch & Nitsch Medium（1969）；Nitsch Medium
- 別名：NN培養基；Nitsch培養基
- 產品外觀：粉末+溶液
- 顏色與澄清度：無色至淡黃色透明溶液
- 保存條件：避光，2-8℃保存
- 注意事項：避免呼入和皮膚接觸
配方,配製方法, 質量控制,
配方
成分 | mg/L |
宏量元素 | |
硝酸鉀 | 950.00 |
硝酸銨 | 720.00 |
硫酸鎂 | 90.34 |
磷酸二氫鉀 | 68.00 |
微量元素 | |
硫酸錳水合物 | 18.94 |
硼酸 | 10.00 |
鉬酸鈉，二水 | 0.25 |
硫酸鋅，七水 | 10.00 |
硫酸銅，五水 | 0.025 |
硫酸亞鐵，七水 | 27.85 |
EDTA二鈉，二水 | 37.25 |
維生素 | |
肌肉肌醇 | 10.00 |
鹽酸硫胺素 | 0.50 |
鹽酸吡哆辛 | 0.50 |
煙酸 | 5.00 |
葉酸 | 0.50 |
生物素 | 0.05 |
甘氨酸 | 2.00 |
其它 | |
蔗糖 | 20000 |
瓊脂 | 8000 |
PH | 5.75±0.5 |
配製方法
用600ml滅菌後的蒸餾水溶解脫水培養基，用少量蒸餾水沖洗殘餘培養基粉末。
輕輕攪動使培養基完全溶解。
加入所有熱穩定添加劑。
用1N HCl/NaOH調節pH 5.75±0.5。
加入瓊脂。定容至1000ml。
加熱使瓊脂完全溶解。
121°C滅菌15 min。
冷卻至45°C後，加入過濾除菌的熱敏型添加劑。
分裝到無菌容器中。
注意：為避免有沉澱生成，不要使用自來水或低等級的水。
質量控制
培養條件
培養周期：5周
相對濕度：60% ± 2%
溫度：22°C ± 2°C
光照周期(D:N): 16h:8h
