在酸性環境下孵育紅細胞以診斷陣發性夜間血紅蛋白尿的試驗，但陽性反應亦可見於其它形式的貧血
基本介紹
- 中文名：酸溶血試驗
- 外文名：Ham test
- 正常參考值：陰性
- 不足：較易發生測試結果錯誤
- 臨床意義：見於陣發性睡眠性血紅蛋白尿症等
原理,步驟,試劑與儀器,操作方法,正常參考值,臨床意義,注意事項,
原理
陣發性睡眠性血紅蛋白尿症(陣發性睡眠性血紅蛋白尿)患者， 因其部分紅細胞對補體敏感而易於溶解， 從而發生溶血現象。在實驗室中， 可將紅細胞置於酸化(pH 6.4～6.5)血清中的補體下， 正常人紅細胞不溶解， 而陣發性睡眠性血紅蛋白尿的部分患者中可見其紅細胞溶解。若所用血清系患者本身的血清， 紅細胞溶解更為顯著。一般採用ABO型或與患者同型血清進行實驗。但如將血清加熱(56℃， 30分鐘)後， 則其中補體破壞， 誘導溶血作用亦隨之失活。
步驟
試劑與儀器
0.2 mol/L鹽酸、 0.154 mol/L氯化鈉溶液、 水浴箱、 離心機、 試管與玻璃珠。
操作方法
(1)取患者血5 mL置入離心管內， 放入玻璃珠搖動以脫去纖維蛋白。加入3倍0.9%氯化鈉溶液洗滌， 再離心5分鐘棄去上清液。再重複洗滌2次， 最後1次離心10分鐘， 棄去上清液後， 用0.9%氯化鈉溶液配製成50%紅細胞懸液。
(2)取正常同型或AB型血6 mL， 置於8 mL試管中， 待分離血清作為正常血清， 並取 1/3 置56℃ 水浴中30分鐘作為正常滅活血清。
(3)編制1、 2、 3、 4號試管。
1號試管： 正常同型或AB型血清0.5 mL、 0.2 mol/L鹽酸0.05 mL、 50%患者紅細胞懸液0.05 mL。
2號試管： 正常同型或AB型血清0.5 mL、 50%患者紅細胞懸液0.05 mL、
3號試管： 正常同型或AB型血清滅活0.5 mL、 0.2 mol/L鹽酸0.05 mL、 50%患者紅細胞懸液0.05 mL。
4號試管： 50%患者紅細胞懸液0.05 mL、 0.9%氯化鈉溶液0.5 mL。
(4)將各管混勻， 於37℃ 水浴中溫育1小時後， 離心觀察結果。
(5)一般第1管有明顯溶血， 第2管有輕度溶血或不溶血， 而第3管、 第4管均無溶血， 表示Hams試驗陽性。
正常參考值
陰性
臨床意義
酸化溶血試驗(Hams試驗)陽性主見於陣發性睡眠性血紅蛋白尿綜合徵， 本試驗假陽性與假陰性少見， 假陽性偶見於CDAⅡ型或HEMPAS中， 此時如改用患者酸化血清進行試驗， 則結果轉陰， 而陣發性睡眠性血紅蛋白尿綜合徵者仍為陽性。
注意事項
一、本試驗對陣發性睡眠性血紅蛋白尿的診斷是特異的，但試驗的敏感性取決於補體敏感細胞的多少，故本試驗敏感性不夠，可能出現假陽性。
二、試驗所用血清不夠新鮮時，由於補體成分含量不足可能出現假陰性。
三、多次輸血的患者，不正常細胞相對減少，可出現陰性。
