HAT選擇法

HAT選擇法即胸苷激酶基因選擇法，胸苷激酶（Thymidine Kinase，簡稱TK）能催化胸苷（T）轉變成dTMP，進而生成dTTP。

基本介紹

• 中文名：HAT選擇法
• 含義：胸苷激酶基因選擇法
• 作用：催化胸苷（T）轉變成dTMP
• 原料：培養基中含有H,A和T

HAT選擇法即胸苷激酶基因選擇法，胸苷激酶（Thymidine Kinase，簡稱TK）能催化胸苷（T）轉變成dTMP，進而生成dTTP。TK選擇系統將含有tk+基因的表達載體導入tk-宿主細胞，再用含有次黃嘌呤（H），氨基喋呤（A）和胸苷（T）的培養基培養細胞，其中A為葉酸類似物，可阻斷dATP,dGTP的合成，及dUMP到dTTP的轉化，但H可合成IMP，再由IMP合成dATP和dGTP，含有載體的tk+細胞能利用T合成dTTP，故可合成DNA使細胞存活，不含載體的tk-細胞不能利用T合成dTTP，無法合成DNA使細胞死亡。該系統中的tk+基因能報告載體的導入，稱報告基因，培養基中含有H,A和T,故將這種選擇方法稱做HAT選擇法。