基本介紹
- 中文名：雙鏈特異性核酸酶
- 外文名：duplex-specific nuclease
- 縮寫：DSN
- 用途：構建均一化cDNA
- 優點：需要材料較少, 有好的套用前景
DSN是一種熱穩定核酸酶的縮寫 。該酶能夠選擇性降解雙鏈 DNA 和 DNA-RNA 雜交體中的 DNA,但對單鏈核酸分子幾乎沒有作用，可以用於構建均一化cDNA。 Zhulidov et al首次把將 DSN 用於全長 cDNA 的均一化文庫構建, 並成功地構建了美國加州海兔(Aplysiacalifornica)神經組織的均一化全長 cDNA 文庫。
DSN 均一化法也是基於 DNA 復性動力學原理，通過控制 DNA 變性和復性（雜交）條件，利用特異降解雙鏈 DNA 的酶 DSN，降解雜交過程中形成的雙鏈 DNA。高豐度的基因形成雙鏈的速度較快，所以降解也比較多， 從而達到均一化的目的。 DSN 法簡便，耗時短。利用本方法能夠達到的均一化程度為：高豐度基因的豐度降低1～2 個數量級， 中豐度的降低幾倍或保持不變，低豐度的豐度增長不超過 3 倍。由於基於 DNA 復性動力學原理，不同組織來源的同源基因也可能被 DSN 酶降解，造成此類基因大幅度減少，這是基於DNA 復性動力學原理的均一化法不能克服的問題。 同其他常用的均一化技術相比,基於 DSN 的均一化技術操作步驟簡單, 所需要的起始材料也比較少, 具有較好的套用前景。
