《DNA Cloning》是2002年出版的圖書,作者是Glover, Hames、Glover, D. M、Glover, David M。
基本介紹
- 外文名:DNA Cloning
- 作者:Glover, Hames、Glover, D. M、Glover, David M
- 出版時間:2002年3月
- ISBN:9780199634804

《DNA Cloning》是2002年出版的圖書,作者是Glover, Hames、Glover, D. M、Glover, David M。
(DNA克隆化) DNA cloning 如果以特定的基因為對象時,則稱為基因純系化(基因克隆化gene cloning)。大腸菌K12株及其質粒或噬菌體的EK系是其代表性的系統。在從各種生物所具有的巨大數目的基因中選出特定的基因DNA,一般多用下述方法:詳細介紹 把從某種生物中提取的全部DNA,通過限制性內切酶等使之成為片斷,...
分子克隆是指分離一個已知DNA序列,並以in vivo(活體內)方式獲得許多複製品的過程。這一複製過程經常被用於增加並獲取DNA片段中的基因,但也可用來增加某些任意的DNA序列,如啟動子、非編碼序列、化學合成的寡核苷酸或是隨機的DNA片斷。將DNA片段(或基因)與載體DNA分子共價連線,然後引入寄主細胞,再篩選獲得重組的...
基因工程的上游工程主要是目的基因的製取和無性繁殖。具體地說是從生物體的組織、器官或細胞製取目的基因或者人工合成目的基因,將目的基因與載體的DNA拼接,使重組體分子導入受體細胞,篩選和進行無性繁殖。這個過程可以稱為基因克隆(gene cloning)。基因克隆是70年代發展起來地一項具有革命性地研究技術,可概括為∶分、...
分子克隆技術是通過體外重組將目的基因與克隆載體結合,經宿主細胞擴增後篩選純化DNA片段的核心生物技術。其技術要素包括限制性內切酶切割、DNA連線酶重組等關鍵酶反應系統,以及質粒、噬菌體等載體的套用。該技術最終目標為獲得大量特定DNA序列,服務於轉基因植物製備等基因操作領域。技術原理 分子克隆技術的理論基礎包括基因...
《DNA Cloning》是2002年出版的圖書,作者是Glover, Hames、Glover, D. M、Glover, David M。內容簡介 DNA cloning techniques have made their impact to most areas of biological research. This is the fourth and last volume in this set, offering a complete update and extension into new areas of ...
基因克隆載體是一種能夠承載外源基因並將其導入受體細胞實現穩定遺傳的DNA分子。在基因工程中,單獨的目的基因片段難以自主進入受體細胞並穩定表達,克隆載體可通過攜帶外源基因突破這一限制,其性能直接影響基因轉移與表達的效率。作為功能性載體需具備四個基本條件:含有允許外源基因插入的多克隆位點結構;能在受體細胞中...
克隆是指生物體通過體細胞進行的無性繁殖,以及由無性繁殖形成的基因型完全相同的後代個體組成的種群。通常是利用生物技術由無性生殖產生與原個體有完全相同基因的個體或種群。柯斯質粒載體單克隆位點 柯斯質粒載體(cosmid vector)又叫黏粒載體,這是一種由人工構建的含有DNA的COS序列和質粒複製子的特殊類型的質粒載體...
分子克隆法又稱無性繁殖,克隆繁殖,分子擴增。通常是指用人工方法把所需要的某一供體生物的遺傳物質。名稱:分子克隆法;無性繁殖;克隆繁殖;分子擴增;molecular cloning 又稱無性繁殖,克隆繁殖,分子擴增。通常是指用人工方法把所需要的某一供體生物的遺傳物質,即DNa大分子提取出來,在離體條件下進行切割後,取其...
同源序列克隆法(Homologous Recombination Cloning)是一種基於DNA同源重組原理的基因克隆技術,主要用於快速分離抗病基因。該方法依據抗病基因編碼蛋白中共有的保守結構域(如LRR、NBS、STK等),設計簡併引物進行PCR擴增,獲得抗病基因同源序列(RGAs),進而篩選候選基因。1990年代,研究者提出利用同源序列法替代傳統圖位...
通過相關酶試劑處理,同時除去載體與目的DNA上同源片段的雙鏈中的一條鏈,這樣載體和目的DNA兩端就露出了能夠互補配對的序列,依靠同源序列鹼基間的配對能使載體和目的DNA較為緊密的連在一起而無需酶聯,直接用於轉化。技術特點 傳統的PCR產物克隆方法主要有兩種:一種是PCR引物設計時引入載體上的酶切位點,PCR產物經雙酶切後定向克
DNA嵌合體 基因工程中內外源DNA插入載體分子所形成的雜合分子又稱為嵌合DNA或DNA嵌合體(DNA chimera).構建這類重組體分子後的過程,即對重組分子的無性繁殖過程,又稱為分子克隆(molecular cloning)
相較於ORF克隆,cDNA克隆需額外處理UTR區以實現有效表達,但在文庫構建和亞克隆研究中具有獨特價值。其技術流程包含隨機克隆與定向克隆兩種策略,並可通過適配體引入限制性酶切位點提升效率。技術原理 cDNA克隆基於逆轉錄酶將mRNA轉化為單鏈cDNA,再通過DNA聚合酶合成雙鏈結構。該過程保留原始mRNA的序列信息,包括5'端...
在用覆蓋目的基因區域的大片段基因組DNA克隆篩選區域特異的cDNA後,仍需對目的基因編碼的cDNA作進一步證實。現有證實目的基因編碼的cDNA克隆的方法有:(1) 精細作圖來證實某候選基因克隆與目標性狀共分離; (2) 證實某候選基因克隆的時空表達模式與目標性狀的表現相同;(3) 把候選基因序列與現有已知功能基因序列資料庫...
about living things. Borin Van Loon's humorous illustrations recount the contributions of Gregor Mendel, Frederick Griffith, James Watson, and Francis Crick, among other biologists, scientists, and researchers, and vividly depict the modern controversies surrounding the Human Genome Project and cloning.
卷一:基礎技術與載體構建卷一涵蓋分子克隆核心技術,包括:質粒載體的設計與套用 噬菌體λ載體系統的構建與最佳化 DNA體外誘變及PCR擴增策略 卷二:高級實驗方案卷二聚焦複雜技術體系,提供:蛋白質表達與純化方案 核酸雜交與定量分析方法 核小體定位及染色質結構研究技術 卷三:附錄與數據支持卷三收錄實用參數表與實驗...
重組DNA分子需在受體細胞中複製擴增,故還可將基因工程表征為分子克隆(Molecular Cloning)或基因克隆(Gene Cloning)。廣義上包括傳統遺傳操作中的雜交技術、現代遺傳操作中的基因工程和細胞工程。是指DNA重組技術的產業化設計與套用,包括上游技術和下游技術兩大組成部分。上游技術:基因重組、克隆和表達的設計與構建(...
將此重組質粒標記後作探針進一步鑑定,亦可經DNA序列分析鑑定其基因來源和功能。因此要得到一種特異性DNA探針,常常是比較繁瑣的。探針DNA克隆的篩選也可採用血清學方法,所不同的是所建DNA文庫為可表達性,克隆菌落或噬斑經裂解後釋放出表達抗原,然後用來源細菌的多克隆抗血清篩選陽性克隆,所得到多個陽性克隆再經...
歐洲各公司也不甘落後,紛紛投入競爭,例如GeneticCo.UK研製出QBot點樣器,Q-Pix克隆挑揀儀及Q-Fill制晶片設備。Sequenom則推出250位點的Spectrochip並採用質譜法測讀結果,而德國腫瘤研究所則用就位合成的肽核酸低密度(8cm×12cm片上1000個點)的作表達譜及診斷用的探針晶片。如今,DNA晶片已經在基因序列分析、...
亦可使用HuynhV.T.等人(DNA Cloning Techniques:APractical Approach,IRL Press,Oxford,1984)的λgt10載體,從這些組織的mRNA得到cDNA文庫,並利用所得到的雜交克隆回收編碼aFGF的完整序列。一般說來,為了提高基因的表達效率和產物的產率,應適當地選擇更適合於特定編碼序列的啟動子、宿主和載體的最佳組合。在使用...
分子選殖 分子選殖(英語:Molecular cloning,又譯分子克隆或分子群殖)是指分離一個已知DNA序列,並以in vivo(活體內)方式獲得許多複製品的過程。這一複製過程經常被用於增加並獲取DNA片段中的基因,但也可用來增加某些任意的DNA序列,如啟動子、非編碼序列、化學合成的寡核苷酸或是隨機的DNA片斷。
該方法適用於目標基因與可得最近的molecular marker距離較遠時,目標基因的原位克隆(positional cloning)。建立跳躍文庫歷經二次限制性內切酶切割與載體重組。由此獲得的DNA文庫即跳躍基因組文庫。因為此時的第一次重組而且位於中間的質粒兩側的基因組原本在染色體中實際上不僅不相臨,而且至少有百萬鹼基距離的間隔。染色體...
CHAPTER 7 Gene Expression:The Flow of Genetic Information from DNA via RNA to Protein PART Ⅲ Using Genetic Engineering to Unravel the Information in Genomes CHAPTER 8 DNA a High Resolution:Use of DNA Cloning,PCR,and Hybridization as the Tools of Genetic Analysis CHAPTER 9 The Direct Detection ...
非基因序列:基因序列以外的DNA序列。編碼序列和非編碼序 編碼序列:編碼RNA和蛋白質的DNA序列。非編碼序:內含子和基因的間隔序列。單一序列和重複序列 單一序列:基因組中只有一份的DNA序列。重複序列:基因組中重複出現的序列。例如,STR,SNP,微衛星DNA等。尋找思路 功能克隆:克隆(致病)基因的一種策略。收集...
農桿菌是指生活在植物根表面依靠由根組織滲透出來的營養物質生存的一類普遍存在於土壤中的革蘭氏陰性細菌。農桿菌主要有兩種:根癌農桿菌和髮根農桿菌。根癌農桿菌能在自然條件下趨化性地感染140多種雙子葉植物或裸子植物的受傷部位,並誘導產生冠癭瘤。引發冠癭瘤的原因是,Ti質粒上的T-DNA上有8個左右的基因在植物...
15. Wang JY, Fang J, Guo JQ, Teng QY, Huang ZY, Gu JY, Shen HG, Zhou JY*. 2007. Molecular Cloning and Characterization of Duck CD25. Veterinary Immunology and Immunopathology. 117: 266-274 16. Hu JQ, Li YF, Guo JQ, Shen HG, Zhang DY, Zhou JY*. 2007. Production and ...
目的基因的克隆 當產生許多拷貝的目的基因後,可以通過酶切反應(或gataway系統),將目的基因酶促連線到構建載體中,然後將整個構建在細菌中表達,從報告基因選取陽性轉化體,通常涉及含有插入DNA的菌落中的一些顏色變化。挑取陽性菌落,做液體培養,提取質粒DNA,進行酶切,切膠純合。獲得的DNA可用於後續的轉化。目的...
本科生《Gene cloning and DNA analysis》、《基因工程實驗》;碩士生《生物化學與分子生物學專業英語》;博士生《生物化學與分子生物學專題討論》;招收生物學博士後。研究方向 1.植物重要功能基因的克隆、鑑定與利用:以重要農作物小麥、玉米、棉花、菸草以及模式植物擬南芥為研究材料,克隆與作物發育、抗逆性等密切相關...
作為DNA和RNA的組成成分,其化學名稱為6 氨基 2 羥基嘧啶,在基因表達調控中通過甲基化發揮表觀遺傳學作用。在食品科學領域中,該物質被套用於食品添加劑檢測及污染物限量的測定標準中。其衍生物包括5 甲基胞嘧啶、硫代胞嘧啶等,常見於分子克隆及聚合酶鏈式反應等技術場景。化學特性 白色結晶粉末,具有吡啶環結構特徵...
韓天富提出的“泛光周期假說”,突破傳統“光照階段”學說局限,為光周期敏感作物育種和栽培拓寬了思路;創建的“光周期-溫度”雙控模型,為大豆光溫適應性綜合改良奠定了重要理論基礎;合作克隆的J、MS1等關鍵基因,具有重要理論意義和實用價值。同時,他首創了“蹺蹺板”和“布達拉”育種模型,探索出分子育種和常規育種...
