CHU-N6培養基是植物細胞、組織及器官離體培養的常用培養基，以硝酸鉀為主要氮源、甘氨酸為胺基酸補充成分，適用於莖段培養、愈傷組織誘導等實驗場景。其配方不含蔗糖與瓊脂，需在使用前另行添加，並通過高溫滅菌後冷卻至45°C時加入熱敏型添加劑以維持活性。
該培養基配製流程標準化，包含溶解脫水培養基、調節pH值、滅菌分裝等步驟，保存條件要求避光低溫（2-8℃）。培養環境需控制相對濕度60%±2%、溫度22°C±2°C，並設定16小時光照與8小時黑暗交替的光周期，標準培養周期為5周。其成分比例明確，如硝酸鉀含量達2830mg/L，硫酸銨463mg/L，通過最佳化氮源組合與營養供給支持植物離體組織的穩定生長。
基本介紹
- 中文名：CHU-N6培養基
- 外文名：CHU (N6) Medium
- 別名：N6培養基；CHU (N6)培養基
- 顏色與澄清度：無色至淺黃色透明溶液
- 保存條件：避光，2-8℃保存
- 注意事項：避免呼入和皮膚接觸
配方,配製方法, 實驗方法,
配方
硝酸鉀 | 2800 |
硫酸銨 | 463 |
磷酸二氫鉀 | 400 |
硫酸鎂(MgSO4·7H2O) | 185 |
氯化鈣(CaCl2·2H2O) | 165 |
乙二胺四乙酸二鈉 | 37.3 |
硫酸亞鐵(FeSO4·7H2O) | 27.8 |
硫酸錳(MnSO4·H2O) | 4.4 |
硫酸鋅(ZnSO4·7H2O) | 1.5 |
硼酸 | 1.6 |
碘化鉀 | 0.8 |
維生素B1(鹽酸硫胺素) | 1.0 |
維生素B6(鹽酸吡哆醇) | 0.5 |
煙酸 | 0.5 |
甘氨酸 | 2.0 |
蔗糖 | 20000 |
pH值5.8 | 25℃ |
配製方法
用600ml蒸餾水溶解3.97g脫水培養基，用少量蒸餾水沖洗殘餘培養基粉末。
輕輕攪動使培養基完全溶解。
加入所有熱穩定添加劑。
用1N HCl/NaOH調節pH。定容至1000ml。
121ºC滅菌15 min。
冷卻至 45ºC後，加入過濾除菌的熱敏型添加劑。
分裝到無菌容器中。
實驗方法
培養條件
培養周期：5周
相對濕度：60% ± 2%
溫度：22°C ± 2°C
光照周期(D:N): 16h:8h
細胞系 | 培養物類型 | 結果 |
Musa種 | 莖段培養 | 無形態畸形 無壞死組織 主動生長芽 對芽無毒 |
胡蘿蔔種 | 愈傷組織培養 | 無壞死組織 活躍生長的愈傷組織 愈傷組織無毒性 |
