酶聯螢光原位雜交

酶聯螢光原位雜交(catalyzed reporter deposition fluorescent in situ hybridization，CARD-FISH，直譯為催化報告沉積螢光原位雜交)，是螢光原位雜交(FISH)的一種變形，可以更有效地增加信號強度，避免背景干擾。

基本介紹

• 中文名：酶聯螢光原位雜交
• 外文名：catalyzed reporter deposition fluorescent in situ hybridization
• 屬性：螢光原位雜交的一種變形
• 可以更有效地：增加信號強度

在通常的FISH中，核酸探針被螢光分子直接標記；而在CARD-FISH中，探針與辣根過氧化物酶(horse reddish peroxidase, HRP)相連。完成雜交後，洗去游離的探針，加入和螢光標記的tyramide和過氧化氫，將螢光連線在有探針結合的細胞的蛋白質上。這樣，一個探針可以將很多螢光分子沉積在細胞內，起到放大信號的作用，因此比普通的FISH更為敏感。

但由於辣根過氧化物酶比普通螢光分子要大得多，無法通過細胞膜，因此實驗中必須對細胞做通透性處理。這樣對於具有不同外圍結構的細胞，通透性會相差很大並影響信號強弱。