酶標板

酶標板

酶標板(ELISA PLATE)在酶聯免疫吸附試驗(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)中,參與免疫學反應的抗原、抗體、標記抗體或抗原的純度、濃度和比例;緩衝液種類、濃度和離子強度、pH值和反應溫度、時間等條件起著關鍵作用。

基本介紹

  • 中文名:酶標板
  • 外文名:ELISA PLATE
  • 分類:16孔,48孔和96孔
  • 常用:96孔
  • 領域:工程技術
簡介,分類,高結合力酶標板,中結合力酶標板,氨基化酶標板,酶標板的蛋白質吸附性測定,

簡介

作為載體的固相聚苯乙烯(Polystyrene)表面對抗原、抗體或抗原抗體複合物的吸附也起著重要作用。
抗原、抗體和其它生物分子通過多種機制吸附至載體表面,這包括通過疏水鍵、流水/離子鍵的被動吸附,通過引入其它活性基團如氨基和碳基的共價結合,以及通過表面改性後的親水鍵結合。

分類

類型主要根據酶標儀進行選擇。又分可拆和不可拆的,對於不可拆的,就是一整塊板上的板條都是連在一起的,那么可拆的就是板子上面的板條是分開的,分出來的板條又有12孔和8孔之分。一般用的較多的是可拆的酶標板,如果你之前買了一些這樣的板子,那么完全可以只買些酶標板條就可以了。不同的廠家做出來的酶標板雖然整體看上去是差不多的,但是有些小的細節方面會做的不一樣,比如結構等,這主要是因為要配合不同酶標儀使用,因此,當你在選擇購買酶標板時還要考慮一下你的酶標儀是什麼樣子。不過一般都是適配的,只有個別的會有所不同。 因為酶標板的材質一般為聚苯乙烯(PS),而聚苯乙烯的化學穩定性較差,可以被多種有機溶劑(如:芳烴、鹵代烴等)溶解,會被強酸強鹼腐蝕,不抗油脂,在受到紫外光照射後易變色,所以在使用過程中一定要注意這些。
酶標板

高結合力酶標板

酶標板經表面處理後蛋白結合能力大大増強,可達300-400ng 1gG/cm2,主要結合的蛋白分子量>10kD。使用該類酶標板可提高敏感性,並可相對減少包被蛋白的濃度和用量,不足之處為較易產生非特異性反應。抗原或抗體包被後,以非離子去污劑無法有效地封閉未結合蛋白的部位,需使用蛋白作為封閉劑。

中結合力酶標板

酶標板經表面疏水鍵被動與白結合,適合作為分子量20D的大分子蛋白的固相載體,其蛋白結合能力為200-300 ng 1gG/cm2。由於該類酶標板所具有的僅與大分子結合的特性,適用於作為未純化抗體或抗原的固相載體,可降低潛在的非特異性交又反應。該類板可以惰性蛋白或非離子去污劑作為封閉液。

氨基化酶標板

醇標板經表面改性處理後擁有帶正電荷的氨基,其疏水鍵由殺水鍵取代。該類晦標板適合作為小分子蛋白的固相載體。使用合適的緩衝液和pH值,其表面可通過離子鍵與帶負電荷的小分子結合。由於其表面的親水特性和可通過其它交聯劑共價結合的能力,可用於固定溶於 Triton-100、 Tween20等去污劑的蛋白分子。該類板的缺陷為由於降低了疏水性,一部分蛋白分子無法結合;此外,其表面需有效地封閉。由於親水和共價的表面特性,使用的封閉液必須能夠與非反應性氨基基團和所選擇的交聯劑中任何功能基團發生作用。

酶標板的蛋白質吸附性測定

可以使用已知濃度的某蛋白溶液,在ELISA用的空白聚苯乙烯板上進行包被。包被結束後測定孔內溶液的蛋白濃度,包被前孔內蛋白量減去包被後的蛋白量就是吸附在酶標板上的蛋白量。這樣就可以知道酶標板的吸附性

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