將氯化鈣,RNA(或DNA)和磷酸緩衝液混合,沉澱形成包含DNA且極小的不溶的磷酸鈣顆粒。 ...
磷酸鈣-DNA 共沉澱法(calcium phosphate-DNA coprecipitation),簡稱磷酸沉澱法,能把外源基因與入噬菌體DNA 的重組子導人大腸桿菌和哺乳動物細胞。磷酸鈣沉澱法因為...
磷酸鈣沉澱因為試劑易取得、價格便宜而被廣泛用於瞬時轉染和穩定轉染的研究。它是先將DNA和CaCl2混合,然後加入到PBS中慢慢形成DNA磷酸鈣沉澱,最後把含有沉澱的混懸液...
核酸化學合成的策略之一,合成核酸鏈的每一個循環是經過高效率且化學性質活潑的核苷酸3′-亞磷酸醯胺中間體,氧化後成為穩定的五價磷酸三酯。為目前最常用的DNA自動...
如果體積翻兩番,則須使用更大的塑膠管,一般在25cm2細胞培養瓶或60mm細胞培養皿上,可將0.5ml磷酸鈣-DNA共沉澱物加入5ml培養液中,而在90mm細胞培養皿上,一般將1...
2.磷酸鈣法磷酸鈣法是磷酸鈣共沉澱轉染法,因為試劑易取得,價格便宜而被廣泛用於瞬時轉染和穩定轉染的研究,先將DNA和氯化鈣混合,然後加入到PBS中慢慢形成DNA磷酸鈣...
▪ 硫酸銨分級 ▪ 分級沉澱 ▪ 透析 ▪ 反向透析 ▪ 平衡透析法 ▪ 電透析 ▪ 透析袋 ▪ 透析液 ▪ 反相滲透 ▪ 過濾 ▪ 微孔過濾 ...
電轉化技術的主要優點在於:對於磷酸鈣DNA共沉澱法以及其他技術難以轉化的細胞,電穿孔法仍可適用。電轉化的效率高,既可用於克隆化基因的瞬間表達,也可用於建立整合有...
▪ 硫酸銨分級 ▪ 分級沉澱 ▪ 透析 ▪ 反向透析 ▪ 平衡透析法 ▪ 電透析 ▪ 透析袋 ▪ 透析液 ▪ 反相滲透 ▪ 過濾 ▪ 微孔過濾 ...
DEAE-dextran 與磷酸鈣共沉澱法比較有3點不同: 0 它一般用於基因的瞬時表達,不易形成穩定轉化細胞系; D 由於它對細胞有毒性作用,所以某些細胞系(如BSCI,CV-1...
5 1 1磷酸鈣共沉澱法原理69 5 1 2轉染試劑、材料69 5 1 3儀器設備70 5 1 4操作步驟70 5 1 5注意事項及影響因素72 5 2DEAE 葡聚糖法轉染73 ...
電穿孔法、顯微注射和基因槍屬於通過物理方法將基因導入細胞的範例;化學介導方法很多,如經典的磷酸鈣共沉澱法、脂質體轉染方法、和多種陽離子物質介導的技術;生物...
R——半徑,cm混合液中粒子分離、沉澱所需時間( )的計算公式為:,離心試液的底至軸心的水平距離(cm),離心試液的面至軸心的水平距離(cm)r,粒子半徑(cm)...
▪ 硫酸銨分級 ▪ 分級沉澱 ▪ 透析 ▪ 反向透析 ▪ 平衡透析法 ▪ 電透析 ▪ 透析袋 ▪ 透析液 ▪ 反相滲透 ▪ 過濾 ▪ 微孔過濾 ...
廣泛套用方法有磷酸鈣共沉澱法、電穿孔法、病毒載體,以及陽離子脂質體介導轉染法。 進行真核轉染的一般程式: 克隆目的基因(經測序驗證)-準備真核表達載體-將目的...
(2)磷酸鈣共沉澱法:將氯化鈣、DNA和磷酸鹽緩衝液混合,形成磷酸鈣微沉澱 ,附著於細胞膜並經過細胞內吞作用進入細胞質。 該方法的轉化效率通常很低。
4.3.1.2 磷酸鈣共沉澱法4.3.1.3 電穿孔法4.3.2 抗原基因在真核細胞中表達的檢測4.3.2.1 蛋白水平的檢測4.3.2.2 核酸水平的檢測5 基因疫苗製備...
實驗10 與磷酸鈣形成共沉澱的DNA轉染技術實驗11 脂質體介導的DNA轉染技術實驗12 用電穿孔法導入DNA實驗13 運用顯微注射法導入DNA4.2.5 檢測基因產物的表達...
第三十五章 磷酸鈣共沉澱質粒DNA轉染海馬神經元細胞第三十六章 傳遞基因進皮膚的基因槍技術第三十七章 最佳化體外哺乳動物細胞的電轉染第三十八章 用於小鼠胚胎內...
五、磷酸鈣共沉澱法84六、脂質體法84七、抗體轉染法85八、其他85第三節蛋白表達條件的最佳化85一、表達載體與宿主細胞85二、改變重組工程細胞特性,延長培養周期93三...