發光免疫分析儀

發光免疫分析儀

發光免疫技術是將發光反應與免疫反應相結合,以檢測抗原抗體的方法。它採用微量倍增技術,敏感度、特異性好;檢測的範圍非常廣泛,從傳統蛋白質激素到藥物均可檢測。臨床套用較多的是全自動化學發光免疫分析儀、全自動微粒子化學發光免疫分析儀和全自動電化學發光免疫分析儀。

基本介紹

  • 中文名:發光免疫分析儀
  • 外文名:Luminescent Immunoanalyzer
發光免疫分析儀的基本結構,發光免疫分析儀的工作原理,發光免疫分析儀的特點,發光免疫分析儀的維護,發光免疫分析儀的常見故障處理,擴展閱讀,

發光免疫分析儀的基本結構

1.全自動化學發光免疫分析儀的組成
1)主機部分 是儀器的運行反應測定部分,包括原材料配備、液路、機械傳動、光路檢測、電路部分。
原材料配備部分包括反應杯、樣品盤、試劑盤、純淨水、清洗液、廢水在機器上的貯存和處理裝置;液路部分包括過濾器、密封圈真空泵、管道、樣品及試劑探針等;機械傳動部分包括感測器、運輸軌道等;光路檢測部分包括光源、分光器件、光電倍增管;電路部分包括電源和放大處理系統及線路控制板。
2)微機處理系統為儀器的關鍵部分,是指揮控制中心。
其功能有程控操作、自動監測、指示判斷、數據處理、故障診斷等,並配有光碟。主機還配有預留接口,可通過外部貯存器自動處理其他數據並遙控操作,用於實驗室自動化延伸發展。
2.全自動微粒子化學發光免疫分析儀的組成
1)樣品處理系統 包括傳送艙和主探針系統,負責將標本、試劑、緩衝液加入到反應管中。
2)實驗運行系統 即流體系統,由沖洗液、廢液、底物泵及閥、真空泵、貯水罐、液體箱和探針沖洗塔組成。
3)中心供給和控制系統 由反應管支架、反應管供給艙、恆溫帶和光電讀取艙組成。負責傳送反應管,並且在傳送過程中通過恆溫帶把反應管加熱到一定溫度,當恆溫過程完成後,由光電識別裝置把光信號轉變為電信號。
4)微電腦控制系統 由列印電路板電源硬碟驅動器、軟碟驅動器、重啟動按鈕和內鎖開關組成。外周設備包括彩色監視器印表機鍵盤、外部條碼識別筆、外部條碼掃描器及連線臂。可對儀器進行相應指令操作和數據的讀取並存檔。
3. 全自動電化學發光免疫分析儀的組成
主要由樣品盤、試劑盒、溫育反應盤、電化學檢測系統及計算機控制系統組成,可分為三個單元模組。
1)控制單元就是一台完整的計算機,並配有支架及列印系統。
2)核心單元主要由條形碼閱讀器、標本艙位、標本架轉盤、模組軌道等組成。
3)分析模組是檢測系統的核心,主要包括預清洗區、測量區、系統試劑區、試劑區、耗品區。

發光免疫分析儀的工作原理

1. 全自動化學發光免疫分析儀
化學發光免疫分析技術又稱為微量倍增技術,包括兩種方法:
競爭法:多用於測定小分子抗原物質。用過量包被磁顆粒的抗體,與待測的抗原和定量的標記吖啶酯抗原同時加入反應杯溫育,使標記抗原與抗體(或待測抗原與抗體)結合形成複合物。
夾心法:多用於測定大分子的抗原物質。標記抗體與被測抗原同時與包被抗體結合,生成包被抗體-測定抗原發光抗體的複合物。儀器利用某些化學基團標記在抗原或抗體上,該化學基團被氧化後形成激發態,在返回基態的過程中釋放出一定波長的光子,光電倍增管將接受到的光能轉變為電能,以數字形式反映光量度,再計算測定物的濃度。
2. 全自動微粒子化學發光免疫分析儀
套用經典的免疫學原理,採用單克隆抗體試劑,以磁性微粒作為固相載體,鹼性磷酸酶為標物,發光劑採用3-(2'-螺旋金剛烷)-4-甲氧基-4-(3"-磷醯氧基)苯-1,2-二氧雜環丁烷(AMPPD) ,小分子物質採用競爭法或抗體捕獲法進行測定,而大分子物質採用夾心法行測定。
3. 全自動電化學發光免疫分析儀
將待測標本與包被抗體的順磁性微粒和發光劑標記的抗體混合在反應杯中共同溫育,形成性微珠包被抗體-抗原-發光劑標記抗體複合物。當磁性微粒流經電極表面時,被安裝在電極下的磁鐵吸引住,而游離的發光劑標記抗體被緩衝液沖洗走。同時在電極加電壓,使發游標記物三聯吡啶釕[ Ru( bpy)3]2+在電極表面進行電子轉移,產生電化學發光,光的強度與待測抗原的濃度成正比。抑制免疫法用於小分子量蛋白質抗原檢測;夾心免疫法用於大分子量物質檢測。

發光免疫分析儀的特點

1.全自動化學發光免疫分析儀
採用化學發光技術和磁性微粒子分離技術相結合,是一個全自動、隨機存取、軟體控制的智慧型分析系統。在反應體系中,固相載體用磁性顆粒。其直徑僅1.0um,大大增加了包被表面積,使抗原或抗體的吸附量增加,反應速度加快,清洗和分離也更加簡單。具有操作靈活,結果準確可靠,試劑貯存時間長,自動化程度高等優點。
2.全自動微粒子化學發光免疫分析儀
採用微粒子化學發光技術對人體內的微量成分以及藥物濃度進行定量測定,具有高度的特異性、敏感性和穩定性等特點。
3.全自動電化學發光免疫分析儀
電化學發光免疫分析是一種在電極表面由電化學引發的特異性化學發光反應,屬於第三代化學發光免疫分析技術。與其他免疫技術相比具有十分明顯的優點:由於所用標記物三聯吡啶釕可與蛋白質、半抗原激素、核酸等各種化合物結合,因此檢測項目很廣泛;由於磁性微珠包被採用“鏈霉親和素生物素”新型固相包被技術,使檢測的靈敏度更高,線性範圍更寬,反應時間更短。

發光免疫分析儀的維護

先進的設備需要正確的維護。日保養、周保養和定期的系統檢測是保障儀器正常運轉的前提。全自動化學發光免疫分析儀的維護包括以下幾個方面。
1.日保養:每天要保持機器外殼乾淨,以免灰塵進入儀器。做日常常規保養之前一定要檢系統溫度狀態、液路部分、耗材部分、廢液罐、緩衝液等是否全部符合要求,之後再按保養程式清洗系統進行保養操作。
2.周保養:檢查主探針上導軌,檢查完畢後用無纖維拭子清潔主探針下導軌,然後按要求在主選單下進入保養程式進行特殊清洗,清洗完畢後用乙醇拭子清潔主探針上部,然後檢查廢夜罐過濾器。檢查孵育帶上的感應點是否有灰塵,用無纖維拭子擦乾淨。每周保養後一定要做系統檢測,以確保系統檢測數據在控制範圍內。
3.月保養:每月用專用不鏽鋼小刷刷洗1次主探針、標本採樣針、試劑針的內部以除污物。由於針內部空隙小,刷洗後用注射器吸取生理鹽水反覆沖洗針內部,使污物全部沖乾淨,針外部可用酒精擦拭乾淨。

發光免疫分析儀的常見故障處理

化學發光免疫分析儀自動化程度較高,都具備自我診斷功能。一旦有故障發生時,儀器一般能自動檢測到,顯示錯誤信息並伴有報警聲。
常見故障主要有以下幾個方面。
1.壓力表指示為零:進行真空壓力測試,能聽到泵的工作聲音,但壓力表指示為零。首先檢查廢液瓶所接的真空管,測試真空壓力,判斷該故障是否因漏氣或壓力表損壞引起。檢查各管道的接口有無漏氣,檢查相關的四隻電磁閥(在真空壓力測試時,這四隻電磁閥不工作,為關閉狀態),對有問題的管道或電磁閥及時修復或者更換。
2.真空壓力不足:進行真空壓力測試,若測試結果正常,可知是因真空感測器檢測不到真空壓力引起。該機的壓力測試由兩個感測器分別檢測高、低壓力,對有問題的感測器進行調整或清洗後,再次測試真空壓力,壓力正常後調節感測器螺絲使高、低壓力指示在規定範圍內。
3.發光體錯誤:檢查發光體表面發現有液體滲出,該故障分三步檢查:檢查廢液探針、相關管路及清洗池是否有堵塞、漏液;檢查加樣電磁閥、排液電磁閥,電磁閥,有污物會引起進水或排水不暢;檢查與廢液探針管路相連線的鹼泵清洗管路是否有漏氣以及鹼泵是否有裂縫。
4.軌道錯誤:該故障因標本架在軌道中錯位而使軌道無法運行引起,因軌道很長,而且密閉不易拆,一般先檢查與軌道相接的水平升降機,如果正常,再檢查軌道,只要取出錯位的標本架,故障即可排除。

擴展閱讀

[1] 須建,彭裕紅,馬青等.臨床檢驗儀器(第2版)[M].北京:人民衛生出版社,2015
[2] 邸剛,朱根娣,蔣長順等.醫用檢驗儀器套用與維護[M].北京:人民衛生出版社,2011

相關詞條

熱門詞條

聯絡我們