基本介紹
- 中文名：瘦肉精檢測
- CAS號：37148-27-9
- 分子式：C12-H18-Cl2-N2-O
- 中文名：瘦肉精
綜述,介紹,檢測,檢驗方法,結果判讀,注意事項,
綜述
目前，能夠實現這種功能的物質是一類叫做β-興奮劑（β-agonist）的藥物，比如在中國造成中毒的克倫特羅（clenbuterol）和美國允許使用的雷托巴胺（Ractopamine）。
瘦肉精在上海曾經引發了幾百人的中毒事件。而在台灣，由於從美國進口的豬肉里含有瘦肉精，幾乎挑起一場政治爭端。奇怪的是，在美國、加拿大、紐西蘭等國，瘦肉精這類物質的使用卻是合法的。 在中國，通常所說的“瘦肉精”則是指克倫特羅。它曾經作為藥物用於治療支氣管哮喘，後由於其副作用太大而遭禁用。
其它這樣類似藥物還有沙丁胺醇（Salbutamol）和特布他林(Terbutaline)等，同樣能起到“瘦肉”作用、卻對人體健康危害過大，因而造成安全隱患。它們也因而在全球遭到禁用。
用量規定
許多化學物質被稱為瘦肉精，其中培林（Ractopamine）毒性極低、代謝快速（無累積性），因此被美國等國家允許添加入豬飼料，日本也允許使用培林的豬肉進口。目前全世界有美國等24國開放使用培林，有160多國仍禁用。
各國及各地區的瘦肉精（培林）使用量規定如下：
國家組織 | 用量規定 |
中國大陸 | 禁用 |
台灣 | 禁用 2007年8月，考慮解禁培林 2007年11月，通知將全面禁用克倫特羅 |
歐盟 | 禁用 |
美國 | 國內：培林殘量50ppb 出口至歐盟：禁用 |
日本 | 進口：培林殘量10ppb 國內：禁用 |
紐西蘭 | 進口：培林殘量10ppb 國內：禁用 |
加拿大 | 培林殘量40ppb |
聯合國糧食及農業組織 | 培林殘量10ppb 其它瘦肉精：幾乎都禁用 |
世界衛生組織 | 培林殘量40ppb 其它瘦肉精：幾乎都禁用 |
介紹
中文名：瘦肉精；克倫特羅；學名鹽酸克倫特羅；是一種平喘藥。該藥物既不是獸藥，也不是飼料添加劑，而是腎上腺類神經興奮劑。鹽酸雙氯醇胺；克喘素；氨哮素；氨必妥；氨雙氯喘通；氨雙氯醇胺。
英文名：
Clenbuterol; Spiropent; Planipart; NAB365；4-Amino-3,5-dichloro-alpha-(((1,1-dimethylethyl)amino)methyl)benzenemethanol
理化特性
白色或類白色的結晶粉末，無臭、味苦，熔點161℃，溶於水、乙醇，微溶於丙酮，不溶於乙醚。
檢測
GB/T 5009.192-2003 動物性食品中克倫特羅殘留量的測定
氣相色譜-質譜法（GC-MS）
GC-MS法優點是把色譜高效快速的分離效果和質譜高靈敏度的定性分析有機合起來，能在多種殘留物同時存在的情況下對某種特定的殘留物進行定性、定量分析，而且具更高的檢測極限。Fente C. A等用GC-MS法檢測牛毛中CLB的殘留，最低檢測限為5ng/g；Pteer Batioens套用氣相色譜－串聯質譜法(GC-MS-MS)對牛、羊、豬組織中的CLB含量進行檢測，最低檢測限為2ng/g；劉琪等用GC-MS法（EI離子源）檢測豬尿中的CLB，檢測限為0.5ng/mL；VanRhijin等用三甲基矽基或2-二甲基矽基嗎啉衍生物檢測尿提取物中的CLB，衍生物用電脈衝方式或化學離子化方式掃描，會產生更高的靈敏度。另外，GC-MS法與HPLC法相比，檢測靈敏度更高，假陽性率更低。因此，我國將GC-MS法定為檢測CLB的確證性方法（NY/T468~2001）。
高效液相色譜法（HPLC）
HPLC適合測定熱不穩定和強極性的β-激動劑及其代謝產物，而且，HPLC可以與柱前提取、純化及柱後螢光衍生化反應和質譜(MS)等系統聯用，容易實現分析過程的自動化。黃士新等(1995)套用紫外檢測器，在λ=243nm，色譜柱：shimpackCLC-ODS150×6.0mn，流速：1mL/min，柱溫：室溫30℃的條件下檢測豬肝臟和豬肉中的CLB殘留，最低檢測限可達2ng/g[4]。國外有人套用HPLC (二極體陣列檢測器)測定動物性食品中CLB殘留，測得最低檢測限為1.26ng/g，回收率達98.9%[5]。目前，我國已將HPLC法作為檢測CLB殘留的半確證性方法，最低檢測限範圍為1～15ng/g，其優點是專屬性好、選擇性強、檢測精確度較高，而且假陽性率低；缺點是樣品處理時間長，檢測過程煩瑣、難於操作，需貴重儀器，在實際套用中受到一定的限制。
酶聯免疫吸附法（ELISA ）
利用免疫學抗原抗體特異性結合和酶的高效催化作用，通過化學方法將植物辣根過氧化物酶（HRP）與克倫特羅（CL）結合，形成酶偶聯克倫特羅。將固相載體上已包被的抗體（羊抗兔IgG抗體）與特異性的抗克倫特羅抗體結合，然後加入待測克倫特羅和酶偶聯克倫特羅，它們競爭性與克倫特羅抗體結合，洗滌後加底物，根據有色物的變化計量待測克倫特羅量。若待測克倫特羅多，則被結合的酶偶聯克倫特羅少，有色物量就少。用目測法或比色法測定樣品中的克倫特羅含量，比色的最佳波長為450 nm，參比波長應大於600 nm。
膠體金免疫層析法（Colloidal gold immunochromatography）
利用競爭法膠體金免疫層析技術，檢測液中的Clen與金標墊上的金標抗體結合形成複合物，若Clen在檢測液中濃度低於靈敏度值，未結合的金標抗體流到T區時，被固定在膜上的Clen-BSA偶聯物結合，逐漸凝集成一條可見的T線；若Clen濃度高於靈敏度值，金標抗體全部形成複合物，不會再與T線處Clen-BSA偶聯物結合形成可見T線。未固定的複合物流過T區被C區的二抗捕獲並形成可見的C線。C線出現則表明免疫層析發生，即試紙有效.
檢驗方法
1. 在進行測試前先完整閱讀使用說明書，使用前將試劑板和待檢樣本溶液恢復至室溫。
2. 撕開鋁塑袋，取出試紙。
3. 依據型號進行操作（尿液不得直接浸濕觀察區）。
3.1 將試紙白色一端浸入尿液中（液面不得超過橫線），保持5秒鐘；
3.2 用滴管吸取待檢樣品尿液，逐滴緩慢加入3滴樣品於加樣孔中。
4. 將試紙平放1分鐘，等待紅色條帶出現。
5. 3～8分鐘內讀取結果，10分鐘後判讀無效。
6. 10分鐘內可以檢測出結果
結果判讀
陽性（+）：僅質控區（C）出現一條紫紅色條帶。在測試區（T）內無紫紅色條帶出現。
陰性（-）：兩條紫紅色條帶出現。一條位於測試區（T）內，另一條位於質控區（C）內。
無效：質控區（C）未出現紫紅色條帶，提示測試失敗或試 紙已失效。
注意：測試區（T）內的紫紅色條帶可顯現出顏色深淺的現象。但是，在規定的觀察時間內，不論該色帶顏色深淺，即使只有非常弱的色帶也應判定為陰性結果。
注意事項
1.檢測卡請在保質期內一次性使用。
2.檢測時避免陽光直射和電風扇直吹。
3.儘量不要觸摸檢測卡中央的白色膜面。
4.尿樣滴管不可混用，以免交叉污染。
5.如果尿樣出現沉澱或渾濁物，請離心後再檢測。
液相色譜—質譜/質譜法（HPLC-MS/MS）
參見SN/T 1924—2007 進出口動物源食品中克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林殘留量的檢測方法。
本標準適用於動物源性食品肌肉和內臟中克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林殘留量的檢測。
試樣中的藥物殘留採用pH5.2的乙酸銨緩衝液提取，同時加入β-鹽酸葡萄糖醛甙酶-芳基硫酯酶進行酶解後，提取液經C18和SCX雙SPE柱淨化，液相色譜—質譜進行測定，內標法定量。
