疏水層析

疏水層析也稱疏水作用層析(hydrophobic interaction chromatography HIC)從分離純化生命物質的機制來看,也屬於吸附層析一類。疏水層析和反相層析(reversed phase chromatography)分離生命物質的依據是一致的,利用固定相載體上偶聯疏水性配基與流動相中的一些疏水分子發生可逆性結合而進行分離。該方法基於的是蛋白質的疏水差異,在高鹽溶液中,蛋白質會與疏水配基相結合,而其他的雜蛋白則沒有此種性質,利用此種性質,可以將蛋白質初步的分離,用於鹽析之後的蛋白質進一步提純。

基本介紹

  • 中文名:疏水層析
  • 外文名:hydrophobic chromatography
  • 也稱疏水作用下層析
  • 基於:蛋白質的疏水差異
經歷,

經歷

一般而言,離子強度(鹽濃度)越高,物質所形成的疏水鍵越強。影響疏水作用的因素包括:鹽濃度,溫度,pH,表面活化劑和有機溶劑。疏水層析的套用與離子交換層析的套用剛好互補,因此,可以用於分離離子交換層析很難或不能分離的物質。
疏水層析其原理如下:蛋白質表面一般有疏水與親水基團,疏水層析是利用蛋白質表面某一部分具有疏水性,與帶有疏水性的載體在高鹽濃度時結合。在洗脫時,將鹽濃度逐漸降低,因其疏水性不同而逐個地先後被洗脫而純化,可用於分離其它方法不易純化的蛋白質。

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