染色體原位雜交也是固相雜交的一種形式。這一技術用來確定某一目的DNA順序在完整染色體上的位置。操作時，將染色體固定在載玻片上，並經過處理除去RNA和蛋白質，使染色體DNA變性，在原來的位置上與核酸探針進行雜交。這一技術首次套用在確定rDNA在核仁組織中心的位置。現已套用於基因的定位。
基本介紹
- 中文名：染色體原位雜交
- 外文名：Chromosome in situ hybridization
- 地位：固相雜交的一種形式
- 套用：DNA順序在完整染色體上的位置
- 第一次使用：rDNA在核仁組織中心的位置
- 現狀：現已套用於基因的定位
簡介,核酸分子雜交,雜交方法,
簡介
染色體原位雜交也是固相雜交的一種形式。這一技術用來確定某一目的DNA順序在完整染色體上的位置。操作時，將染色體固定在載玻片上，並經過處理除去RNA和蛋白質，使染色體DNA變性，在原來的位置上與核酸探針進行雜交。這一技術首次套用在確定rDNA在核仁組織中心的位置。現已套用於基因的定位。
核酸分子雜交
根據異源單鏈核酸分子間因結構互補發生共價鍵結合，能形成互補雜合雙鏈，而進行分子遺傳學研究的一種技術。雙鏈核酸分子加熱至80～100℃時，鹼基對之間的氫鍵斷開，形成兩條單鏈，這一過程叫作核酸的變性作用或解鏈。變性的核酸分子慢慢冷卻，互補的鹼基對之間又會重新形成雙鏈分子，這一過程叫作核酸的復性作用或退火。核酸分子在pH〉10和pH〈3的環境中也會變性，當條件適合時又可復性。核酸分子雜交技術是基於核酸變性與復性的原理。
利用核酸雜交技術進行定性或定量分析的最有效方法是將一種核酸單鏈用同位素或螢光物質標記，製成探針(見核酸分子探針)，再與另一種核酸單鏈雜交。
雜交方法
核酸分子雜交有液相和固相兩種方法。液相法的核酸單鏈分子都在溶液中，通過分子運動進行雜交固相法是將一種核酸單鏈固定在不溶性的介質上。另一種核酸單鏈在溶液中與固定的核酸分子進行雜交。常用的固相介質有硝酸纖維膜、尼龍纖維膜、瓊脂糖和聚丙烯醯胺凝膠等。
