免疫細胞化學是將免疫學基本原理與細胞化學技術相結合所建立起來的新技術，根據抗原與抗體特異性結合的特點，檢測細胞內某種多肽、蛋白質及膜表面抗原和受體等大分子物質的存在與分布。
基本介紹
- 中文名：免疫細胞化學
- 外文名：immunocytochemistry
- 解釋：免疫學原理與細胞化學技術結合
- 屬性：一種新技術
- 分類：直接法，間接法
- 拼音：mianyixibaohuaxue
簡介,分類,常用的生物素,
簡介
肽類與蛋白質種類繁多，均具有抗原性，當將人或動物的某種肽或蛋白質作為抗原注入另一種動物體內，則產生與該抗原相應的特異性抗體（免疫球蛋白）；將抗體從血清中提出後，結合上某種標記物，即成為標記抗體。用標記抗體與組織切片標本孵育，抗體則與細胞中相應抗原發生特異性結合，結合部位被標記物顯示，則在顯微鏡下觀察到該肽或蛋白質的分布。用螢光素（常用異硫氰酸）標記抗體，並於螢光顯微鏡下觀察，稱免疫螢光術。如抗體與辣根過氧化物酶（horse radish peroxidase， HRP）等結合，進行酶顯示後，可在光鏡或電鏡觀察，用於電鏡者則稱為免疫電鏡術（immunoelectronmicroscopy)此外，以鐵蛋 標記抗體白標記抗體，稱鐵蛋白標記法,也能用於電鏡下觀察。
分類
①直接法：用標記抗體與抗體中的相應抗原直接結合，操作方法簡便，特異性高，但敏感性較差，此法可用於檢定未知抗原；②間接法：先用未標記的具有特異性的第一抗體與樣品中的相應抗原結合，然後再以標記的第二抗體與特異性的第一抗體結合；第二抗體是用第一抗體作為抗原注入另一動物體內誘導產生的抗體，然後再結合以標記物。通過這樣的放大作用，使抗原分子上的標記物大大增多，故間接法較直接法的敏感性大為增高，約高5～10倍，故套用更為廣泛。間接法中較常用的，如過氧化物酶-抗過氧化物酶複合物法(peroxidase anti-peroxidase complexmethod， 標記方法PAP法)，該法除需一抗和二抗外，還需要製備HRP標記的抗酶抗體,即以HRP作為抗原免疫動物，製成抗HRP抗體，再以HRP對標記該抗體，製成穩定的環形PAP複合物。標本先後經一抗、二抗和PAP複合物處理後再以DAB顯色抗原存在部位可見棕黃色產物。免疫細胞學技術有了很大進展，各種新方法相繼建立。單克隆抗體 （monoclonal antibody）製備技術極大地提高抗體的特異性與免疫組化染色的精確性。繼PAP法之後由於生物素-親合素等試劑的套用，為檢測微量抗原、受體、抗體提供了更精確的技術。
常用的生物素
親合方法有:標記親合素-生物素法(labelled avidin-biotin method LAB法)、橋連親合素-生物素法（bridged avidin-biotin method, BAB法)及親素-生物素-過氧化物酶複合物法(avidin-biotin-peroxidase complex method，ABC法)；現市上有配製成的ABC藥盒供應，使用簡便，是廣泛套用的一種方法。
