SOD Assay Kit - WST

基本介紹

• 中文名：SOD Assay Kit - WST
• 開發者：日本同仁化學研究所
• 用途：檢測超氧化物歧化酶（SOD）活性
• 商標：WST

廠家

SOD Assay Kit - WST是由日本同仁化學研究所（Dojindo）開發的檢測超氧化物歧化酶（SOD）活性的試劑盒，它具有以下特點：

1、靈敏度高，結果準確可靠

2、操作簡便，重複性好

3、採用96孔板檢測，省時省力

4、可一次檢測多個樣品

5、採用WST染色方法，可以測定100% SOD抑制率

6、眾多SCI論文支持

專利

WST®：WST是日本同仁化學研究所的註冊商標

原理

超氧化物歧化酶（SOD）能夠催化超氧陰離子（O2·-）歧化，生成過氧化氫以及單質氧，是一種重要的抗氧化酶。哺乳動物細胞溶質中的SOD呈綠色，並且由兩種亞單位構成，一種含有銅，另一種含有鋅（Cu/Zn-SOD）。線粒體和細菌SOD為紅紫色並含有錳（Mn-SOD）。E.coli含有Mn-SOD和Fe-SOD。

為了測定SOD的活性，研究人員嘗試了許多間接的或者直接的方法，其中，NBT的間接法最為常用，因為它很方便。但是，NBT法有幾個缺點，例如生成的染料水溶性差，而且會和黃嘌呤氧化酶的還原型發生反應。雖然cytochrome C法也常被用來做SOD檢測，但它和超氧化物反應過於劇烈，不能測定低水平的SOD。SOD Assay Kit-WST®使用了Dojindo自己發明的易溶於水的噻唑鹽：WST®-1（2-(4-碘苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯基)-2氫-四唑鹽,二鈉鹽），能夠和超氧陰離子反應生成水溶性的染料，因此可以簡便地進行SOD的檢測。WST®-1與超氧陰離子反應的劇烈程度比cytochrome C小70倍；因此，它的檢測靈敏度非常高，並且能夠通過將樣品用buffer稀釋，使背景的吸光度最小化。WST®-1不會和黃嘌呤氧化酶的還原型發生反應，因此，能夠檢測SOD100%的抑制率。WST®-1被超氧陰離子還原的比率與黃嘌呤氧化酶的活性線性相關，並且會被SOD所抑制（見下圖）。因此，SOD或者SOD類似物的IC50(50%的抑制濃度)就能用比色法來測定。

Concentration of SOD（U/ml）

反應原理