Patanjali法

Ptanjai等使用隨機引物引發反轉錄、片段克隆進載體或PCR擴增來製備雜交用的DNA鏈,即使用六鹼基的隨機引物來進行反轉錄,雙鏈化的CDNA用電泳收集4001600bp的部分,接上普通接頭,製成文庫。然後用PCR 從文庫中擴出CDNA 片段,進行一輪變性一復性一羥基磷灰石色譜過程。其不同時間的復性程度以Southern 印跡測定。

克隆雜交和直接測序結果顯示,豐度變異係數由標準化前的10000降至其後的60。Lamerdio等用本方法構建了成人胸腺組織的入gt10標準化文庫。文庫插人片段平均長度為570bp,對其中500個克隆進行測序,333個產生了有價值信息,與公用資料庫比對後,註冊298個EST,其中136個在人染色體上定了位。

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