DNS法測還原糖

DNS即二硝基水楊酸法是利用鹼性條件下，二硝基水楊酸（DNS）與還原糖發生氧化還原反應，生成3-氨基-5-硝基水楊酸，該產物在煮沸條件下顯棕紅色，且在一定濃度範圍內顏色深淺與還原糖含量成比例關係的原理，用比色法測定還原糖含量的。

基本介紹

• 中文名：DNS法測還原糖
• 種類：DNS水解產生的多種還原糖體系
• 製備原料：DNS，氫氧化鈉
• 儲存：棕色瓶儲存一周后使用

DNS

DNS即二硝基水楊酸法是利用鹼性條件下，二硝基水楊酸（DNS）與還原糖發生氧化還原反應，生成3-氨基-5-硝基水楊酸，該產物在煮沸條件下顯棕紅色，且在一定濃度範圍內顏色深淺與還原糖含量成比例關係的原理，用比色法測定還原糖含量的。因其顯色的深淺只與糖類游離出還原基團的數量有關，而對還原糖的種類沒有選擇性，故DNS方法適合用在多糖（如纖維素、半纖維素和澱粉等）水解產生的多種還原糖體系中。

試劑製備

將6.3克3,5-二硝基水楊酸和262ml 2mol/L氫氧化鈉，加到500ml含有182克酒石酸鉀鈉的熱水溶液中，再加上5克重苯酚和5克亞硫酸鈉，攪拌溶解，冷卻後加水定容到1000ml，即製成DNS試劑，貯於棕色瓶中放置一周后備用。

標準曲線

分別取葡萄糖標準液（1mg/ml）0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml於15 ml試管中，用蒸餾水補足至1.0ml, 分別準確加入DNS試劑2ml，沸水浴加熱2min，流水冷卻，用水補足到15ml刻度。在520nm波長下測定吸光度。

樣品測定

樣品液適當稀釋，使糖濃度為0.1-1.0mg/ml，取稀釋後的糖液1.0ml於15ml刻度試管中，加DNS試劑2.0ml，沸水煮沸2min，冷卻後用水補足到15ml刻度，在520nm波長下測定吸光度。從標準曲線查出葡萄糖mg/ml數。求出樣品中糖含量。