Chip(沉澱技術)

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Chip即染色質免疫沉澱技術(Chromatin Immunoprecipitation,是在全基因組水平研究生命體組織或細胞內蛋白質與DNA相互作用的一種技術方法。

概念原理
它利用抗原抗體反應的特異性,可以真實地反映蛋白質與基因組DNA結合的狀況。特別是由於該技術不斷的發展和完善,其套用範圍已經從研究目的蛋白與已知靶序列間的相互作用,發展到研究目的蛋白與整個基因組的未知序列的相互作用;從研究一個目的蛋白與DNA的相互作用,發展到研究兩個蛋白與DNA共同結合的相互作用;從研究啟動子區域的組蛋白的修飾,發展到研究結合在DNA序列上的蛋白複合物。隨著對基因功能研究的不斷深入,這項技術正越來越多的被套用於科研的各個領域。已經有成熟的ChIP試劑盒出售,如Millipore公司提供的EZ-ChIP試劑盒,使得越來越多的研究者更容易地採用染色質沉澱技術在許多研究領域取得了成功。
染色質免疫沉澱技術的原理是:在生理狀態下把細胞內的DNA與蛋白質交聯在一起,通過超聲或酶處理將染色質切為小片段後,利用抗原抗體的特異性識別反應,將與目的蛋白相結合的DNA片段沉澱下來。染色質免疫沉澱技術一般包括細胞固定,染色質斷裂,染色質免疫沉澱,交聯反應的逆轉,DNA的純化,以及DNA的鑑定。因為ChIP實驗涉及的步驟多,結果的重複性較差,所以對ChIP實驗過程的每一步都應設計相應的對照,而且對結果的分析也需要有一定的經驗。對於剛剛開始使用ChIP技術的研究人員來說,使用成熟的商品化試劑盒和相關的技術服務會達到事半功倍的效果,比如Millipore公司的EZ-ChIP試劑盒就是專門為初學者設計的入門產品。

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