體視螢光顯微鏡

定義

使用範圍：主要廣泛套用於生物、工業檢測、司法刑偵等領域，既是螢光防偽印刷檢測的必備工具，也是礦物研究的理想儀器。

所屬學科：機械工程(一級學科) ；光學儀器(二級學科) ；顯微鏡-顯微鏡名稱(三級學科)

簡述

螢光體視顯微鏡是活體動物體內螢光成像技術的核心技術，它主要廣泛套用於生物、工業檢測、司法刑偵等領域，既是螢光防偽印刷檢測的必備工具，也是是礦物研究的理想儀器。

使用方法

(1)將材料片放在載物台上。

(2)開啟螢光顯微鏡穩壓器，然後按下啟動組點燃紫外燈15min內不得關閉，關閉後3min內不得再啟動。

(3)將激發濾光片轉至v，分色片調到v，選用495或475nm阻擋濾光片。

(4)選用uvFL40、uvFL100螢光接物鏡鏡檢。

(5)在玻片上加無螢光油，先用40x，再用100x調焦鏡檢，呈現螢光。

(7)因螢光物質受紫外光照射時隨時間的增長螢光逐漸變弱，因此鏡檢時應經常變換視野。

(8)亦可用uvFL10或uvFL20低倍鏡鏡檢材料（用低倍鏡時不加無螢光油）。

分類及鏡檢術

螢光顯微鏡是用短波長的光線照射用螢光素染色過的被檢物體，使之受激發後而產生長波長的螢光，然後觀察。螢光顯微鏡廣泛套用於生物等領域。

（1）螢光顯微鏡一般分為透射和落射式兩種類型:

透射式：激發光來自被檢物體的下方，聚光鏡為暗視野聚光鏡，使激發光不進入物鏡，而使螢光進入物鏡。它在低倍情況下明亮，而高倍則會變暗，在油浸和調中時，較難操作，尤以低倍的照明範圍難以確定，但能得到很暗的視野背景。透射式不適用於非透明的被檢物體。

落射式：透射式目前幾乎被淘汰，新型的螢光顯微鏡多為落射式，光源來自被檢物體的上方，在光路中具有分光鏡，所以對透明和不透明的被檢物體都適用。由於物鏡起了聚光鏡的作用，不僅便於操作，而且從低倍到高倍，可以實現整個視場的均勻照明。

（2）螢光鏡檢術的注意事項:

a.激發光長時間的照射，會發生螢光的衰減和淬滅現象，因此儘可能縮短觀察時間，在不觀察時，套用擋板遮蓋激發光。

b.作油鏡觀察時，套用"無螢光油"。

c.螢光幾乎都較弱，應在較暗的室內進行。

d.電源最好裝穩壓器，否則電壓不穩，不僅會降低汞燈的壽命，也會影響鏡檢的效果。

目前許多新興生物研究領域套用到螢光顯微鏡，如基因原位雜交（FISH）等等。

螢光圖像的記錄

螢光顯微鏡所看到的螢光圖像，一是具有形態學特徵，二是具有螢光的顏色和亮度，在判斷結果時，必須將二者結合起來綜合判斷。結果記錄根據主觀指標，即憑工作者目力觀察。作為一般定性觀察，基本上可靠的。隨著技術科學的發展，在不同程度上採用客觀指標記錄判斷結果，如用細胞分光光度計、圖像分析儀等儀器。但這些儀器記錄的結果，也必須結合主觀的判斷。

螢光顯微鏡攝影技術對於記錄螢光圖像十分必要，由於螢光很易褪色減弱，要即時攝影記錄結果。方法與普通顯微攝影技術基本相同。只是需要採用高速感光膠片如ASA200以上或24o以上。因紫外光對螢光猝滅作用大，如FITC的標記物，在紫外光下照射30s，螢光亮度降低50%。所以，曝光速度太慢，就不能將螢光圖像拍攝下來。一般研究型螢光顯微鏡都有半自動或全自動顯微攝影系統裝置。

名稱	系統參數
目鏡	SWF10X/22mm
目鏡	SXF10X , WFl5X ,WF20X ,WF25X (選配)
物鏡	1X
物鏡	0.5X,0.75X,1.5X ,2X(選配)
變倍比	1:8.3
物鏡變倍範圍	0.6X-5X
工作距離	95mm
目距調節範圍	48mm-75mm
機頭	傾斜45度
視度調節	±5視度
機頭能360度旋轉	360
螢光照明器	汞燈燈箱 100W/DC 電源箱:交流電:110V 或 220V 螢光濾光片組 B激發光波段:420~485nm 螢光濾光片組 G激發光波段:460~550nm（選配）螢光濾光片組 UV激發光波:330~400nm（選配）螢光濾光片組 V激發光波段395~415nm（選配）

MZX-LED 選配(5V 3W): LED體視螢光模組
品名	綠色激發組(MZX-B-LED)	藍色激發組(MZX-G-LED)	藍綠雙激發(MZX-BG-LED)
激發濾光片	510-550nm高透	460-490nm高透	參數同藍、綠單激發相同
45°分光鏡	570（>570高透)	500（>500高透)
吸收濾光片	590（>590高透)	520（>520高透)

體視螢光顯微鏡

基本介紹

定義

簡述

使用方法

分類及鏡檢術

螢光圖像的記錄

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