《飼料中洛克沙胂的測定 高效液相色譜法(GB/T 22146-2008)》於2008年9月第一版、第一次印刷。本標準由中華人民共和國農業部提出、全國飼料工業標準化技術委員會歸口。《飼料中洛克沙胂的測定 高效液相色譜法(GB/T 22146-2008)》由中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局—中國國家標準化管理委員會於2008年6月發布，並於2008年10月實施。
基本介紹
- 書名：飼料中洛克沙胂的測定 高效液相色譜法
- 作者：中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局 中國國家標準化管理委員會
- 出版日期：2008年9月1日
- 語種：簡體中文
- ISBN：155066133309
- 外文名：Determination of Roxarsone in Animal Feeds-High Performance Liquid Chromatography
- 出版社：中國標準出版社
- 頁數：2頁
- 開本：16
- 品牌：北京勁松建達科技圖書有限公司
內容簡介,文摘,
內容簡介
《飼料中洛克沙胂的測定 高效液相色譜法(GB/T 22146-2008)》由中國標準出版社出版。
文摘
著作權頁：
1 範圍
本標準規定了用高效液相色譜法測定飼料中洛克沙胂的含量。
本標準適用於配合飼料、濃縮飼料和添加劑預混合飼料中洛克沙胂的測定。
本標準定量限為5 mg/kg。
2 規範性引用檔案
下列檔案中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用檔案，其隨後所有的修改單（不包括勘誤的內容）或修訂版均不適用於本標準，然而，鼓勵根據本標準達成協定的各方研究是否可使用這些檔案的最新版本。凡是不注日期的引用檔案，其最新版本適用於本標準。
GB/T 6682 分析實驗室用水規格和試驗方法（GB/T 6682—1992，neq ISO 3696：1987）
GB/T 14699.1 飼料 採樣
3 原理
用磷酸氫二鉀溶液作為提取液，用複合陰離子交換柱萃取柱淨化後，經反相C18柱分離，採用紫外檢測器檢測，根據洛克沙胂的色譜峰保留時間進行定性，以外標法進行定量分析。
4 試劑和溶液
除特殊註明外，本標準所用試劑均為分析純。水為符合GB/T 6682二級用水規定。
4.1 甲醇：色譜純。
4.2 磷酸氫二鉀溶液（20 g/L）：稱取20 g磷酸氫二鉀（K2HPO4）用水溶解，並定容至1000 mL。
4.3 硫酸銅溶液（100 g/L）：稱取10 g硫酸銅（CuSO4.5H2O）用水溶解，並定容至100 mL。
4.4 固相萃取小柱淋洗液與洗脫液
4.4.1 淋洗液1：6.80 g/L乙酸鈉—甲醇溶液。稱取6.80 g乙酸鈉（Na2C2H3O·3H2O）於燒杯中，加入800 mL水溶解，用10%乙酸調pH至7，加入53 mL甲醇，定容至1000 mL，4℃貯存。
4.4.2 淋洗液2：無水甲醇。
4.4.3 洗脫液：5%甲酸甲醇溶液，吸取5 mL甲酸，用無水甲醇定容至100 mL。
4.5 流動相
4.5.1 A液：含0.1%甲酸的6.98 g/L磷酸二氫鉀溶液，稱取6.98 g磷酸二氫鉀（KH2PO4）於燒杯中，用水溶解，加入1 mL甲酸溶液，並定容至1000 mL。
4.5.2 B液：無水甲醇。
4.6 洛克沙胂標準溶液
4.6.1 標準貯備液：準確稱取洛克沙胂標準品（含量≥99%）500 mg，置於1000 mL棕色容量瓶中，用磷酸氫二鉀溶液（4.2）超聲溶解，配製成500 μg/mL標準貯備液，貯於4℃冰櫃中。
4.6.2 標準工作液：吸取標準貯備液（4.6.1）0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL分別至50 mL棕色容量瓶中，並用磷酸氫二鉀溶液（4.2）稀釋至刻度，搖勻。其濃度分別為2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 μg/mL的標準工作液。
5儀器、設備
5.1 分析天平：感量為0.0001 g。
5.2 離心機：轉速能達3000 r/min～4000 r/min。
5.3 固相萃取（SPE）裝置。
5.4 恆溫水浴和氮吹儀。
5.5 渦旋混合器。
5.6 複合陰離子固相萃取小柱。
5.7 高效液相儀（配有紫外檢測器）。
5.8 超音波儀。
6 試樣製備
按照GB/T 14699.1規定方法採樣，採取樣品量至少500 g，以四分法縮減至200 g，粉碎過孔徑0.45 mm目篩，充分混勻，裝瓶，備用。
7 分析步驟
7.1 試樣溶液的準備
7.1.1 提取
準確稱取適量試樣（配合飼料5g，濃縮飼料2g，添加劑預混合飼料1g，準確至0.0001 g）於50 mL離心管中，加磷酸氫二鉀溶液（4.2）40 mL，蓋好管蓋，充分振搖後，在60℃超聲水浴上提取30 min，然後於離心機以4000 r/min離心10 min。上清液倒入100 mL棕色容量瓶中，殘渣再分別用上述提取劑30 mL、20 mL重複提取2次，每次15 min，離心後合併上清液於100 mL棕色容量瓶中，然後加硫酸銅溶液（4.3）2 mL，並用磷酸氫二鉀溶液（4.2）稀釋至刻度，搖勻，過濾，濾液待用。
濃縮飼料和添加劑預混合飼料的濾液需分別做2倍和5倍稀釋。
1 範圍
本標準規定了用高效液相色譜法測定飼料中洛克沙胂的含量。
本標準適用於配合飼料、濃縮飼料和添加劑預混合飼料中洛克沙胂的測定。
本標準定量限為5 mg/kg。
2 規範性引用檔案
下列檔案中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用檔案，其隨後所有的修改單（不包括勘誤的內容）或修訂版均不適用於本標準，然而，鼓勵根據本標準達成協定的各方研究是否可使用這些檔案的最新版本。凡是不注日期的引用檔案，其最新版本適用於本標準。
GB/T 6682 分析實驗室用水規格和試驗方法（GB/T 6682—1992，neq ISO 3696：1987）
GB/T 14699.1 飼料 採樣
3 原理
用磷酸氫二鉀溶液作為提取液，用複合陰離子交換柱萃取柱淨化後，經反相C18柱分離，採用紫外檢測器檢測，根據洛克沙胂的色譜峰保留時間進行定性，以外標法進行定量分析。
4 試劑和溶液
除特殊註明外，本標準所用試劑均為分析純。水為符合GB/T 6682二級用水規定。
4.1 甲醇：色譜純。
4.2 磷酸氫二鉀溶液（20 g/L）：稱取20 g磷酸氫二鉀（K2HPO4）用水溶解，並定容至1000 mL。
4.3 硫酸銅溶液（100 g/L）：稱取10 g硫酸銅（CuSO4.5H2O）用水溶解，並定容至100 mL。
4.4 固相萃取小柱淋洗液與洗脫液
4.4.1 淋洗液1：6.80 g/L乙酸鈉—甲醇溶液。稱取6.80 g乙酸鈉（Na2C2H3O·3H2O）於燒杯中，加入800 mL水溶解，用10%乙酸調pH至7，加入53 mL甲醇，定容至1000 mL，4℃貯存。
4.4.2 淋洗液2：無水甲醇。
4.4.3 洗脫液：5%甲酸甲醇溶液，吸取5 mL甲酸，用無水甲醇定容至100 mL。
4.5 流動相
4.5.1 A液：含0.1%甲酸的6.98 g/L磷酸二氫鉀溶液，稱取6.98 g磷酸二氫鉀（KH2PO4）於燒杯中，用水溶解，加入1 mL甲酸溶液，並定容至1000 mL。
4.5.2 B液：無水甲醇。
4.6 洛克沙胂標準溶液
4.6.1 標準貯備液：準確稱取洛克沙胂標準品（含量≥99%）500 mg，置於1000 mL棕色容量瓶中，用磷酸氫二鉀溶液（4.2）超聲溶解，配製成500 μg/mL標準貯備液，貯於4℃冰櫃中。
4.6.2 標準工作液：吸取標準貯備液（4.6.1）0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL分別至50 mL棕色容量瓶中，並用磷酸氫二鉀溶液（4.2）稀釋至刻度，搖勻。其濃度分別為2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 μg/mL的標準工作液。
5儀器、設備
5.1 分析天平：感量為0.0001 g。
5.2 離心機：轉速能達3000 r/min～4000 r/min。
5.3 固相萃取（SPE）裝置。
5.4 恆溫水浴和氮吹儀。
5.5 渦旋混合器。
5.6 複合陰離子固相萃取小柱。
5.7 高效液相儀（配有紫外檢測器）。
5.8 超音波儀。
6 試樣製備
按照GB/T 14699.1規定方法採樣，採取樣品量至少500 g，以四分法縮減至200 g，粉碎過孔徑0.45 mm目篩，充分混勻，裝瓶，備用。
7 分析步驟
7.1 試樣溶液的準備
7.1.1 提取
準確稱取適量試樣（配合飼料5g，濃縮飼料2g，添加劑預混合飼料1g，準確至0.0001 g）於50 mL離心管中，加磷酸氫二鉀溶液（4.2）40 mL，蓋好管蓋，充分振搖後，在60℃超聲水浴上提取30 min，然後於離心機以4000 r/min離心10 min。上清液倒入100 mL棕色容量瓶中，殘渣再分別用上述提取劑30 mL、20 mL重複提取2次，每次15 min，離心後合併上清液於100 mL棕色容量瓶中，然後加硫酸銅溶液（4.3）2 mL，並用磷酸氫二鉀溶液（4.2）稀釋至刻度，搖勻，過濾，濾液待用。
濃縮飼料和添加劑預混合飼料的濾液需分別做2倍和5倍稀釋。
