銀染測序

銀染測序是由Proega公司推出的一種測序方法。它不使用放射性同位素,而是使用較為敏感的銀染色檢測法來檢測序列膠中的DNA條帶。

基本介紹

  • 中文名:銀染測序
  • 定義:Proega公司推出的一種測序方法
  • e:使用較為敏感的銀染色檢測法
  • u:不使用放射性同位素
銀染測序的原理
由於銀染法靈敏度低於放射性同位素和螢光染料,因此它需要的DNA量也較多。其基本原理是通過高靈敏度的銀鹽顯色步驟來檢測末端終止法完成的測序凝膠條帶。銀染測序系統利用線性擴增,熱循環等步驟獲得銀染檢測所需的足夠DNA量,在一天內完成序列反應,電泳分離,並獲得數據。該方法可以在電泳結束後一個半小時內得出結果,同時也省去了放射性同位素操作過程中的特殊防護措施。與螢光染料標記方法比較,螢光及化學發光技術需要昂貴的試劑來標記引物或底物,同時需要昂貴的儀器來檢測。銀染色測序法使用普通的寡核苷酸引物,無需在引物5'-OH末端或底物進行任何修飾,也不需要複雜的儀器設備來檢測結果,可以在顯色後的膠上直接讀序。該法快速、安全、費用低,而成為酶法測序分析中的重要測序系統。銀染測序包括:模板製備;測序反應;序列膠電泳分離;銀染顯色 結果與讀序。銀染法測序凝膠製備方法同STR複合擴增產物銀染檢測,採用特殊方法分別處理測序凝膠的長短兩塊玻璃板,使電泳結束後凝膠能夠附著在短玻璃板上,而與長玻璃板能夠比較容易分離,凝膠在短玻璃板的托載下,能夠方便地進行顯色操作。

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