血凝儀

血凝儀，即血液凝固分析儀，是對血栓和止血進行實驗室檢查的儀器。止血與血栓分子標誌物的檢測指標與臨床各種疾患有著密切聯繫，如動脈粥樣硬化，心腦血管疾病、糖尿病、動靜脈血栓形成，血栓閉塞性脈管炎、肺栓塞、妊娠高血壓綜合症、彌散性血管內凝血、溶血尿毒綜合症、慢性阻塞性肺炎等。中醫藥關於活血化瘀的理論與治療工作研究也都涉及止血與血栓問題。使用血凝儀對血栓和止血進行實驗室檢查成為必要。血凝儀分為全自動與半自動兩類。

基本介紹

• 中文名：血凝儀
• 意指：血液凝固分析儀
• 是對血栓：和止血進行實驗室檢查的儀器
• 檢測指標：與臨床各種疾患有著密切聯繫

簡介

目前國內外各生產廠家生產的半自動血凝儀都是基於凝固法對血液凝固過程進行測量的。血液凝固是一系列凝血因子連鎖性酶反應的結果。血液中的凝血因子以無活性酶原形式存在，當某一凝血因子被激活後，可使許多凝血因子按一定的次序先後被激活，彼此之間有複雜的催化作用，被稱為“瀑布樣學說”。這種“瀑布樣學說”產生的激變在血液的生物物理特性上表現為，電阻增大（電流法）粘度增強（磁珠法），濁度上升（光學法）。由於電流法測量可靠性差，因此為磁珠法和光學法所替代。

利用血凝儀進行血栓與止血的實驗室檢查，可為出血性和血栓性疾病的診斷、溶栓以及抗凝治療的監測及療效觀察提供了有價值的指標。隨著科學技術的日新月異，血栓與止血的檢測從傳統的手工方法發展到全自動血凝儀，從單一的凝固法發展到免疫法和生物化學法，血栓與止血的檢測也因此變得簡便、迅速、準確、可靠。

PUN-2048系列半自動凝血分析儀

發展概況

1910年Kottman發明了世界上最聚早的血凝儀，通過測定血液凝固時的粘度的變化來反應血漿凝固的時間。

1922年，Kugelmass用濁度計通過測定透射光的變化來反應血漿凝固時間。

1950年，Schnitger和Gross發明了基於電流法的血凝儀。

60年代，機械法血凝儀得到開發。

70年代以後，由於機械、電子工業的發展，使各種類型的全自動血凝儀先後問世。

80年代，由於發色底物的出現並套用於血液凝固的檢測，使全自動血凝儀除了可以進行一般的篩選試驗外，尚可以進行凝血、抗凝、纖維蛋白溶解系統單個因子的檢測。

80年代末，雙磁路磁珠法的發明給血栓與止血的檢測帶來新概念，由於其獨特的設計原理，使光學法檢測的一些影響因素在本類型的檢測儀器上均不復存在。

90年代，全自動血凝儀免疫通道的開發又為血栓與止血的檢測提供了新的手段。

基本原理

目前可開展的血栓/止血成份檢測方法主要有凝固法、底物顯色法、免疫法、乳膠凝集法等。在表中可注意到，在血栓/止血檢驗中最常用的凝血酶原時間（PT）、活化部分凝血活酶時間（APTT）、纖維蛋白原（FIB）、凝血酶時間（TT）、內源凝血因子、外源凝血因子、高分子量肝素、低分子量肝素、蛋白C、蛋白S等均可用凝固法測量。所以目前半自動血凝儀基本上都是以凝固法測量為主，而在全自動血凝儀中也一定有凝固法測量。

凝固法中又可分為光學法和磁珠法兩類。由於光學法幾乎可涵蓋各種檢測方法，為了降低儀器製造成本，全自動血凝儀以光學法居多。但也有少數高級全自動血凝儀中凝固法測量採用無樣品干擾的雙磁路磁珠法，而其它測量採用光學法，並可同時進行檢測。

測定項目	凝固法	底物; 顯色法	乳膠; 凝集法	ELISA
凝血酶原時間（PT）	●
活化部分凝血活酶時間（APTT）	●
凝血酶時間（TT）	●
纖維蛋白原（FIB）	●
外源性凝血因子II、V、VII、X	●			●
內源性凝血因子VIII、IX、XI、XII	●			●
凝血因子VIII		●
肝素	●	●
低分子量肝素	●	●
抗凝血酶III（AT-III）		●	●
蛋白C（PC）	●	●		●
蛋白S（PS）	●	●		●
血栓調節蛋白（Thromodulin）		●		●
活化蛋白C抵抗性（APC-R）	●
纖溶酶原（PLG）		●
α2抗纖溶酶（α2-AP）		●
補體1脂酶抑制物（CI）		●
組織纖溶酶原激活物（t-PA）		●		●
纖溶酶原激活物抑制物（PAI）		●		●
纖維蛋白單體		●
纖維蛋白降解產物（FDP）			●	●
D-二聚體（D-Dimer）			●	●
纖維蛋白肽A（FPA）				●
凝血酶原片段1+2（F1+2）				●

測定方法

光學法（比濁法）

光學法血凝儀是根據血漿凝固過程中濁度的變化來測定凝血功能。根據儀器不同的光學測量原理，又可分為散射比濁法和透射比濁法兩類。

散射比濁法是根據待驗樣品在凝固過程中散射光的變化來確定檢測終點的。在該方法中檢測通道的單色光源與光探測器呈90°直角，當向樣品中加入凝血激活劑後，隨樣品中纖維蛋白凝塊的形成過程，樣品的散射光強度逐步增加。當樣品完全凝固以後，散射光的強度不再變化，通常是把凝固的起始點作為0%，凝固終點作為100%，把50%作為凝固時間。光探測器接收這一光學的變化，將其轉化為電信號，經過放大再被傳送到監測器上進行處理，描出凝固曲線。

透射比濁法，是根據待測樣品在凝固過程中吸光度變化來確定凝固終點的、與散射比濁法不同的是該方法的光路同一般的比色法一樣呈直線安排：來自光源的光線經過處理後變成平行光，透過待測樣品後照射到光電管變成電信號，經過放大後監測處理。當向樣品中加入凝血激活劑後，開始的吸光度非常弱，隨著反應管中纖維蛋白凝塊的形成，標本吸光度也逐漸增強，當凝塊完全形成後，吸光度趨於恆定。血凝儀可以自動描繪吸光度的變化曲線並設定其中某一點對應的時間為凝固時間。

磁珠法

磁珠法是根據血漿凝固過程中粘度的變化來測量凝血功能的。根據儀器對磁珠運動測量原理的不同，又可分為光電探測法和電磁珠探測法。

光電探測法，在磁珠法中光電探測器的作用與光學法中不同，它只測量血漿凝固過程中磁珠的運動規律，與血漿的濁度無關。在磁珠法中的一對電磁鐵安放在測試杯的兩端，它們產生恆定的交替磁場使磁珠在測試杯中擺動，在與磁珠擺動的垂直方向安放一對光電接收裝置，當磁珠擺幅衰減到50%時確定凝固終點。

光電探測法中還有一種利用紅外光反射監測器監測磁珠運動的，下面介紹BE系列半自動血凝儀中將另加介紹。

電磁探測法又可稱為雙磁路磁珠法，其中一對磁路用於吸引磁珠擺動，另一對磁路利用磁珠擺動過程中對磁力線的切割所產生的電信號，對磁珠擺動幅讀度進行監控，當磁珠擺動幅度衰減到50%確定凝固終點。

比較

光學法和磁珠法用於血凝檢測，就方法論而言各有千秋，光學法的優點在於結構簡單、靈敏度高。易於自動化等。缺點在於易受特異血漿干擾，對此各廠家已採取不同措施予以彌補。磁路法優點不受特異血漿的干擾，試劑量少，缺點，磁珠的質量、杯壁的光滑程度等，均會對測量結果造成影響。一些廠家為推銷自身產品在方法論上大做文章，片片面強調某種方法的優越性是不足取的。其一目前各國生產的血凝儀兩類方法並存，且光學法占據主導地位，在全自動血凝儀中尤其如此。其二判斷儀器的優劣有多種方面包括方法、設計、工藝等。

基本結構

血凝儀按自動化程度可分為半自動化及全自動化，前者主要檢測一般常規凝血項目，後者則有自動吸樣、稀釋樣品、檢測、結果儲存、數據傳輸、結果列印、質量控制等功能，除對凝血、抗凝、纖維蛋白溶解系統功能進行全面的檢測，尚能對抗凝、溶栓治療進行實驗室監測。

半自動血凝儀

目前市售的半自動血凝儀主要由樣品、試劑預溫槽、加樣器、檢測系統（光學、磁場）及微機組成。有的半自動儀器還配備了發色檢測通道，使該類儀器同時具備了檢測抗凝及纖維蛋白溶解系統活性的功能。針對光學式半自動血凝儀受人為的因素影響多、重複性較差等缺陷，儀器中應有自動計時裝置，以告知預溫時間和最佳試劑添加時間；在測試位添加了試劑感應器，後者感應從移液器針頭滴下的試劑後自動振動，使反應過程中血漿與試劑得以很好地混合；此外，該類儀器在測試杯頂部安裝了移液器導板，在添加試劑時由導板來固定移液器針頭，從而保證了每次均可以在固定的最佳的角度添加試劑並可以防止氣泡產生。這一系列改進，提高了光學式半自動血凝儀檢測的準確性。

半自動血凝儀

一般半自動血凝儀都可進行凝固法測試，而需要用其它測試方法實現的凝血項目則可用生化分析儀、酶標儀等進行。

全自動血凝儀

該類儀器的基本構成包括：樣品傳送及處理裝置、試劑冷藏位、樣品及試劑分配系統、檢測系統、電子計算機、輸出設備及附屬檔案等。

全自動血凝儀

1. 樣品傳送及處理裝置：一般血漿樣品由傳送裝置依此向吸樣針位置移動，多數儀器還設定了急診位置，可以使常規標本檢測必要時暫停以服從免疫比濁法將被檢物與其相應抗體混合形成複合物，而產生足夠大的沉澱顆粒，通過透射比法或散射比濁進行測定。此法操作簡便，準確性好，便於自動化。

2. 試劑冷藏位：為避免試劑的變質，儀器往往有試劑冷藏功能，一般同時可以放置幾十種試劑進行冷藏。

3. 樣品及試劑分配系統：樣品臂會自動提起標本盤中的測試杯，將其置於樣品預溫槽中進行預溫。然後試劑臂將試劑注入測試杯中（性能優越的全自動血凝儀為避免凝血酶對其他檢測試劑的污染，有獨立的凝血酶吸樣針），帶有旋渦混合器的裝置將試劑與樣品進行充分混合後將送至測試位，經檢測的測試杯被該裝置自動丟棄於特設的廢物箱中。

4．檢測系統：這是涉及儀器測量原理的關鍵部分。檢測血漿的凝固可以通過凝固反應檢測法檢測，即當纖維蛋白凝塊形成時，檢測散射光在660nm處渾濁液吸光度的變化；或通過凝固點檢測法檢測，即計算達到預先設定好的吸光度值時的凝固時間；而磁珠法則是通過測定在一定磁場強度下小鋼珠的擺動幅度變化來測定血漿凝固點。發色底物法及免疫法是檢測反應液在405nm、575nm及800nm時的吸光度變化來反映被檢測物質的活性。

5. 電子計算機：根據設定的程式計算機指揮血凝儀進行工作並將檢測得到的數據進行分析處理，最終得到測試結果。計算機尚可對患者的檢驗結果進行儲存，記憶操作過程中的各種失誤，及進行質量有關的工作。

6. 輸出設備：通過計算機螢幕或印表機輸出測試結果。

7. 附屬檔案：主要有系統附屬檔案、穿蓋系統、條碼掃瞄器、陽性樣品分析掃瞄器等。

檢測項目

目前的半自動血凝儀以凝固法測定為主，而全自動血凝分析儀可以進行凝血、抗凝和纖維蛋白溶解系統功能的測定。

凝血系統

可以進行凝血系統的篩選實驗：如凝血酶原時間（PT）、活化的部分凝血活酶時間（APTT）、凝血酶時間（TT）測定；也能進行單個凝血因子含量或活性的測定，如纖維蛋白原（FIB）、凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ。

抗凝系統

可進行抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）、蛋白C（PC）、蛋白S（PS）、抗活化蛋白C（APCR）、狼瘡抗凝物質（LAC）等測定。

纖維蛋白溶解系統

可測定纖溶酶原（PLG）、α2-抗纖溶酶（α2-AP）、FDP、D-二聚體（D-Dimer）等。

臨床用藥的檢測

當臨床套用普通肝素（UFH）、低分子肝素（LMWH）及口服抗凝劑如華發靈時，可用血凝分析儀進行監測以保用藥安全。

發展及套用

血凝儀的發展較生化分析儀為短，70年代凝血因子的活性檢測方法問世，80年代發色底物技術的廣泛運用使抗凝、纖溶的檢測成為可能，近年來，血凝儀普遍安裝了免疫比濁技術通道及軟體，結果使血栓與止血的自動化檢測日臻完善；同時由於全自動血凝儀檢測的快速、簡便、結果準確及精密度高等特點，極大地提高了檢測的速度及質量。

血凝儀的發展方向與全自動生化分析儀一樣——進一步提高儀器的檢測的自動化程度，如將自動離心機處理的標本通過傳輸裝置運至全自動血凝儀；ID條形碼識別裝置識別樣本，根據不同的測試要求對樣品進行分配，由蓋帽貫穿式進樣機吸樣後血凝儀自動進行檢測，計算機對結果進行分析、報告並傳輸至指定場所；提高儀器檢測的靈敏度與特異性，使檢測結果更符合檢測實際；逐步縮小不同儀器檢測結果的差異，增強檢測結果的可比性，進一步完善檢測的標準化；建立血凝檢測的網路化，使同一患者在不同的醫療單位的檢測結果可以互動使用，有利於減輕患者的負擔及療效的判斷；對於在中國銷售的血凝儀，應促使生產廠實現人機操作界面的漢化，以利於血栓與止血檢測的自動化的普及和提高。

性能特點

u 分析方法：光電磁珠法，真正消除黃疸、溶血、乳糜、渾濁，氣泡等影響。 u 檢測結果較光學法準確度高，重複性好 u 纖維蛋白原檢測範圍大，可檢測結果超高或低纖維蛋白原的各種異常血漿。 u 育溫計時系統，聲光自動提示。 u 同時具備聯動和手動兩種方式啟動測量，避免人工誤差 u 四通道一鍵雙模式切換。（四人同項或同人四項） u 人性化設計，可翻轉顯示屏，隨意調節舒適視角 u 5.7英寸超量藍色背光液晶顯示，界面更清晰簡潔 u 可列印實時報告和綜合報告，結果可用多種單位表示（秒，比率，%，INR，g/l，mg/dl，u/l……） u 試劑用量少，試劑減半，節省試劑。 u 試劑開放。

技術參數

溫控精度	37℃±0.1℃
測量精準度誤差	≤1.9%
測量重複性	cv≤0.6%
通道差	≤0.5%
線性相關係數	r>0.99

相關資料

一、簡要介紹德國BE公司及其所生產的半自動血凝儀系列。

BE公司是以研究開發與生產製造血凝分析產品為主和專業性高科技公司，公司擁有多項凝血分析的專利技術和數十年製造經驗。其生產質量體系獲得國際IS9001質量認證和歐洲CETUU認證。其在國內推出的TRT系列（光學法）和CL系列（磁珠法）分有單、雙、四通道不同規格，可滿足各類醫院的不同需求，現對兩種系列分別介紹如下：

TRT系列

該系列儀器有單、雙、四通道三個品種，儀器採用光學比濁測試方法。儀器工作特點：

1、該系列儀器測量過程中也需加入 磁珠，磁珠的作用：

（1）、將血漿和試劑充分混勻。

（2）、由於攪拌過程中磁珠對纖維蛋白原的纏繞使得液體逐漸變清，吸光度減少，人為增大了血漿凝固前後吸光度的差值，從而有效抑制了低纖維蛋白原、黃疸、高血脂等特異血漿對光學測量過程的干擾。

2、採用普通加樣器，加樣後計時自動開始。

3、僅用3個鍵盤，操作快捷。

該儀器配備有四個試劑溫育位，兩套樣品溫育位。

CL系列

該系列有雙、四通道兩個品種，儀器採用磁珠法，測試原理如下：測試杯中放有磁珠。測試時，測試杯下面的永久磁鐵旋轉，帶動杯中磁珠沿杯壁旋轉。測試杯的側壁外安裝有紅外反射式光電器件監視磁珠運動變化。根據運動力學原理當血漿粘度增大後，旋轉的磁珠將向杯中心靠攏，光電器件檢測不到磁珠時測量結束。

工作特點

1、不受特異血漿干擾；

2、所用試劑可比光學法減半；

3、可對纖溶進行測量；

4、兩系列儀器均可與計算機聯網，並配有操作方便的中文作業系統。

二、簡要介紹國產普利生公司及其下產品的血凝儀

北京普利生儀器有限公司成立於2000年7月，主是集設計開發、生產銷售於一體的醫療器械專業製造商。現獲GB/T 19001-2000 idt ISO 9001:2000 質量體系認證證書和YY/T 0287-2003 idt ISO 13485:2003質量體系認證證書。

該公司擁有三大系列產品：

1.全自動系列，包括全自動生化儀、全自動血液流變儀、全自動血凝儀；

2.自動顯微平台系列，包括自動顯微平台，自動全景病理(遠程)圖文系統，自動掃描尿沉渣分析系統；

3.醫學顯微圖像套用系列，包括病理、細胞、精子和染色體圖文系統；

在市場上推出半自動和全自動的血凝儀均使用先進的雙磁路磁珠法，能滿足各大小醫院及基層單位使用，現介紹其下的血凝儀C2000系統，有全自動及半自動（1-4通道）：

系列特點：

●採用國際推崇的凝固檢測模式—雙磁路磁珠法

●完全不受黃疸、溶血、乳糜、混濁等樣品干擾

● 衛生部臨檢中心權威檢測，符合衛生部新操作規程

● 高性價比、試劑開放，使用成本低

血凝儀的養護

維護與保養
(1) 每周對通針和清洗槽進行清洗：選擇Maintenance，進入保養程式，選擇Rinsing Pump，回車；再選擇Needle Purge，回車，用F6鍵打開試劑存放抽屜，3根針移到前面。將0.5%的次氯酸加入清洗槽內，約為清洗槽的4/5，浸泡lOmin；用通針器通每一根針；將機械臂上的檢測杯的定位塑膠套取下沖洗，擦乾後重新安裝牢固。用F6鍵關閉抽屜，3根針即自動進入清洗槽，分別沖洗3根針。
(2) 進人用戶保養程式，打開透明玻璃蓋，用乾淨紗布清潔運動導桿及絲桿，並塗少許潤滑油；檢查冷卻液液面，若不夠及時加足。
(3)清洗空氣過濾器。
(4)每月重複周保養內容。觀察注射器活塞頭，如有漏液及時更換，進入保養程式中的SyringeTip/Syringe Replacement，按照提示的步驟更換新的活塞頭。

產 品 介 紹; 一、產品概述： 衛生部臨檢中心對普利生C2000型半自動血凝儀有如下評價： 1. 普利生C2000型高性能血凝儀採用磁珠法原理檢測血漿的凝固終點，測定結果不受溶血、乳糜、黃疸等因素影響。該儀器操作簡單，可分析16項凝血指標，具有4個檢測通道和16個測試預溫槽5個試劑位。; 2. 檢測纖維蛋白原的線性範圍在35.2-1308mg/dl之間，相關係數r2=0.9970，表明該儀器線性良好，測試範圍寬。; 3. 普利生C2000在測定臨床樣本時與國外同類儀器如法國STAG0公司ST4測定結果有很好相關性，PT（s）、PT（INR）、FIB相關係數r2分別為：0.9944、0.9942、0.9936；分析範圍內相對偏倚分別為3.4%、1.8%和1.9%。; 4. 通道一致性檢查，四個不同通道上PT（s）、APTT（s）和FIB的測定結果無顯著性差異（P>0.05），表明同一樣本在不同通道之間有較好的重複性。; 二、功能特點： a) 具有開機自檢後，自動顯示主選單的功能; b) 具有顯示當前測量環境溫度的功能； c) 根據實驗目的和試劑的不同，具有0s~999s預熱時間設定及提示的功能； d) 具有預選通道的功能； e) 具有自動生成測試報告的功能； f) 即可用單機操作，也可與計算機進行數據傳輸; g) 建立資料庫並列印中文圖文報告。; h) 具有按用戶設定列印輸出測量結果的功能

註冊號	國藥管械(進)字2001第2400374號	生產廠商名稱（中文）	義大利Minivolt S.N.C.公司
產品性能結構及組成	本產品主要由恆溫系統、混合系統、40個樣品孔、6個試劑位置和兩個測定通道及測量系統等組成。	產品適用範圍	主要用於測定凝血酶原時間（PT）、凝血酶時間（TT）、部分凝轎源酶時間（APTT）、凝血因子（FACTOR）及纖維蛋白原（FIBRINOGEN）。
註冊代理	北京佳康瑞得醫用電子有限公司	售後服務機構	北京佳康瑞得醫用電子有限公司
批准日期	2001.06.08	有效期截止日	2005.06.06
生產廠商名稱（英文）	Minivolt S.N.C.	生產廠地址（中文）	Via di Pietralata 204/A 00158 ROMA ITALITA
生產場所		生產國（中文）	義大利
產品名稱（中文）	血凝儀	產品名稱（英文）	COAGULOMETROK
規格型號	BICO	產品標準	CEI EN60601-1-2；CEI EN55011