蒽酮法

蒽酮法，對水果、蔬菜中可溶性糖的測定，了解和鑑定水果、蔬菜品質的高低的方法。

糖類物質是構成植物體的重要組成成分之一，也是新陳代謝的主要原料和貯存物質。不同載培條件，不同成熟度都可以影響水果、蔬菜中糖類的含量。

基本介紹

• 中文名：蒽酮法
• 外文名：anthrone methods
• 含義：可溶性糖的測定
• 作用：鑑定水果、蔬菜品質的高低
• 對象：糖類物質

技術原理

糖類遇濃硫酸脫水生成糠醛或其衍生物，反應如下：

糠醛或羥甲基糠醛進一步與蒽酮試劑縮合產生藍綠色物質，其在可見光區620nm~630nm波長處有最大吸收，且其光吸收值在一定範圍內與糖的含量成正比關係。

反應模式

此法可用於單糖、寡糖和多糖的含量測定，並具有靈敏度高，簡便快捷，適用於微量樣品的測定等優點。

操作方法

實驗材料、儀器及試劑

1.材料：白菜葉、柑桔

2.儀器：分光光度計 恆溫水箱 20ml具塞刻度試管（3支）漏斗100ml容量瓶 刻度試管 試管架 剪刀 研缽

3.試劑：

（1）200μg/ml標準葡萄糖：AR級葡萄糖100mg，蒸餾水溶解，定容至500ml。

（2）蒽酮試劑：1g蒽酮，用乙酸乙酯溶解，定容至50ml，棕色瓶避光處貯藏；

（3）濃硫酸。

1.葡萄糖標準曲線的製作

計算公式

取6支20ml具塞試管，編號，按下表數據配製一系列不同濃度的標準葡萄糖溶液。

在每管中均加入0.5ml蒽酮試劑，再緩慢地加入5ml濃H2SO4，搖勻後，打開試管塞，置沸水浴中煮沸10分鐘，取出冷卻至室溫，在620nm波長下比色，測各管溶液的光密度值（OD），以標準葡萄糖含量為橫坐標，光密度值為縱坐標，作出標準曲線。

2.樣品中可溶性糖的提取

稱取1克白菜葉，剪碎，置於研缽中，加入少量蒸餾水，研磨成勻漿，然後轉入20ml刻度試管中，用10ml蒸餾水分次洗滌研缽，洗液一併轉入刻度試管中。置沸水浴中加蓋煮沸10分鐘，冷卻後過濾，濾液收集於100ml容量瓶中，用蒸餾水定容至刻度，搖勻備用。

3.糖含量測定

用移液管吸收1ml提取液於20ml具塞刻度試管中，加1ml水和0.5ml蒽酮試劑。再緩慢加入5ml濃H2SO4（注意：濃硫酸遇水會產生大量的熱！），蓋上試管塞後，輕輕搖勻，再置沸水浴中10分鐘（比色空白用2ml蒸餾水與0.5ml蒽酮試劑混合，並一同於沸水浴保溫10分鐘）。冷卻至室溫後，在波長620nm下比色，記錄光密度值。查標準曲線上得知對應的葡萄糖含量（μg）。五、結果計算

注意事項

（1）加濃H2SO4時應緩慢加入，以免產生大量熱量而爆沸，灼傷皮膚，如出現上述情況，應迅速用自來水沖洗。

（2）水浴加熱時應打開試管塞。