細胞活力分析儀主要套用於哺乳動物細胞快速、準確和客觀計數和細胞活力分析。
基本介紹
- 中文名：細胞活力分析儀
- 外文名：NucleoCounter
- 主要功能：哺乳動物細胞技術與活力分析
原理：,PI排斥法測定細胞活力,套用,
原理：
ChemoMetec A/S的NucleoCounter是內置的螢光顯微鏡設計，檢測與細胞核酸結合的螢光染料PI的信號。NucleoCounter分析的結果是總細胞濃度或死細胞濃度，取決於樣品的處理。
◇碘化丙啶
碘化丙啶（PI）是一種螢光分子和高選擇性DNA染料，PI可與雙鏈DNA（dsDNA）高效結合，一旦與DNA結合，激發和發射光波長轉換，與游離的 PI(沒有結合DNA)相比，螢光強度提高20-30倍（提高了信噪比），從而顯著提高測量精度。不同細胞（不同的細胞大小或細胞形態）的細胞核大小基本上是一致的，因而不需要校正。
◇碘化丙啶排斥法（PIE）
具有完整細胞膜的活細胞DNA實際上是不會被PI染上色，因而，活細胞在分析前需要破壞細胞膜；另一方面，死細胞的細胞膜可透過PI，因而死細胞不需要裂解就可以染上色。
◇碘化丙啶
碘化丙啶（PI）是一種螢光分子和高選擇性DNA染料，PI可與雙鏈DNA（dsDNA）高效結合，一旦與DNA結合，激發和發射光波長轉換，與游離的 PI(沒有結合DNA)相比，螢光強度提高20-30倍（提高了信噪比），從而顯著提高測量精度。不同細胞（不同的細胞大小或細胞形態）的細胞核大小基本上是一致的，因而不需要校正。
◇碘化丙啶排斥法（PIE）
具有完整細胞膜的活細胞DNA實際上是不會被PI染上色，因而，活細胞在分析前需要破壞細胞膜；另一方面，死細胞的細胞膜可透過PI，因而死細胞不需要裂解就可以染上色。
PI排斥法測定細胞活力
對懸浮細胞用碘化丙啶排斥法（PIE）和結合總細胞計數方法，可以算出死細胞和活細胞的比例。PIE方法分析細胞活力原理是基於分析的細胞膜對PI的滲透特性。
套用
NucleoCounter能分析哺乳動物細胞的總數（濃度）、死細胞總數（濃度）、活細胞數（濃度）和細胞活力,因而，其能用於普通實驗室細胞培養,微載體培養和生物反應器培養等方面的細胞計數和測定細胞活力。
◇操作非常簡單
·樣品處理
將細胞樣品與等體積的試劑 A-100（裂解/分散緩衝液）和試劑B（穩定緩衝液）
·上樣
將分析板的頭部浸入裂解好的液體中，按下活塞，將溶液吸入分析板中
分析
將分析板放入設備中，按下“Run”鍵。30秒後，細胞計數會在設備的螢幕上顯示。數據也可通過USB接口傳送到外部電腦中或在外部印表機上列印
NucleoCassette 板
·PI固定在一次性NucleoCassette板的內部，當細胞裂解液進入到Cassette板內，PI溶解，細胞DNA被染上色
·Cassette放入NucleoCounter後，染色混合物自動轉到NucleoCassette分析室中。綠色光激發PI-DNA產生紅色光，CCD相機檢測發出的紅光，進行細胞計數
·樣品分析後，PI留在NuleoCassette內，可安全地丟棄，這樣提供了安全的樣品處理
·每塊NucleoCassette分析室厚度都經過嚴格檢測，可精確決定每個測量的分析體積，這個特性加上耐用的光學元件，使NucleoCounter無需校正
·由於NucleoCassette包含整個流路系統和測量室，因而NucleoCounter不需要清潔和維護
