現代細胞生物學技術

現代細胞生物學技術

《現代細胞生物學技術》 是2009年1月由科學出版社出版的圖書,作者是辛華。全書共12章,涉及細胞培養技術、培養細胞凋亡檢測技術、細胞融合技術等多項生物細胞技術。

基本介紹

  • 書名:現代細胞生物學技術
  • 作者:辛華
  • 出版社科學出版社
  • 出版時間:2009年1月
基本信息,內容簡介,目錄,

基本信息

編著:辛華 主編
出版:科學出版社 2009年1月出版
語種:中文
標準書號:978-7-03-021690-8
裝幀:平裝
版本:第一版
開本:16開
責任編輯:李悅,沈曉晶
字數:451千字
頁數:310
書類:理論專著/研究生教育
冊/包:8
編輯部:生物出版分社

內容簡介

本書為高等院校研究生學習細胞生物學技術用書,全書共12章,涵蓋了細胞生物學經典實驗方法和當今細胞生物學的一些新技術、新方法,既可用於研究生細胞生物學技術教學,又可作為細胞生物學技術工具書使用。
本書編入實驗共119個,內容涉及研究顯微鏡與顯微圖像分析技術、電子顯微鏡技術、細胞化學技術(細胞化學、酶、免疫、螢光細胞化學)、細胞培養技術、培養細胞凋亡檢測技術、細胞融合技術、細胞與細胞器的分離技術、細胞的原位雜交技術、流式細胞術、真核細胞基因轉染與表達技術、哺乳動物基因敲除技術和幹細胞與組織工程技術等內容。
本書對每個實驗項目的原理、技術方法及注意事項都有充分的闡述,並附有大量彩色顯微照片,以加深感性認識。本書注重體現理論意義和實際套用價值,適用於生物學醫學農學、師範院校的教師、研究生以及科研人員使用。

目錄

前言
第1章 研究顯微鏡與顯微圖像分析技術
1.1 普通光學顯微鏡的構造和使用
1.2 倒置相差顯微鏡的原理及使用
1.3 螢光顯微鏡的原理及使用
1.4 雷射掃描共聚焦顯微鏡技術
1.5 顯微操作技術
1.5.1 體細胞顯微注射技術
1.5.2 受精卵顯微注射技術
1.6 活細胞螢光顯微成像技術
1.7 細胞顯微圖像分析技術
第2章 電鏡技術
2.1 透射電鏡
2.2 TEM樣品製備技術
2.2.1 TEM超薄切片技術
2.2.2 TEM負染色技術
2.2.3 TEM細胞化學技術
2.2.4 石蠟組織與石蠟切片的TEM樣品製備
2.3 掃描電子顯微鏡
2.4 SEM樣品製備
2.4.1 常規SEM生物樣品製備
2.4.2 SEM游離細胞製備
2.4.3 SEM免疫細胞化學技術
第3章 細胞化學技術
3.1 普通細胞化學
3.1.1 細胞化學理論知識
3.1.2 PAS(periodic acid Schiff reaction)法顯示糖原
3.1.3 蘇丹Ⅲ染色法顯示脂類
3.1.4 酸性蛋白與鹼性蛋白的顯示
3.1.5 細胞骨架微絲蛋白的顯示
3.1.6 Feulgen法顯示核酸
3.1.7 甲基綠-派洛嚀法顯示核酸
3.1.8 Giemsa染色法顯示染色質/體
3.1.9 蘇木精-伊紅染色顯示細胞核和細胞質
3.2 酶細胞化學
3.2.1 酶細胞化學的基本理論
3.2.2 鹼性磷酸酶顯示
3.2.3 金屬沉澱法顯示酸性磷酸酶
3.2.4 聯苯胺法顯示過氧化物酶
3.2.5 通過琥珀酸脫氫酶活性進行MTT法檢測細胞相對存活率
3.3 免疫細胞化學
用ABC方法來鑑定體外培養的小鼠星形膠質細胞
3.4 螢光細胞化學與免疫螢光細胞化學
3.4.1 吖啶橙螢光染色法
3.4.2 間接免疫螢光細胞化學法顯示細胞中的微管蛋白
3.4.3 用雙重免疫螢光標記法鑑定體外培養的小鼠神經元和神經膠質細胞
3.4.4 用雙重免疫螢光法鑑定組織切片中的兩種細胞的方法
第4章 細胞培養技術
4.1 細胞培養的基本原理與技術
4.1.1 細胞在體外生長的條件
4.1.2 培養細胞常用設備和用品
4.1.3 培養用品的清洗
4.1.4 培養用品的滅菌與消毒
4.1.5 無菌操作的基本要領和要求
4.1.6 細胞培養用液
4.2 細胞培養的方法
4.2.1 原代細胞培養
4.2.2 細胞傳代培養
4.3 體外培養細胞的觀察方法
4.3.1 培養細胞的生長特徵與形態分型
4.3.2 培養細胞固定、染色觀察的一般標本製備
4.3.3 細胞計數方法
4.3.4 細胞的顯微測量
4.4 培養細胞的凍存、復甦與運輸
4.5 培養細胞增殖動力學方法
4.5.1 生長曲線的測定
4.5.2 分裂指數測定
4.5.3 克隆(集落)形成試驗
4.5.4 BrdU摻入法測定細胞增殖指數
4.6 腫瘤細胞黏附和侵襲能力的體外檢測方法
4.6.1 腫瘤細胞的黏附能力分析實驗
4.6.2 細胞侵襲重建基底膜實驗
4.6.3 腫瘤細胞遷移實驗
4.7 哺乳動物正常組織細胞的體外培養與套用
4.7.1 胎鼠大腦皮層神經細胞的原代培養方法
4.7.2 含藥血清對體外培養細胞的藥理實驗
4.7.3 四氯化碳致肝細胞損傷及SOD活性檢測
第5章 培養細胞凋亡檢測技術
5.1 光學顯微鏡形態學檢測
5.1.1 台盼藍染色法顯示凋亡細胞
5.1.2 蘇木精伊紅染色(HE染色)顯示凋亡細胞
5.1.3 Giemsa染色法顯示凋亡細胞
5.1.4 吖啶橙螢光染色顯示凋亡細胞
5.1.5 Ho.33342與PI螢光雙染顯示凋亡與壞死細胞
5.2 凋亡細胞的超微結構觀察
5.2.1 透射電鏡觀察凋亡細胞
5.2.2 掃描電鏡觀察凋亡細胞
5.3 凋亡細胞琥珀酸脫氫酶活性檢測(MTT法)
5.4 DNA電泳檢測凋亡梯狀帶
5.5 細胞膜磷脂醯絲氨酸螢光顯示
5.6 凋亡細胞原位末端標記
第6章 細胞工程
6.1 細胞融合
6.1.1 聚乙二醇介導的細胞融合
6.1.2 細胞電融合
6.1.3 早熟染色體凝集的誘導和觀察
6.2 細胞的分離
6.2.1 淋巴細胞的分離純化
6.2.2 死活細胞的分離
6.3 細胞器的分離
第7章 原位雜交技術
7.1 地高辛標記的原位雜交
7.2 放射性同位素標記的原位雜交
7.3 胚胎整體原位雜交
第8章 細胞化學成分的分離與測定
8.1 蛋白質SDS-PAGE凝膠電泳
8.2 真核細胞基因組DNA的提取
8.3 真核細胞RNA的提取
8.4 免疫沉澱法分離並定量分析目的蛋白質
8.5 蛋白質免疫印跡法
8.6 蛋白質雙向電泳分析細胞和組織中的蛋白質群
第9章 真核細胞基因轉染與表達技術
9.1 DNA轉染技術
9.1.1 磷酸鈣轉染技術
9.1.2 脂質體轉染技術
9.2 基因在細胞中表達的檢測技術
9.2.1 DNA印跡雜交法
9.2.2 RNA印跡雜交法
9.2.3 蛋白印跡雜交法
9.2.4 綠色螢光蛋白基因轉染及檢測
第10章 哺乳動物基因敲除技術
10.1 常用基因打靶載體的設計原則
10.1.1 P21(WAF1)基因打靶載體的構建
10.1.2 C-Crk基因打靶載體的構建
10.1.3 視黃醇脫氫酶RDH15基因打靶載體的構建
10.2 胚胎幹細胞基因敲除
10.2.1 胚胎幹細胞的增殖和維持
10.2.2 胚胎幹細胞標準電穿孔
10.2.3 鑑定、篩選重組的胚胎幹細胞
10.3 嵌合體小鼠的製備
10.3.1 嵌合體小鼠的產生
10.3.2 GPI同工酶的水平澱粉凝膠電泳檢測嵌合體小鼠
10.4 基因敲除小鼠的建立
10.4.1 提取鼠尾DNA用PCR來檢測敲除基因
第11章 幹細胞和組織工程技術
11.1 胚胎幹細胞培養技術與方法
11.1.1 小鼠胚胎幹細胞的分離、培養及誘導分化
11.1.2 人胚胎幹細胞的分離和培養
11.1.3 人類胚胎幹細胞定向分化成神經細胞
11.2 成體幹細胞培養技術與方法
11.2.1 成人骨髓基質幹細胞培養、純化及鑑定
11.2.2 人造血乾/祖細胞的體外培養與檢測技術
11.2.3 大鼠胚胎腦神經幹細胞和祖細胞的分離培養
11.3 神經組織工程
第12章 流式細胞術
12.1 流式細胞儀的結構、工作原理及套用
12.2 流式細胞儀檢測細胞膜受體(直標法)
12.3 流式細胞儀同時檢測細胞內和細胞外抗原
12.4 流式細胞儀檢測細胞凋亡(PI單染色法)
12.5 流式細胞儀檢測細胞凋亡和壞死(PI和AnnexinⅤ-FITC雙染色法)
12.6 流式細胞儀檢測凋亡細胞內游離鈣離子濃度變化
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