無花果絲孢酵母

無花果絲孢酵母為真菌門、半知菌亞綱、叢梗孢目、隱球酵母種，絲孢酵母屬(Trichosporon )。菌落白色，較大，表面乾燥，有放射狀菌絲線，邊緣呈細微毛邊。20℃，15天后菌落長滿平板。不形成子囊飽子，不形成擲孢子，也不形成冬孢子及擔孢子，顯微鏡下觀察有大量節孢子，也有少量厚壁孢子。不同化硝酸鹽，不發酵葡萄糖，同化乳糖，無八疊狀細胞群，不同化肌醇，37℃能生長。

基本介紹

• 中文名：無花果絲孢酵母
• 外文名：Trichosp figucriac
• 菌落：白色，較大，表面乾燥
• 孢子：有大量節孢子和少量厚壁孢子
• 屬：絲孢酵母屬
• 門：真菌

脂肪酶的概述

近三十年來，脂肪酶的套用開發已從食品、助消化劑、化妝品、皮革加工、洗滌劑等領域擴伸到脂肪酸生產、油脂加工、有機合成化工產品、香料及藥物製備。八十年代以來，脂肪酶在套用方面的開發研究加快了步伐，除水解油脂已進人工業化外，利用脂肪酶不需要輔酶就能催化正逆反套用其專一性等優點，在有機溶劑中催化酶合成及酯交換反應、改性油脂的生產、消旋化合物拆分等眾多領域顯示出開發前景。

脂肪酶可分為動物脂肪酶、植物脂肪酶及微生物脂肪酶。微生物脂肪酶可用發酵法進行工廠化生產，生產周期短、規模大。

無花果絲孢酵母的分離

產脂肪酶菌株初篩方法：將待分離樣品稀釋法分離為純菌株，將各純菌株接種於含有溴甲酚紫的油脂同化平板上，30℃培養1小時。產脂肪酶的菌株能分解油脂生成脂肪酸，使溴甲酚紫由紫色變為黃色，形成變色圈。以菌落直徑與變色圈直徑之比為初篩依據。

產脂肪酶菌株復篩方法：將待測菌接於100mL發酵培養基中，30℃，搖床培養，定時測其脂肪酶活性。

脂肪酶活性測定方法：脂肪酶活性單位定義：37℃10分鐘油脂水解反應。將lml發酵液每分鐘分解底物產生lμmol脂肪酸定義為一個酶活單位。

無花果絲孢酵母的鑑定

屬的鑑定

（1）液體培養特徵：麥芽汁培養基28℃靜置培養48小時，培養液較清，液面上形成一層酸膜，沒有氣泡不發酵。

(2)菌落形態：麥芽汁平板接種，28℃，7天，菌落白色，較大，表面乾燥，有放射狀菌絲線，邊緣呈細微毛邊。20℃，15天后菌落長滿平板。

(3)個體形態：馬鈴薯固體培養基畫線接種後，斜插入一蓋片，28℃培養5天，顯微鏡觀察蓋片上菌絲形態：有較長的真菌絲，菌絲有橫隔膜，在菌絲的末尾一端有許多橫隔膜，把菌絲切成條磚形，斷裂成單個細胞，排列成一左傾一右傾的細胞斷鏈，即形成節孢子。亦有芽殖，為多邊芽殖。無八疊式細胞群。

(4)孢子鑑定：不形成子囊飽子，不形成擲孢子，也不形成冬孢子及擔孢子，顯微鏡下觀察有大量節孢子，也有少量厚壁孢子。

由以上特徵，據《酵母菌分類學》，該菌為真菌門、半知菌亞綱、叢梗孢目、隱球酵母種，絲孢酵母屬(Trichosporon)。

種的鑑定

據王利1984年版《酶母菌分類學》，絲孢酵母屬共有15個種，按鑑定檢索表進行生理試驗，結果為：不同化硝酸鹽，不發酵葡萄糖，同化乳糖，無八疊狀細胞群，不同化肌醇，37℃能生長。據此判斷菌株為無花果絲孢酵母(Trichospfigucriac)。

無花果絲孢酵母產脂肪酶條件的研究

蛋白腖4%，橄欖油0.5%，KH2PO40.1%，MgSO40.1%，(NH4)2SO40.1%，pH5.0。在此基礎培養基中加入不同濃度的各種碳源，30'℃，搖瓶發酵48小時，測其酶活性。在0.5%的甜菜糖蜜為碳源時，酶活性最高，相對酶活(以葡萄糖碳源的酶活為100%)為407%。而葡萄糖碳源對產脂肪酶不利，可能是含葡萄糖培養基滅菌後生成了抑制酶形成的物質，或是葡萄糖效應抑制脂肪酶誘導生成的結果。底物類油脂可以作為碳源。

無花果絲孢酵母產脂肪酶性質的研究

將無花果絲孢酵母的30℃，48小時振盪培養物離心去菌體後，加入65%飽和度的硫酸鐵沉降酶蛋白，離心收集沉降物後，用透析膜透析硫酸鐵，再用聚乙二醇包埋法和低溫乾燥法製取酶粉。對該粗酶製劑進行酶性質的研究。

無花果絲孢酵母產脂肪酶的最適作用溫度

在25℃-52℃溫度範圍內測定了酶活性與溫度的關係，發現最適作用溫度為42℃。

無花果絲孢酵母產脂肪酶的最適作用pH

在pH5.0-10.0範圍內，測定了酶在不同pH緩衝體系下的活性，較適pH是7.0-9.0，pH8時酶活性最高。

無花果絲孢酵母產脂肪酶的熱穩定性

將酶分別在蒸餾水和pH6.5的Na2HPO4-檸檬酸緩衝液中於不同溫度下恆溫水浴處理15分鐘後，測定其殘餘酶活性，發現一定的溫度將使酶失活，而且酶在不同的體系中受熱，其耐熱性不同。