《流式細胞術的基礎和臨床套用》分別闡述了流式細胞術的原理、技術以及方法等基礎知識，進一步分析了流式細胞術及其分選技術在機體免疫功能、細胞周期、細胞凋亡等基礎研究以及臨床疾病中的套用和最新研究進展。
基本介紹
- 書名：流式細胞術的基礎和臨床套用
- 類型：科學與自然
- 出版日期：2014年6月1日
- 語種：簡體中文
- ISBN：7117188685
- 作者：吳長有
- 出版社：人民衛生出版社
- 頁數：337頁
- 開本：16
內容簡介,圖書目錄,
內容簡介
《流式細胞術的基礎和臨床套用》由人民衛生出版社出版。
圖書目錄
第一章總論
第一節流式細胞術與流式細胞儀概述
一、流式細胞術概述
二、流式細胞儀
（一）基本結構
（二）工作原理
（三）分析型流式細胞儀介紹
（四）分選型流式細胞儀介紹
第二節螢光染料的選擇與常用的染色技術
一、螢光染料的特性及其套用
二、常用的染色技術
（一）細胞免疫螢光染色技術
（二）核酸螢光染色技術
（三）螢光微球捕獲染色技術
第三節結果分析與流式圖
一、流式通道
二、流式直方圖
三、流式散點圖
四、流式等高線圖
第四節流式細胞術的基本操作與技巧
一、標本的採集、運送與儲存
二、標本的處理
（一）獨立細胞樣品製備
（二）免疫器官樣品製備
（三）實體臟器樣品製備
三、螢光素偶聯抗體及其標記方法
（一）螢光素與螢光素偶聯抗體
（二）樣品封閉
（三）螢光素偶聯抗體標記
四、光電倍增管電壓設定
五、對照的設定
（一）陰性對照的設定
（二）FMO對照
（三）陽性對照的設定
六、補償調節
（一）補償調節的原理
（二）調節補償的具體方法
（三）三色和四色分析補償調節方法
（四）影響補償大小的因素
七、閾值設定
（一）減少樣品中死細胞比例的方法
（二）流式分析時區分死細胞和活細胞的方法
八、流式分選模式選擇
（一）純度模式
（二）得率模式（富集模式）
（三）單細胞模式
九、上樣速度控制
（一）流式分析速度控制
（二）流式分選速度控制
十、分選設門基本原則
十一、流式分選基本步驟
第五節方法學特點
一、單細胞分析
二、定量分析
三、快速性
四、準確性
五、特異性
六、可重複性
七、多參數分析
第六節常見影響因素
一、溫度
二、pH
三、螢光染料濃度
四、雜質
五、細胞固定劑
六、溶液黏度
七、其他因素
第七節質量控制
一、室內質量控制
（一）分析前對樣本和試劑的質量控制
（二）分析中儀器及檢測過程的質量控制
（三）分析後數據傳輸的質量控制
二、室間質量評價
（一）國家衛計委流式檢驗室間質評
（二）國際流式檢驗室間質評
第八節新進展
一、不設門流式方法的套用
二、介紹幾個較有用的組合
第二章流式分析術及流式分選術的套用
第一節流式分析術的套用
一、細胞群比例測定
二、機體免疫功能監測及細胞表型鑑定
（一）T淋巴細胞及其亞群的檢測
（二）B淋巴細胞及其亞群的檢測
（三）NK細胞的檢測及功能分析
（四）樹突狀細胞的檢測及功能分析
（五）單核細胞的檢測及亞群分析
（六）中性粒細胞、嗜鹼性粒細胞和嗜酸性粒細胞檢測
三、檢測細胞因子
（一）胞內染色法檢測細胞因子
（二）胞內染色法與ELISA法比較
（三）CBA法測定細胞因子
（四）CBA法與ELISA法比較
四、檢測細胞增殖
（一）相對計數法
（二）CFSE標記法
（三）BrdU標記法
（四）抗Ki67抗體標記法
五、檢測細胞凋亡
（一）Annexin V/PI雙染色法
（二）SYTO/PI雙染色法
（三）細胞DNA含量分析法
（四）線粒體損傷檢測法
（五）活化的Caspase～3檢測法
（六）螢光素偶聯的Caspase抑制劑標記法
（七）甲醯胺誘導ssDNA單抗檢測法
（八）TUNEL法
六、檢測細胞周期
（一）非特異性核酸螢光染料標記法
（二）特異性細胞周期調節蛋白檢測法
七、檢測細胞殺傷能力
（一）螢光測定法與流式細胞術
（二）報告基因轉染法
八、檢測細胞吞噬功能
九、檢測胞內活化的激酶
十、檢測基因表達
（一）染色體分選
（二）數量DNA纖維作圖
（三）端粒長度檢測
（四）GFP報告基因系統
（五）lacZ報告基因系統
（六）β—內醯胺酶報告基因系統
十一、檢測鈣相關分子
（一）檢測細胞內游離的鈣離子水平
（二）檢測鈣蛋白酶活性
（三）檢測細胞膜鈣泵活性
十二、表觀遺傳學中的套用
（一）CHIP—ON—BEADS
（二）檢測細胞水平組蛋白修飾情況
十三、檢測縫隙連線介導的細胞通訊
十四、檢測細胞內pH和鈉氫轉運體活性
（一）檢測細胞內pH
（二）檢測鈉氫轉運體活性
十五、細胞間及細胞與環境間相互作用
（一）細胞遷移分析
（二）細胞接觸及黏附分析
十六、其他套用
（一）檢測活性氧簇
（二）檢測細胞內游離的鋅離子水平
（三）螢光共振能量轉移結合流式細胞術檢測兩種蛋白質的直接結合
（四）檢測端粒長度
（五）檢測脂筏結合蛋白
第二節流式分選術的套用
一、流式分選與磁性分選
二、流式分選獨立群體細胞
三、流式分選非獨立細胞群體
四、流式分選低比例細胞群體
（一）強勢細胞群的輻射影響
（二）流式分選結合磁性分選
（三）二次分選法
五、流式分選幹細胞
（一）流式分選造血幹細胞
（二）流式分選間充質幹細胞
（三）流式分選腫瘤幹細胞
……
第三章流式細胞術的臨床套用
附錄
第一節流式細胞術與流式細胞儀概述
一、流式細胞術概述
二、流式細胞儀
（一）基本結構
（二）工作原理
（三）分析型流式細胞儀介紹
（四）分選型流式細胞儀介紹
第二節螢光染料的選擇與常用的染色技術
一、螢光染料的特性及其套用
二、常用的染色技術
（一）細胞免疫螢光染色技術
（二）核酸螢光染色技術
（三）螢光微球捕獲染色技術
第三節結果分析與流式圖
一、流式通道
二、流式直方圖
三、流式散點圖
四、流式等高線圖
第四節流式細胞術的基本操作與技巧
一、標本的採集、運送與儲存
二、標本的處理
（一）獨立細胞樣品製備
（二）免疫器官樣品製備
（三）實體臟器樣品製備
三、螢光素偶聯抗體及其標記方法
（一）螢光素與螢光素偶聯抗體
（二）樣品封閉
（三）螢光素偶聯抗體標記
四、光電倍增管電壓設定
五、對照的設定
（一）陰性對照的設定
（二）FMO對照
（三）陽性對照的設定
六、補償調節
（一）補償調節的原理
（二）調節補償的具體方法
（三）三色和四色分析補償調節方法
（四）影響補償大小的因素
七、閾值設定
（一）減少樣品中死細胞比例的方法
（二）流式分析時區分死細胞和活細胞的方法
八、流式分選模式選擇
（一）純度模式
（二）得率模式（富集模式）
（三）單細胞模式
九、上樣速度控制
（一）流式分析速度控制
（二）流式分選速度控制
十、分選設門基本原則
十一、流式分選基本步驟
第五節方法學特點
一、單細胞分析
二、定量分析
三、快速性
四、準確性
五、特異性
六、可重複性
七、多參數分析
第六節常見影響因素
一、溫度
二、pH
三、螢光染料濃度
四、雜質
五、細胞固定劑
六、溶液黏度
七、其他因素
第七節質量控制
一、室內質量控制
（一）分析前對樣本和試劑的質量控制
（二）分析中儀器及檢測過程的質量控制
（三）分析後數據傳輸的質量控制
二、室間質量評價
（一）國家衛計委流式檢驗室間質評
（二）國際流式檢驗室間質評
第八節新進展
一、不設門流式方法的套用
二、介紹幾個較有用的組合
第二章流式分析術及流式分選術的套用
第一節流式分析術的套用
一、細胞群比例測定
二、機體免疫功能監測及細胞表型鑑定
（一）T淋巴細胞及其亞群的檢測
（二）B淋巴細胞及其亞群的檢測
（三）NK細胞的檢測及功能分析
（四）樹突狀細胞的檢測及功能分析
（五）單核細胞的檢測及亞群分析
（六）中性粒細胞、嗜鹼性粒細胞和嗜酸性粒細胞檢測
三、檢測細胞因子
（一）胞內染色法檢測細胞因子
（二）胞內染色法與ELISA法比較
（三）CBA法測定細胞因子
（四）CBA法與ELISA法比較
四、檢測細胞增殖
（一）相對計數法
（二）CFSE標記法
（三）BrdU標記法
（四）抗Ki67抗體標記法
五、檢測細胞凋亡
（一）Annexin V/PI雙染色法
（二）SYTO/PI雙染色法
（三）細胞DNA含量分析法
（四）線粒體損傷檢測法
（五）活化的Caspase～3檢測法
（六）螢光素偶聯的Caspase抑制劑標記法
（七）甲醯胺誘導ssDNA單抗檢測法
（八）TUNEL法
六、檢測細胞周期
（一）非特異性核酸螢光染料標記法
（二）特異性細胞周期調節蛋白檢測法
七、檢測細胞殺傷能力
（一）螢光測定法與流式細胞術
（二）報告基因轉染法
八、檢測細胞吞噬功能
九、檢測胞內活化的激酶
十、檢測基因表達
（一）染色體分選
（二）數量DNA纖維作圖
（三）端粒長度檢測
（四）GFP報告基因系統
（五）lacZ報告基因系統
（六）β—內醯胺酶報告基因系統
十一、檢測鈣相關分子
（一）檢測細胞內游離的鈣離子水平
（二）檢測鈣蛋白酶活性
（三）檢測細胞膜鈣泵活性
十二、表觀遺傳學中的套用
（一）CHIP—ON—BEADS
（二）檢測細胞水平組蛋白修飾情況
十三、檢測縫隙連線介導的細胞通訊
十四、檢測細胞內pH和鈉氫轉運體活性
（一）檢測細胞內pH
（二）檢測鈉氫轉運體活性
十五、細胞間及細胞與環境間相互作用
（一）細胞遷移分析
（二）細胞接觸及黏附分析
十六、其他套用
（一）檢測活性氧簇
（二）檢測細胞內游離的鋅離子水平
（三）螢光共振能量轉移結合流式細胞術檢測兩種蛋白質的直接結合
（四）檢測端粒長度
（五）檢測脂筏結合蛋白
第二節流式分選術的套用
一、流式分選與磁性分選
二、流式分選獨立群體細胞
三、流式分選非獨立細胞群體
四、流式分選低比例細胞群體
（一）強勢細胞群的輻射影響
（二）流式分選結合磁性分選
（三）二次分選法
五、流式分選幹細胞
（一）流式分選造血幹細胞
（二）流式分選間充質幹細胞
（三）流式分選腫瘤幹細胞
……
第三章流式細胞術的臨床套用
附錄
