氨基甲烷緩衝液

氨基甲烷緩衝液

氨基甲烷緩衝液是中化學製劑,氨基甲烷緩衝液不僅被廣泛用作核酸和蛋白質的溶劑,還有許多重要用途。三羥甲基氨基甲烷被用於不同pH條件下的蛋白質晶體生長。三羥甲基氨基甲烷緩衝液的低離子強度特點可用於線蟲核纖層蛋白的中間纖維的形成。

基本介紹

定義,緩衝特性,製備,用途,參考文獻,

定義

三羥甲基氨基甲烷(tris(hydroxymethyl)aminomethane,一般簡稱為Tris)是一種有機化合物,其分子式為(HOCH2)3CNH2。Tris被廣泛套用於生物化學分子生物學實驗中的緩衝液的製備。例如,在生物化學實驗中常用的TAE和TBE緩衝液(用於核酸的溶解)都需要用到Tris。由於它含有氨基,因此可以與發生縮合反應。
氨基甲烷緩衝液

緩衝特性

Tris為弱鹼,在室溫(25℃)下,它的pKa為8.1;根據緩衝理論,Tris緩衝液的有效緩衝範圍在pH7.0到9.2之間。
Tris鹼的水溶液pH在10.5左右,一般加入鹽酸以調節pH值至所需值,即可獲得該pH值的緩衝液。但同時應注意溫度對於Tris的pKa的影響。 不同溫度下TrispKa(0.1M)
溫度(℃)
0
20
25
37
pKa
8.76
8.20
8.06
7.72
衍生緩衝液由於Tris緩衝液為弱鹼性溶液,DNA在這樣的溶液中會被去質子化,從而提高其溶解性。人們常常在Tris鹽酸緩衝液中加入EDTA製成“TE緩衝液”,TE緩衝液被用於DNA的穩定和儲存。如果將調節pH值的酸溶液換成乙酸,則獲得“TAE緩衝液”(Tris/Acetate/EDTA),而換成硼酸則獲得“TBE緩衝液”(Tris/Borate/EDTA)。這兩種緩衝液通常用於核酸電泳實驗中。

製備

Tris可以由兩步反應生成:先由硝基甲烷生成過渡態(HOCH2)3CNO2,然後再由過渡態還原得到Tris。

用途

Tris緩衝液不僅被廣泛用作核酸和蛋白質的溶劑,還有許多重要用途。Tris被用於不同pH條件下的蛋白質晶體生長。Tris緩衝液的低離子強度特點可用於線蟲(C.elegans)核纖層蛋白(lamin)的中間纖維的形成。Tris也是蛋白質電泳緩衝液的主要成分之一。此外,Tris還是製備表面活性劑硫化促進劑和一些藥物的中間物。Tris也被用作滴定標準物。

參考文獻

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