差減雜交

差減雜交通過Tester（T,待富集特有序列的樣本）第一鏈cDNA與Diver（D,用於扣除tester中共有序列的樣本）mRNA在一定溫度下復性，並用羥基磷灰石柱層析除去cDNA*mRNA雜合體，以此富增Tester樣本中特異的cDNA。較傳統的差示篩選方法靈敏度有所提高，但mRNA需要大量的Driver才能使雜交充分進行。此外經過層析，所回收的cDNA量很低，嚴重影響實驗的進一步進行。

分類

代表性差異分析（representationaldifferenec analysis, RDA）
酶降解差減雜交（enzymaticdegradingsubtraction, EDS）
接頭捕獲差減雜交（linker capture subtraction LCS）
抑制性差減雜交（suppression subtractive hybridization SSH）

步驟

第一步：對T群和D群的cDNA（原核生物為DNA，下同）進行PCR擴增。
第二步：給T群的cDNA加“修飾”，使之區別於D群的cDNA，可以通過加接頭（RDA、LCS及SSH）或摻入放射性核素來實現。
第三步：用過量的D cDNA，與經“修飾”過的T cDNA混合，經變性後退火復性，T與D中共有的序列形成T-D異源雜交分子，T中特有的序列形成T-T同源雜交分子
第四步：通過PCR擴增或酶解反應，只有T-T分子能得到有效擴增或保留。
這種差減雜交步驟可重複數次以儘可能去除共有的序列，同時使T群中特有的序列得到富集。