福爾根氏反應（亦譯作富爾根式反應Feulgen′s reaction）指由R.Feulgen和H.Rossenbeck（1924）提出的鑑定DNA的細胞化學反應。將細胞用 RNHCl在60℃下水解（水解時間由固定液而定）。
如用Schi－ff′s試劑來作用，由於嘌呤鹼基特異性的游離所生成的脫氧核糖的醛基與復紅（fuchsin）反應，核染色體染成紫紅色，表示DNA的存在。對由在最適條件基礎上的富爾根反應所顯色的DNA，可用顯微分光測定法進行定量。
基本介紹
- 中文名：福爾根反應(富爾根反應）
- 外文名：Feulgen′s reaction
- 釋義：鑑定DNA的細胞化學反應
- 反應原理：適宜的水解時間是成功的關鍵
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福爾根反應原理
顯示DNA的傳統方法是富爾根（Feulgen）反應，切片先用稀鹽酸處理，DNA經弱酸（1mol/L HCL）水解後，在60℃條件下使DNA分子中脫氧核糖與嘌呤之間的連線打開，脫氧核糖的一端釋放出醛基，並在原位與Schiff試劑反應生成紫紅色產物。原理同PAS反應，使細胞核DNA顯紫紅色。在此過程中RNA不受影響，故染色具有DNA特異性。準確的溫度和鹽酸濃度，適宜的水解時間是成功的關鍵。水解過度或不足均降低染色強度。
配製試劑：
1. 1mol/L HCL：將8.5ml濃鹽酸和91.5ml蒸餾水混合即得；
2. 0.5%亮綠水溶液；
染色步驟：
1. 取培養於蓋玻片上的貼壁原代細胞，用Hanks液漂洗三次；
2. 在卡諾（Carnoy）固定液中固定10min，然後蒸餾水洗三次；
3. 移入60℃濃度為1mol/L的HCL中靜置10min；
4. 用蒸餾水漂洗幾次；
5. 放入Schiff試劑中靜置30—60min，可隨時檢查顯色情況；
6. 用自來水沖洗5min；
7. 再用蒸餾水漂洗；
8. 不同濃度梯度乙醇溶液脫水；
9. 用二甲苯透明、樹膠封片；
福爾根反應-相關內容
脫氧戊糖核酸，縮寫 DNA。指核酸的戊糖部分為D-2-脫氧核糖而言。是基因的本質物質。鹼基有腺嘌呤、鳥便嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶和其它成分，有少量的甲基化鹼基，即5-甲基胞嘧啶，6-甲基氨基嘌呤。某種噬菌體DNA的胞嘧啶由5-羥甲基胞嘧啶，胸腺嘧啶由5-羥甲基尿嘧啶代替或含有尿嘧啶。核苷通過3′，5′-磷酸二酯鍵形成雙股鏈狀多核苷酸，用氫鍵形成雙股螺旋結構沃華特生。病毒DNA分子量為 1—200×106，除特殊者例外，一個病毒粒子中含有一個分子的核酸，但也有的噬菌體的核酸成分是環狀單鏈DNA。認為細菌染色體是由一個分子DNA形成的，大腸桿菌 DNA的分子量約為2.5×109。高等動植物細胞核中鹼性蛋白質（組蛋白，魚精蛋白等）與其它相結合，而以脫氧核糖核蛋白的形態而存在。細胞質中特別是線粒體、葉綠體等也有少量DNA存在。高分子量的 DNA在溶液中易被機械的切斷，從噬菌體和病毒以外的材料提取的DNA，在多數情況下，一般認為是原來分子的片斷。加熱或鹼處理可使雙鏈間的氫鍵斷開成為單鏈形態，稱此為 DNA變性。定量測定DNA的方法，包括測定磷酸、糖（脫氧核糖）的顯色反應（二苯胺反應，半胱氨酸硫酸反應，吲哚反應等），以及由鹼基部分紫外吸收（257-270毫微米）的。組織切片中富爾根反應檢測法是很有用的。用四種三磷酸脫氧核苷為前體，以親本DNA為模板，DNA的複製是半保守式的。已知有多種特異性的DNA分解酶，用於DNA結構的研究。
